【摘要】：目的觀察強骨寶對疲勞性大鼠膝骨關(guān)節(jié)炎軟骨的形態(tài)學(xué)改變及檢測關(guān)節(jié)軟骨中MMP-3和ADAMTS-7表達的影響,以探討該方的作用機制。方法1.疲勞性損傷誘發(fā)去勢大鼠膝骨關(guān)節(jié)炎模型的建立與鑒定6月齡雌性SD大鼠24只,隨機分為空白組,去卵巢組和跑步組,每組8只。去卵巢組和跑步組在無菌條件下摘除雙側(cè)卵巢,空白組不做任何處理�？瞻讓φ战M和去卵巢組正�；顒�,跑步組大鼠進行上坡跑臺運動,以建立勞損模型。跑臺運動方案設(shè)定為30m/min、30min/次,60min/d、坡度為16°,每周休息1天,連續(xù)訓(xùn)練6周。然后取大鼠股骨,觀察關(guān)節(jié)軟骨大體形態(tài),光鏡下觀察形態(tài)學(xué)改變,取腹主動脈血,檢測血清中TNF-α、IL-1β、COMP含量,以鑒定疲勞性KOA模型。2.強骨寶的作用機制研究6月齡雌性SD大鼠32只,隨機分為空白組、生理鹽水組、筋骨痛消丸組、強骨寶組,每組8只,除空白組外,其余三組按上述跑步組方法建立模型大鼠�？瞻捉M常規(guī)飼養(yǎng),另3組分別給予0.9%生理鹽水、筋骨痛消丸、強骨寶灌胃治療,每日兩次,治療周期為1個月。然后取腹主動脈血、關(guān)節(jié)、關(guān)節(jié)軟骨。ELISA法檢測血清中IL-1β、TNF-α、COMP含量,膝關(guān)節(jié)固定脫鈣后行HE染色,光鏡下觀察形態(tài)學(xué)改變,Western blot法及qPCR法檢測軟骨中MMP-3、ADAMTs-7的表達情況。結(jié)果1.模型鑒定結(jié)果:造模6周后,軟骨Mankin評分結(jié)果顯示:與空白對照組相比,去卵巢組和跑步組均升高(P0.01);與去卵巢組相比,跑步組較高(P0.01)。IL-1β、TNF-α及COMP含量比較:與空白對照組比較,其余2組均明顯升高(P0.01);與去卵巢組比較,跑步組更高(P0.01)。因此,無論是從血清學(xué)檢測還是對形態(tài)學(xué)鏡下觀察均說明本次模型成功。2.強骨寶作用機制探討結(jié)果:(1)軟骨Mankin評分結(jié)果,與空白組相比,其余3組較高(P0.01);與生理鹽水組相比,筋骨痛消丸組及強骨寶組均降低(P0.01)。(2)血清中IL-1β、TNF-α及COMP含量比較顯示,與生理鹽水組相比,筋骨痛消丸組及強骨寶組均降低(P0.01)。(3)Western blot結(jié)果顯示:各組軟骨中MMP-3、ADAMTs-7蛋白均有表達,與生理鹽水組相比,筋骨痛消丸組及強骨寶組明顯降低(P0.05);強骨寶組與筋骨痛消丸組比較無差異(P0.05)。(4)qPCR結(jié)果顯示:生理鹽水組、筋骨痛消丸組及強骨寶組的MMP-3 mRNA、ADAMTs-7 mRNA表達均高于空白組(P0.01);與生理鹽水組相比,筋骨痛消丸組及強骨寶組均降低,有顯著差異(P0.01);強骨寶組與筋骨痛消丸組無差異(P0.05)。結(jié)論強骨寶湯通過抑制MMP-3、ADAMTs-7的表達,減少COMP的降解,穩(wěn)定軟骨細胞外基質(zhì)內(nèi)環(huán)境,從而有利于膝骨關(guān)節(jié)炎的修復(fù)。
【圖文】：

圖 1 各組大鼠關(guān)節(jié)軟骨大體形態(tài)觀察3.1.3 光鏡下觀察關(guān)節(jié)軟骨組織形態(tài)學(xué)比較 空白對照組軟骨表層規(guī)則，細胞數(shù)量及形態(tài)正常，基質(zhì)著色均勻，潮線清晰，軟骨面無破壞；與空白組相比，去卵巢組軟骨表層及中深層細胞輕微減少，潮線不及空白組清晰，基質(zhì)著色變淺。而去勢加跑步組鼠軟骨表面毛糙，，不光滑，基質(zhì)著色不均，表層、移行層、輻射層、鈣化層分層不明顯，彌漫性細胞過多且排序規(guī)則，潮線紊亂。（見圖 2）

強骨寶對疲勞性大鼠膝骨關(guān)節(jié)炎關(guān)節(jié)軟骨的作用機制軟骨表層規(guī)則，細胞數(shù)量及形態(tài)正常，無簇集現(xiàn)象，基質(zhì)著色均勻軟骨表面無明顯裂隙，軟骨表層及中深層細胞輕微減少，基質(zhì)著色變毛糙，不光滑，中深層彌漫性細胞過多且排序不規(guī)則，潮線紊亂，鼠關(guān)節(jié)軟骨 Mankin 評分 Mankin 評分結(jié)果顯示：與空白組有顯著差異（P<0.01）；與去卵巢組組比較，跑步組差異明。（見圖 3）
【學(xué)位授予單位】：福建中醫(yī)藥大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2019
【分類號】：R285.5

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本文編號：2645863