【摘要】：目的:研究壽胎丸對(duì)復(fù)發(fā)性流產(chǎn)大鼠的影響,用代謝組學(xué)來(lái)探究壽胎丸組及西藥對(duì)照組大鼠血漿樣本,找尋血漿代謝模型中的潛在生物標(biāo)記物,從而探索壽胎丸的安胎作用機(jī)理,并進(jìn)一步完善復(fù)發(fā)性流產(chǎn)的機(jī)制,從代謝組角度出發(fā)為壽胎丸治療復(fù)發(fā)性流產(chǎn)提供藥理實(shí)驗(yàn)依據(jù)。方法:1.動(dòng)物實(shí)驗(yàn)造模部分,雌雄大鼠交配后的孕鼠,采用羥基脲加米非司酮灌胃的方法成功制造復(fù)發(fā)性流產(chǎn)大鼠的模型,并設(shè)定了壽胎丸治療組、黃體酮西藥治療組及正常妊娠組,于第10天麻醉后腹主動(dòng)脈取血,離心后獲得血漿樣本;2.GC-MS技術(shù)支持部分,樣本收集后進(jìn)行預(yù)處理,將預(yù)處理的樣本進(jìn)行GC-MS上機(jī)檢測(cè)得到原始數(shù)據(jù),再對(duì)原始數(shù)據(jù)進(jìn)行總面積歸一化處理,使用主成分分析(Principal Component Analysis,PCA)進(jìn)行無(wú)監(jiān)督的數(shù)據(jù)分析,用偏最小二乘判別分析(Partial Least Squares-Discriminant Analysis,PLS-DA)進(jìn)行有監(jiān)督的數(shù)據(jù)分析,從整體上把握模型的準(zhǔn)確性和組間的差異;3.最后用學(xué)生氏t-test和PLSDA第一主成分的變量重要性(VIP1)對(duì)差異變量進(jìn)行篩選比較對(duì)照組和模型組得到差異性代謝產(chǎn)物;4.根據(jù)GC-MS總離子流圖中各峰的保留時(shí)間挑選峰值,獲取各峰與內(nèi)標(biāo)峰的峰面積數(shù)據(jù),用相對(duì)峰面積(與內(nèi)標(biāo)峰的比值)表示代謝物的含量。各組模式識(shí)別采用主成分分析(PCA-DA)應(yīng)用SIMCA2P1110軟件。結(jié)果:1.成功制造復(fù)發(fā)性流產(chǎn)大鼠模型,流產(chǎn)大鼠不同情況的出現(xiàn)了陰道流血,毛發(fā)枯槁,精神萎靡,體重下降等情況;2.在實(shí)驗(yàn)中,共檢測(cè)到了188個(gè)峰,根據(jù)已有數(shù)據(jù)庫(kù)和標(biāo)準(zhǔn)品,其中共有83個(gè)物質(zhì)獲得了注釋。這些物質(zhì)主要集中于初級(jí)代謝產(chǎn)物,主要物質(zhì)為有機(jī)酸(31%)及氨基酸(30%),另有糖醇(11%)、磷酸(7%)、脂肪酸(6%)、糖(6%)、胺類(3%)等;3.篩選出血漿中焦磷酸、丙胺酸、甘氨酸,分別是木糖醇、蛋氨酸、天冬酰胺、半胱氨酸、脯氨酸、己二酸、棕櫚酸、十九烷酸、肉豆蔻酸、9,12-(Z,Z)-十八碳二烯酸、硬脂酸、9(Z)-十八碳烯酸、2,4-dihydroxybutanoic酸為復(fù)發(fā)性流產(chǎn)潛在的生物標(biāo)記物。4.壽胎丸治療復(fù)發(fā)性流產(chǎn)的大鼠血漿中發(fā)現(xiàn)了,蘇糖酸、核糖酸、蘇糖醇、β-丙氨酸、焦磷酸、葡糖酸、α-生育酚、半乳糖醛酸、葡萄糖醛酸、2-氨基丁酸10種潛在生物標(biāo)記物,取得較好的預(yù)測(cè)效果。結(jié)論:本研究推測(cè)根據(jù)四組大鼠血漿代謝圖譜的變化,從血漿中篩選出的代謝物對(duì)協(xié)助診斷復(fù)發(fā)性流產(chǎn),探究壽胎丸對(duì)于治療復(fù)發(fā)性流產(chǎn)的作用機(jī)理有重大的指導(dǎo)意義。
【圖文】：

1壽胎丸中藥鑒定預(yù)處理路線圖

2本實(shí)驗(yàn)整體路線
【學(xué)位授予單位】：湖南中醫(yī)藥大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2017
【分類號(hào)】：R285.5;R-332

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本文編號(hào)：2634725