【摘要】：目的:探討制黃精水煎劑對化療后造血功能抑制致“血虛、虛勞”機體造血系統(tǒng)的影響及作用機制,明確黃精“補諸虛,填精髓”作用的生物學(xué)實質(zhì)及傳統(tǒng)滋補腎精中藥在臨床治療腫瘤、血液疾病中的潛在應(yīng)用價值。方法:本研究采用腹腔注射環(huán)磷酰胺導(dǎo)致小鼠造血功能抑制,并用不同濃度的制黃精水煎劑灌胃,采用血細(xì)胞計數(shù)測量外周血細(xì)胞數(shù)量;采用臟器稱重方法測量胸腺、脾臟指數(shù);采用MTT法、細(xì)胞培養(yǎng)、祖細(xì)胞集落分析方法檢測骨髓細(xì)胞增殖能力、基質(zhì)細(xì)胞對正常骨髓細(xì)胞的粘附能力、不同祖細(xì)胞集落的產(chǎn)率;采用實時熒光定量PCR,檢測實驗小鼠腎臟的紅細(xì)胞生成素及脾臟紅細(xì)胞生成素受體的m RNA表達(dá)量。結(jié)果:本研究發(fā)現(xiàn)1、制黃精水煎劑低、中、高劑量組均可升高環(huán)磷酰胺致造血功能抑制小鼠的紅細(xì)胞、血紅蛋白、血小板和白細(xì)胞的值,且呈劑量依賴關(guān)系;其中紅細(xì)胞、血紅蛋白、血小板在用藥第7天就開始升高,而白細(xì)胞在用藥第14天開始升高。2、制黃精水煎劑各劑量組在用藥第7天,小鼠胸腺指數(shù)、脾臟指數(shù)均呈上升趨勢,同時中、高劑量組脾臟指數(shù)還顯著高于低劑量組;在10、14天時,高劑量組臟器指數(shù)仍然高于生理鹽水組,14天時高劑量組的臟器指數(shù)仍然高于低劑量組,中劑量組脾臟指數(shù)也高于生理鹽水組。3、第7、10、14天時,制黃精水煎劑各劑量組的骨髓細(xì)胞增殖能力(吸光度)均顯著高于生理鹽水組,且呈劑量依賴性,高劑量組的吸光度從第7天到第14天的變化為由0.142±0.007上升到0.174±0.005,生理鹽水組的相應(yīng)值0.121±0.007上升到0.126±0.004。4、第10天時,制黃精水煎劑高劑量組將模型組小鼠骨髓基質(zhì)細(xì)胞的粘附力由19.45%提高到27.55%。5、灌胃高劑量制黃精水煎劑第10天,小鼠骨髓早期紅系祖細(xì)胞、晚期紅系祖細(xì)胞、粒-巨噬系祖細(xì)胞、巨核系祖細(xì)胞集落數(shù)均明顯上升,與灌胃生理鹽水組有顯著差異。6、第10天時,制黃精水煎劑高劑量組腎臟紅細(xì)胞生成素基因的表達(dá)是灌胃生理鹽水組的近三倍;脾臟紅細(xì)胞生成素受體基因的表達(dá)也上升,與生理鹽水組有顯著差異。7、灌胃生理鹽水組各時間點、各檢測指標(biāo)值均低于模型組,尤其是各時間點的血紅蛋白含量、14天時的紅細(xì)胞含量及10天時的晚期紅系祖細(xì)胞集落數(shù),均顯著低于模型組。結(jié)論:本研究證實:1、制黃精水煎劑可通過提高骨髓細(xì)胞的增殖能力、促使造血干細(xì)胞向不同系別的造血祖細(xì)胞分化,促進(jìn)祖細(xì)胞增殖,改善環(huán)磷酰胺致造血功能抑制小鼠的外周血象,但對不同系別的細(xì)胞起效時間可能不同。其中對紅細(xì)胞的恢復(fù)作用還可以通過促進(jìn)腎臟分泌紅細(xì)胞生成素和提高脾臟紅細(xì)胞生成素受體的表達(dá)來實現(xiàn)。2、制黃精水煎劑可以提高造血功能抑制小鼠的骨髓基質(zhì)細(xì)胞粘附能力,改善造血誘導(dǎo)微環(huán)境的功能,促進(jìn)造血恢復(fù)。3、制黃精水煎劑可提高造血功能抑制小鼠的脾臟、胸腺指數(shù),提高其機體免疫力。4、長期灌胃可能會對實驗動物造成一定的損傷,必須在實驗中設(shè)置灌胃生理鹽水對照組,以規(guī)避系統(tǒng)誤差。
【圖文】：

4 討論在胚胎發(fā)育第 3 周，人的原始血細(xì)胞在卵黃囊壁的血島內(nèi)發(fā)生，第 6 周血內(nèi)的造血干細(xì)胞隨血流入肝內(nèi)開始造血，第 12 周逐漸遷至脾內(nèi)造血，胚胎周，也可最早在 12-15 周，骨髓開始造血，成為主要的造血器官，維持終生造能力。骨髓位于骨髓腔，分為紅骨髓和黃骨髓兩種，紅骨髓因含有大量的紅細(xì)和不同成熟程度的紅系前體細(xì)胞而呈紅色，黃骨髓主要由脂肪細(xì)胞組成。胎兒嬰幼兒時期的骨髓均為紅骨髓，，造血活躍，大約從 5 歲開始長骨的髓腔內(nèi)出現(xiàn)肪細(xì)胞，逐漸由紅骨髓變?yōu)辄S骨髓，18 歲時幾乎所有的肢體骨的骨髓腔中都黃骨髓，其造血功能也隨之消失。但黃骨髓中仍含少量的造血干細(xì)胞，有一定高劑量組 正常組圖 2-1 各組小鼠骨髓基質(zhì)培養(yǎng)第 7 天時的貼壁情況（未染色，200×）

成都中醫(yī)藥大學(xué) 2017 屆碩士學(xué)位論文表 3.1 CFU-E、BFU-E、CFU-GM、CFU-Meg 培養(yǎng)體系的組成CFU-GM CFU-E BFU-E CFU-Meg2-Me(10-4mol/L) 0.2ml 0.2ml 0.2ml 0.2mlL-Glu(3%) 0.03ml 0.03ml 0.03ml 0.03ml胎牛血清 0.5ml 0.5ml 0.5ml 0.5mlrhEPO(100IU/ml) - 0.02ml 0.02ml 0.02mlIL-3(40ng/ml) - - 0.05ml -RmGM-CSF(50ng/ml) 0.05ml - -rmTPO(50ng/ml) - - - 0.1mlBMNCs 1×105/ml 1×105/ml 1×105/ml 1×105/mlIMDM To1.9ml To1.9ml To1.9ml To1.9ml3%Agar 0.1ml 0.1ml 0.1ml 0.1ml
【學(xué)位授予單位】：成都中醫(yī)藥大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2017
【分類號】：R285.5

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號：2672681