【摘要】：目的探討銀杏葉中異鼠李素(isorhamnetin,ISO)對RAW264.7細(xì)胞向破骨細(xì)胞分化的影響及其可能的相關(guān)分子機(jī)制。方法在核因子κB受體活化因子配基(receptor activator of NF-κB ligand,RANKL)誘導(dǎo)RAW264.7細(xì)胞分化為破骨細(xì)胞的同時,加入不同濃度的ISO(1~10μM),研究其對RAW264.7細(xì)胞向破骨細(xì)胞分化的影響,通過CCK8法檢測及評估各作用濃度ISO的細(xì)胞毒性,通過抗酒石酸酸性磷酸酶(tartrate-resis-tant acid phosphatase staining,TRAP)染色及骨片吸收效果判定其對RAW264.7細(xì)胞向破骨細(xì)胞分化的影響。實時定量PCR檢測破骨細(xì)胞分化過程的標(biāo)志性基因:TRAP、組織蛋白酶K(cathepsin K,Ctsk)、金屬基質(zhì)蛋白酶9(matrix metallo protein,MMP-9);分化相關(guān)轉(zhuǎn)錄因子:原癌基因c-Fos(proto-oncogene protein,c-Fos)、核轉(zhuǎn)錄因子激活的T細(xì)胞1(nuclear factor of activated T-cells cytoplasmic 1,NFATc1)的表達(dá)及破骨細(xì)胞分化下游因子NF-κB p65信號通路的磷酸化水平。結(jié)果不同濃度的ISO(1~10μM)對RAW264.7細(xì)胞無細(xì)胞毒性,并且能抑制TRAP活性,減少骨吸收陷窩數(shù)量,在濃度為10μM時最為顯著;ISO能顯著降低TRAP、Ctsk、MMP-9、c-Fos、NFATc1及NF-κB p65的m RNA表達(dá)。結(jié)論 ISO對RAW264.7細(xì)胞向破骨細(xì)胞的分化具有抑制作用,其機(jī)制可能與經(jīng)典NF-κB通路的抑制有關(guān)。
【圖文】：

yISOtreatmentasdetectedbyPCR0μM1μM2μM5μM10μM1.51.00.50.0吸收面積相對比****a：空白對照組（0μMISO＋0ng/mLRANKL）；b：陽性對照組（0μMISO＋50ng/mLRANKL）；c：1μMISO＋50ng/mLRANKL；d：2μMISO＋50ng/mLRANKL；e：5μMISO＋50ng/mLRANKL；f：10μMISO＋50ng/mLRANKL；g：陽性對照組和實驗組的相對于對照組的骨吸收面積比值；*為與陽性對照組比較P<0.05；**為與陽性對照組比較P<0.01；***為與陽性對照組比較P<0.001。ISO：異鼠李素；RANKL：核因子κB受體活化因子配基。圖5ISO作用后各組骨片骨吸收陷窩形成情況掃描電鏡×400Figure5SEMpicturesoftheboneresorptionlacuna（×400）defabcg100500吸收面積相對百分比（%）****g陽性對照組1μMISO組2μMISO組5μMISO組10μMISO組組別defabca：空白對照組（0μMISO＋0ng/mLRANKL）；b：陽性對照組（0μMISO＋50ng/mLRANKL）；c：1μMISO組（1μMISO＋50ng/mLRANKL）；d：2μMISO組（2μMISO＋50ng/mLRANKL）；e：5μMISO組（5μMISO＋50ng/mLRANKL）；f：10μMISO組（10μMISO＋50ng/mLRANKL）；g：陽性對照組和實驗組相對于空白對照組的骨吸收面積百分比；*為與陽性對照組比較P<0.05；**為與陽性對照組比較P<0.01。ISO：異鼠李素；RANKL：核因子κB受體活化因子配基。圖5ISO作用后各組骨片骨吸收陷窩形成情況掃描電鏡×400Figure5SEMimagesofboneresorptionlacuna×400·163·

【相似文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前9條

1 黃曉斌;孫元明;李雨民;楊福軍;;破骨細(xì)胞分化成熟因子及其信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路[J];中國骨質(zhì)疏松雜志;2007年11期

2 史淇月;楊柳;魏鉑沅;范金柱;王龍;頡強(qiáng);劉建;羅卓荊;;雌激素通過調(diào)節(jié)EphB4/EphrinB2信號參與破骨細(xì)胞分化[J];中國骨質(zhì)疏松雜志;2014年04期

3 郎紅梅;金小嵐;萬勇;游志清;;低氧對小鼠破骨細(xì)胞分化影響的時間依賴關(guān)系[J];中國組織工程研究與臨床康復(fù);2010年28期

4 曾潤銘 ,張忠民 ,金大地;類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎滑膜細(xì)胞向破骨細(xì)胞分化實驗研究[J];中華風(fēng)濕病學(xué)雜志;2005年03期

5 李世昌;季瀏;馬濤;羅劍;李珍惜;鄭慶云;;不同方式跑臺運(yùn)動對去卵巢小鼠破骨細(xì)胞分化及相關(guān)調(diào)節(jié)因子的影響[J];中國體育科技;2011年05期

6 賈鵬;張增利;徐又佳;林華;;鐵超載對小鼠單核細(xì)胞RAW264.7向破骨細(xì)胞分化的影響[J];中華骨質(zhì)疏松和骨礦鹽疾病雜志;2011年01期

7 石國勛;鄭祥雄;任天麗;;破骨細(xì)胞分化刺激因子在佐劑性關(guān)節(jié)炎大鼠滑膜中的表達(dá)及意義[J];山東醫(yī)藥;2011年33期

8 趙國陽;狄東華;何銀鋒;沈光思;徐又佳;;鐵調(diào)素對小鼠單核細(xì)胞RAW264.7向破骨細(xì)胞分化的影響[J];中華骨質(zhì)疏松和骨礦鹽疾病雜志;2013年03期

9 叢悅;饒亞嵐;陳肖華;董波;李峰生;王治東;羅慶良;;鈣結(jié)合蛋白S100A8在γ射線損傷小鼠巨噬細(xì)胞RAW264.7中的作用[J];輻射研究與輻射工藝學(xué)報;2010年05期

中國重要會議論文全文數(shù)據(jù)庫 前4條

1 賈鵬;徐又佳;;鐵離子對破骨細(xì)胞分化及骨吸收的影響[A];中華醫(yī)學(xué)會第六次全國骨質(zhì)疏松和骨礦鹽疾病學(xué)術(shù)會議暨中華醫(yī)學(xué)會骨質(zhì)疏松和骨礦鹽疾病分會成立十周年論文匯編[C];2011年

2 趙國陽;徐又佳;狄東華;;高鐵環(huán)境對成骨細(xì)胞、破骨細(xì)胞分化的影響[A];中華醫(yī)學(xué)會第七次全國骨質(zhì)疏松和骨礦鹽疾病學(xué)術(shù)會議論文匯編[C];2013年

3 趙國陽;徐又佳;;鐵調(diào)素對小鼠單核細(xì)胞RAW264.7向破骨細(xì)胞分化的影響[A];中華醫(yī)學(xué)會第七次全國骨質(zhì)疏松和骨礦鹽疾病學(xué)術(shù)會議論文匯編[C];2013年

4 田s，

本文編號：2669892