【摘要】：目的:研究補(bǔ)陽還五湯(Buyanghuanwu Decoction,BYHWD)對(duì)急性脊髓損傷(spinal cord injury,SCI)大鼠運(yùn)動(dòng)功能以及再生基因蛋白-2(regenerating gene protein-2,Reg-2)、哺乳動(dòng)物雷帕霉素靶蛋白(the mammalian target of rapamycin,mTOR)、少突膠質(zhì)細(xì)胞轉(zhuǎn)錄因子-2(oligodendrocyte transcription factor-2,Olig-2)表達(dá)的影響,并與甲基強(qiáng)的松龍(Methylprednisolone,MP)進(jìn)行對(duì)照,探討補(bǔ)陽還五湯干預(yù)脊髓損傷的作用機(jī)制。方法:將24只大鼠隨機(jī)分為正常組(CONTROL)、損傷組(SCI)、補(bǔ)陽還五湯組(BYHWD)和甲基強(qiáng)的松龍組(MP)4組,每組各6只。采用Allen’s法建立大鼠SCI模型,造模成功后1、3、5、7d采用BBB運(yùn)動(dòng)功能評(píng)分法(Basso Beattie Bresnahan Iocomotor rating scale)和斜板實(shí)驗(yàn)(Inclined plane test)評(píng)估大鼠運(yùn)動(dòng)功能恢復(fù)效果。正常組(CONTROL)不作處理,等量生理鹽水灌胃7d;損傷組(SCI)脊髓損傷后常規(guī)飼養(yǎng)7d;補(bǔ)陽還五湯組(BYHWD)脊髓損傷后BYHWD(15g/kg·d)灌胃治療7d;甲基強(qiáng)的松龍組(MP)脊髓損傷后MP(30mg/kg·d)腹腔注射7d。術(shù)后7d深度麻醉處死動(dòng)物,取損傷節(jié)段脊髓組織約1.0cm,進(jìn)行HE染色,并采用免疫組化、免疫熒光和Western-blot法檢測大鼠脊髓組織Reg-2、mTOR、Olig-2蛋白表達(dá)變化。結(jié)果:1.SCI組BBB運(yùn)動(dòng)功能評(píng)分和斜板功能評(píng)分顯著下降;給藥1、3d后,BYHWD組和MP組BBB運(yùn)動(dòng)功能評(píng)分和斜板功能評(píng)分與SCI組相比無差別(P0.05);給藥5d后,BYHWD組和MP組BBB運(yùn)動(dòng)功能評(píng)分和斜板功能評(píng)分與SCI組相比恢復(fù)效果更好,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05),BYHWD組和MP組無差異(P0.05);給藥7d后,BYHWD組和MP組BBB運(yùn)動(dòng)功能評(píng)分和斜板功能評(píng)分與SCI組相比恢復(fù)效果明顯更好,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.01),BYHWD組和MP組無差異(P0.05)。2.HE染色結(jié)果表明,SCI組損傷節(jié)段脊髓組織結(jié)構(gòu)紊亂,瘢痕形成,部分神經(jīng)元結(jié)構(gòu)模糊,炎性細(xì)胞浸潤。給藥7d后,BYHWD組和MP組脊髓組織纖維排列有一定的方向性,神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞增殖,炎性細(xì)胞浸潤減少。3.與CONTROL組比較,SCI組脊髓組織中Reg-2和mTOR蛋白表達(dá)升高(P0.05)。給藥7d后,與SCI組比較,BYHWD組和MP組脊髓組織中Reg-2和Olig-2蛋白表達(dá)均升高(P0.05),mTOR蛋白表達(dá)降低(P0.05);與MP組比較BYHWD組脊髓組織中mTOR蛋白表達(dá)更低(P0.05)。結(jié)論:1.補(bǔ)陽還五湯可以改善脊髓損傷大鼠的運(yùn)動(dòng)能力,其效果與糖皮質(zhì)激素甲基強(qiáng)的松龍相當(dāng);2.補(bǔ)陽還五湯可以減少脊髓損傷大鼠神經(jīng)元細(xì)胞凋亡,促進(jìn)神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞增殖,抑制炎性細(xì)胞浸潤;3.補(bǔ)陽還五湯可以升高脊髓損傷大鼠脊髓組織中Reg-2和Olig-2蛋白的表達(dá),抑制mTOR蛋白的表達(dá);4.補(bǔ)陽還五湯對(duì)脊髓損傷的治療作用,可能與升高脊髓組織中Reg-2和Olig-2蛋白以及抑制mTOR蛋白表達(dá)有關(guān),促進(jìn)神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞分裂增殖活性,減輕炎癥反應(yīng),進(jìn)而發(fā)揮保護(hù)神經(jīng)元的作用。
【圖文】：

鼠 SCI 模型造模后，SCI 組、BYHWD 組和 MP 組大鼠均未出現(xiàn)死。在脊髓損傷前及損傷后 2h 和 1，3，5，7d 分別對(duì)各組大鼠進(jìn)行力評(píng)分（圖 1），以評(píng)估大鼠后肢運(yùn)動(dòng)功能恢復(fù)情況。 常組大鼠運(yùn)動(dòng)功能正常，BBB 評(píng)分為 21 分。脊髓損傷前，各組大部正常。脊髓損傷后 2h，各組大鼠的 BBB 評(píng)分在 0-2 分之間，說損傷程度較一致，實(shí)驗(yàn)誤差小。脊髓損傷后 1d 和 3d，SCI 組、P 組的 BBB 評(píng)分差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。經(jīng)過給藥 5d 后BB 評(píng)分 3.833±0.983 相比，BYHWD 組的 BBB 評(píng)分 6±1.265 和 評(píng)分 6±1.414 明顯更高（P<0.05），BYHWD 組和 MP 組的 BBB計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。給藥 7d 后，與 SCI 組的 BBB 評(píng)分 5.833YHWD 組的 BBB 評(píng)分 8.833±2.639 顯著提高（P<0.01），MP 組5±2.168 也更高（P<0.05），BYHWD 組和 MP 組的 BBB 評(píng)分差意義（P＞0.05）。

YHWD 對(duì)脊髓損傷大鼠斜板功能評(píng)分的影響。 x±s，n=6.與 SCI 模型*P<0.05，**P<0.01。WD 對(duì)脊髓損傷大鼠脊髓組織形態(tài)學(xué)的影響 （圖 3）顯示，正常組大鼠 L12-L1 段脊髓組織結(jié)構(gòu)正常，纖具有一定的連續(xù)性，無出血現(xiàn)象，無瘢痕組織形成。SCI 組損
【學(xué)位授予單位】：山西中醫(yī)藥大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2017
【分類號(hào)】：R285.5

【參考文獻(xiàn)】

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1 葉承莉;唐勇;漆偉;吳春寶;劉穎;趙軍;劉建忠;蔣仁偉;;補(bǔ)陽還五湯加麝香治療脊髓損傷臨床研究[J];實(shí)用中醫(yī)藥雜志;2015年12期

2 劉向棟;王磊;董U，

本文編號(hào)：2633605