【摘要】：目的:文冠木為無患子科文冠果Xanthoceras sorbifolia Bunge的干燥莖干或枝條的木部。多生于海拔52~2260 m的山坡丘陵等處,各地也常栽培種植。我國主產(chǎn)于北部的內(nèi)蒙古、東北部的遼寧等地。文冠木為蒙醫(yī)常用藥材,蒙藥名為西拉·森登。味甘、微苦,性涼,能祛風濕,消腫止痛,斂干黃水,主要用于治療風濕性關節(jié)炎,風濕內(nèi)熱,皮膚風熱等癥。文冠木中主要包括三萜類(triterpenoids)、黃酮類(flavone)、酚酸類(phenolic acids)、甾體(sterides)等化學成分。文冠木具有抗炎、抗腫瘤、抗氧化等諸多藥理活性,并在美白、改善學習記憶功能、治療心血管疾病等方面廣泛應用。因此,本文擬對文冠木進行系統(tǒng)的植物化學成分研究,在此基礎上富集含量較高的成分,建立了測定其中6種化學成分的含量和其總黃酮的含量的方法并考察其提取工藝�？疾炱浯继嵛�、萃取部位、10種單體化合物對酪氨酸酶抑制作用的影響。旨在豐富文冠木化學成分的類型的同時,為文冠木藥材的質(zhì)量控制和開發(fā)利用提供了有效的科學依據(jù)。方法:本研究采用常壓硅膠柱色譜、HP-20型大孔吸附樹脂、Sephadex LH-20柱色譜、ODS等色譜技術(shù)從文冠木的70%乙醇提取物中分離得到24個單體化合物,目前利用現(xiàn)代波譜技術(shù)(UV、IR、MS、NMR及HMBC、HSQC等)和理化方法鑒定了其中17個化合物的結(jié)構(gòu)。植化研究表明,文冠木中含有大量的以楊梅素為主的黃酮類成分,本研究建立了以楊梅素(myketin)為對照品,采用紫外分光光度法測定文冠木總黃酮含量的方法,并單因素優(yōu)選了總黃酮的提取工藝。本研究同時建立了高效液相色譜法同時測定文冠木中表沒食子兒茶素、兒茶素、表兒茶素、二氫楊梅素、二氫槲皮素及楊梅素6種主要活性成分的含量測定方法,對色譜條件和提取工藝進行了全面優(yōu)化,并測定了9批文冠木藥材中以上6種成分的含量。采用酶標分析儀測定了本研究分離得到的文冠木單體化合物山奈酚、楊梅素、槲皮素、柚皮素、圣草酚、二氫槲皮素、二氫楊梅素、二氫山奈酚、5,7,3',4',5'-五羥基二氫黃酮、七葉內(nèi)酯化學成分酪氨酸酶活性的抑制率。結(jié)果:本研究對文冠木醇提取物的乙酸乙酯部位和正丁醇部位分別進行分離、純化得到24個化合物并鑒定了其中17個化合物,包括:9個黃酮類化合物為山奈酚(1)、槲皮素(2)、楊梅素(3)、柚皮素(4)、圣草酚(5)、二氫山奈酚(6)、二氫槲皮素(7)、二氫楊梅素(8)、5,7,3',4',5'-五羥基二氫黃酮(9);4個酚酸類化合物為原兒茶酸(11)、表沒食子兒茶素(13)、兒茶素(14)、(-)-epicatechin-5-O-β-D-glucopyrnaoside(15),1個直鏈羧酸類化合物為[(9S,10R,11E,13R)-9,10,13-trihydroxyoctadec-11-enoic-acid)](10);1個香豆素類化合物是七葉內(nèi)酯(12);2個甾體類化合物:β-谷甾醇(16)、胡蘿卜苷(17)。本實驗測定文冠木總黃酮的含量,結(jié)果表明總黃酮類含量為14.62~39.93 mg·g~(-1),同時測定了文冠木中6種化學成分的含量,結(jié)果表明,表沒食子兒茶素的含量為2.01~7.10 mg·g~(-1)、兒茶素的含量為0.11~1.37 mg·g~(-1)、表兒茶素的含量為1.33~4.26mg·g~(-1)、二氫楊梅素的含量為1.06~5.42 mg·g~(-1)、二氫槲皮素的含量為0.03~0.95mg·g~(-1)、楊梅素的含量為0.05~1.40 mg·g~(-1)。本文首次采用酪氨酸酶抑制法考察了文冠木中10種單體化合物的酶活性抑制率,結(jié)果表明除二氫槲皮素、圣草酚,有促進酪氨酸酶活性的作用,其余所測成分均有抑制酪氨酸酶活性的作用。結(jié)論:化合物1、4、9、11~12,15均為首次從文冠木中分離得到�；衔�5~6,10首次從本種本屬分離得到。本實驗測定文冠木總黃酮含量,同時測定了文冠木中6種化學成分的HPLC含量。這兩種方法簡單,準確,重復性好,可用于文冠木黃酮類化合物的定量研究。本實驗發(fā)現(xiàn)絕大多數(shù)黃酮類化合物均具有酪氨酸酶抑制作用,為今后進一步研究黃酮類化合物的對酪氨酸酶活性的影響奠定了基礎。
【圖文】：

文冠木提取分離流程圖

內(nèi)蒙古醫(yī)科大學碩士研究生學位論文（2019） 29卻至室溫后加甲醇補足減失的重量，濾過，取續(xù)濾液過 0.45 μm 微孔濾膜，即得。2.2 色譜條件色譜柱：Inertsil ODS-SP HPLC Column (Japan)(250 mm ×4.6 mm，，5 μm)；流動相：乙腈(A)～0.4 %乙酸水(B)(0～20 min，10%～20%A； 20～40 min，20%～30%A)；流速：1 mL·min-1；檢測波長：280 nm；柱溫：20℃。此條件下文冠木6 種成分分離情況如下圖 2-1：
【學位授予單位】：內(nèi)蒙古醫(yī)科大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2019
【分類號】：R284

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本文編號：2606806