【摘要】：目的:觀察腦缺血再灌注(cerebral ischemia reperfusion,CIR)后大鼠缺血灶周邊腦組織不同時間點神經血管單元(neurovascular unit,NVU)超微結構變化及相關的神經核抗原(neuronal nuclear antigen,NeuN)、膠質纖維酸性蛋白(glial fibrillary acidic protein,GFAP)和層粘連蛋白(laminin,LN)在不同時間點的表達變化,探討三七總皂苷(panax notoginseng saponins,PNS)對腦缺血后大鼠腦組織NVU超微結構及相關蛋白表達的影響,進一步闡明PNS對腦缺血具有保護作用。方法:(1)雄性SD大鼠隨機分為假手術組、模型組和治療組3組,各組分別又按腦缺血再灌注后24 h、72 h、7 d、3 w分為4個亞組,每亞組大鼠12只。采用線栓法制作局灶性大腦中動脈閉塞(middle cerebral artery occlusion,MCAO)模型。采用Longa法評分標準檢測各組大鼠術后4 h神經功能評分,隨之各組進行干預,分別在缺血再灌注后24 h、72 h、7 d、3 w進行神經功能評分。(2)應用蛋白質印跡(western blot,WB)法檢測神經血管單元各組分相關蛋白NeuN、GFAP和LN的表達變化。(3)透射電鏡下觀察各組大鼠缺血灶周邊腦組織不同時間點的NVU超微結構變化。結果:(1)神經功能評分:干預前即術后4 h治療組和模型組神經功能評分比較無明顯差異;PNS干預后治療組大鼠神經功能評分逐漸改善,缺血再灌注后24 h與模型組比較,差異無統(tǒng)計學意義(P0.05),再灌注72 h、7 d、3 w的大鼠神經缺損評分與同時間點模型組相比差異有統(tǒng)計學意義(P0.05)。(2)大鼠MCAO模型腦肉眼直觀圖:IR 3w模型組可見明顯腦梗死灶,腦皮質區(qū)表面蒼白腫脹,梗死中心區(qū)可有不同程度腦組織萎縮,血管分支少,細小,走行不清;治療組腦皮質區(qū)表面蒼白不明顯,組織腫脹較模型組輕,腦缺血梗死中心區(qū)較模型組縮小,血管分布較模型組豐富,分支多,走行清晰可見。(3)NeuN、GFAP和LN蛋白印跡結果:假手術組NeuN、GFAP、LN蛋白各時間點表達均無明顯改變。模型組NeuN蛋白各時間點表達均低于假手術組,其中IR 24 h、7 d、3 w表達與假手術組比較差異有統(tǒng)計學意義(P0.05);治療組NeuN的表達量逐漸升高,各時間點表達量均高于模型組,在IR 72 h后基本接近正常,其中7d、3 w與同時間點模型組相比,差異有統(tǒng)計學意義(P0.05)。模型組GFAP蛋白相對表達量逐漸增加,相對假手術組仍低,各時間點的GFAP表達量與假手術組相比較,差異有統(tǒng)計學意義(P0.05);治療組各時間點相對表達量較模型組升高,IR 72 h、7 d、3 w表達相比模型組差異有統(tǒng)計學意義(P0.05),至IR 7 d后,治療組GFAP蛋白表達基本接近正常。模型組LN表達量逐漸增加,各時間點仍低于假手術組,24 h、72 h、7 d相比假手術組差異有統(tǒng)計學意義(P0.05),而3 w與假手術組相比較差異無統(tǒng)計學意義(P0.05);治療組各時間點LN蛋白表達量較模型組升高,其7 d、3 w表達與模型組相比較,差異有統(tǒng)計學意義(P0.05)。(4)電鏡觀察發(fā)現(xiàn)再灌注24 h、72 h、7 d、3 w治療組大鼠腦組織NVU超微結構的病理形態(tài)損傷均較同時間點模型組明顯減輕。結論:(1)PNS對腦缺血后NVU的保護作用,可能與上調腦缺血后NeuN、GFAP、LN蛋白表達有關。(2)PNS能同時減輕腦缺血后NVU損傷的病理形態(tài)變化。(3)PNS可通過整合促進腦缺血后NVU的神經元、膠質細胞和微血管的修復,改善神經功能缺損癥狀,對腦缺血具有保護作用。
【圖文】：

圖 2-1 大鼠 MCAO 模型成功后典型體征e 2- 1 Typical signs of successful MCAO mode再灌注后 Longa 神經功能評分的變化： 2-1 各組大鼠神經功能評分的比較（ ±s, n=son of neurological deficit scores in rats among e72 h 亞組 7 d 亞組 干預前 72 h 干預前 7 0 0 0 0.60 1.83±0.65 1.92±0.63 1.92±0.63 1.50±0.65△1.83±0.65 1.08±0.36▲1.92±0.63 0.92±0

比較無明顯差異；PNS 干預后治療組大鼠神經功能評分逐漸顯降低，缺血再灌注后 24 h 與模型組比較，差異無統(tǒng)計學意 的大鼠神經缺損評分與同時間點模型組相比差異有統(tǒng)計學AO 模型取腦后肉眼直觀圖比較，肉眼觀察可見 IR 3 w 假手術組大鼠腦組織雙側基本對稱布豐富，，走行清晰連續(xù)；模型組可見明顯腦梗死灶，腦皮質區(qū)可有不同程度腦組織萎縮，血管分支少，細小，走行不清不明顯，組織腫脹較模型組輕，腦缺血梗死中心區(qū)較模型組富，分支多，走行清晰可見。見圖 2-2。
【學位授予單位】：右江民族醫(yī)學院
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2018
【分類號】：R285.5

【參考文獻】

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1 陳杰;袁捷;韓祖成;曹姻莉;;三七總皂苷對腦缺血-再灌注損傷大鼠腦神經的保護作用及機制[J];中國藥業(yè);2015年24期

2 王海芳;;三七總皂苷保護腦缺血再灌注腦損傷機制的實驗研究進展[J];山西中醫(yī)學院學報;2014年02期

3 王瓊;孫湛;買買提祖農·買蘇爾;陳永香;龍梅;閆玉仙;;三七總皂苷對大鼠腦缺血再灌注損傷后腦組織的凋亡抑制作用[J];現(xiàn)代生物醫(yī)學進展;2013年15期

4 胡曉松;周東;唐瑜;劉靜;李娟;;層粘連蛋白及基質金屬蛋白酶-9在大鼠局灶性腦缺血梗死區(qū)周圍的表達及意義[J];華西醫(yī)學;2013年05期

5 曹雙雙;劉志輝;祝新莉;張培;王彬;李健;;三七總皂苷對腦梗死大鼠腦組織N-甲基-D天冬氨酸受體-1表達的影響[J];臨床神經病學雜志;2012年06期

6 黃小平;譚華;劉文龍;鄧常清;;黃芪總苷和三七總皂苷配伍對小鼠腦缺血再灌注腦組織能量障礙的影響[J];湖南中醫(yī)藥大學學報;2012年07期

7 譚華;黃小平;鄧常清;;黃芪總苷和三七總皂苷配伍對小鼠缺血再灌注腦組織氧化應激的影響[J];中西醫(yī)結合學報;2010年05期

8 劉旺華;李花;周小青;陳淑華;何倩;莫莉;;三七總皂苷對大鼠腦缺血再灌注海馬細胞Ca~(2+)及線粒體膜電位的影響[J];中華中醫(yī)藥學刊;2009年01期

9 張峰;李曉紅;;大鼠局灶性腦缺血再灌注后腫瘤壞死因子表達的變化及三七總皂苷的作用研究[J];中西醫(yī)結合心腦血管病雜志;2007年07期

10 唐映紅;張淑萍;梁燕;鄧常清;;三七總皂苷對大鼠腦缺血再灌注后白細胞介素-1β和其相關因子及半胱氨酸天冬氨酸特異性蛋白酶表達的影響[J];中西醫(yī)結合學報;2007年03期

本文編號：2673780