發(fā)布時(shí)間：2020-03-27 13:47

【摘要】：目的:探討天然中藥小分子化合物姜黃素(Curcumin)對(duì)神經(jīng)膠質(zhì)瘤的增殖、遷移、侵襲和凋亡的影響,并進(jìn)一步探討其調(diào)節(jié)機(jī)制。方法:體外培養(yǎng)試驗(yàn)中,以人膠質(zhì)母細(xì)胞瘤U251細(xì)胞株為研究對(duì)象,觀(guān)察不同濃度姜黃素處理對(duì)U251細(xì)胞增殖、遷移、侵襲和凋亡的影響。采用MTT法檢測(cè)不同濃度姜黃素在24 h、48 h和72 h對(duì)U251細(xì)胞增殖的作用;通過(guò)劃痕實(shí)驗(yàn)檢測(cè)不同濃度下姜黃素對(duì)神經(jīng)膠質(zhì)瘤U251細(xì)胞遷移能力的影響;Transwell方法檢測(cè)姜黃素對(duì)U251細(xì)胞侵襲能力的調(diào)節(jié);Annexin V-FITC染色法檢測(cè)不同濃度姜黃素對(duì)U251細(xì)胞凋亡的作用;以Western blotting檢測(cè)姜黃素刺激后對(duì)增殖相關(guān)蛋白Akt/PTEN表達(dá)的影響;檢測(cè)姜黃素刺激后對(duì)凋亡相關(guān)蛋白NF-κB、p53和Caspase-3表達(dá)影響;檢測(cè)姜黃素刺激后對(duì)侵襲相關(guān)蛋白CD133和Drp1表達(dá)影響。在體內(nèi)實(shí)驗(yàn)中,構(gòu)建裸鼠皮下成瘤模型,檢測(cè)姜黃素對(duì)皮下移植瘤生長(zhǎng)的影響;瘤體組織采用HE染色并進(jìn)行病理學(xué)特征分析。結(jié)果:與對(duì)照組相比,姜黃素濃度達(dá)到10μM以上時(shí),對(duì)U251細(xì)胞增殖具有抑制作用;并能顯著性抑制U251的遷移與侵襲能力和顯著性促進(jìn)U251細(xì)胞凋亡;與對(duì)照組相比,姜黃素抑制p-Akt、NF-κB、CD133和p-Drp1蛋白表達(dá)、促進(jìn)PTEN、p53和Caspase-3蛋白表達(dá);與對(duì)照組相比,姜黃素對(duì)裸鼠移植瘤生長(zhǎng)有顯著性抑制作用;與對(duì)照組相比,姜黃素組移植瘤壞死明顯。結(jié)論:姜黃素抑制神經(jīng)膠質(zhì)瘤的增殖作用與下調(diào)p-Akt蛋白、上調(diào)PTEN蛋白表達(dá)有關(guān)。神經(jīng)膠質(zhì)瘤的遷移、侵襲能力降低與姜黃素下調(diào)黏附分子CD133和p-Drp1蛋白表達(dá)有關(guān);而促進(jìn)膠質(zhì)瘤凋亡與姜黃素上調(diào)p53、caspase-3蛋白和下調(diào)NF-κB表達(dá)有關(guān)。
【圖文】：

1 姜黃素抑制 U251 細(xì)胞增殖腫瘤細(xì)胞增殖是影響腫瘤生長(zhǎng)的條件之一。我們檢測(cè)姜黃素對(duì)U251細(xì)胞增殖的抑制影響。如圖1A所示，在姜黃素刺激24 h的條件下，對(duì)照組細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好，細(xì)胞未發(fā)現(xiàn)皺縮；當(dāng)姜黃素濃度達(dá)到10 μM時(shí)，視野下細(xì)胞數(shù)目明顯少于對(duì)照組，較少細(xì)胞出現(xiàn)皺縮；當(dāng)姜黃素濃度達(dá)到20 μM時(shí)，細(xì)胞間隙增加，部分細(xì)胞出現(xiàn)皺縮；當(dāng)姜黃素濃度達(dá)到40 μM時(shí)，大量細(xì)胞皺縮，并與周?chē)募?xì)胞脫離；前期藥理實(shí)驗(yàn)顯示

姜黃素對(duì) U251 細(xì)胞增殖能力影響的顯微圖（100X）；B 姜黃素處理對(duì)膠質(zhì)瘤細(xì)胞增殖能力影響的數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)圖，與對(duì)照組比較，*p＜0.05，**p＜0.01，n=3。2 姜黃素抑制 U251 細(xì)胞遷移腫瘤細(xì)胞遷移是腫瘤侵襲性的重要表現(xiàn)之一。在不同濃度的姜黃素刺激后，，U251 細(xì)胞遷移能力進(jìn)行比較，遷移結(jié)果如圖 2A 所示。與對(duì)照組相比，姜黃素組 U251 細(xì)胞遷移能力呈下降趨勢(shì)。在 10 μM 姜黃素刺激下，細(xì)胞遷移能力顯著性降低至 76.5%；在 20 μM 姜黃素刺激下，細(xì)胞遷移能力顯著性降至 37.6%，結(jié)果如圖 2B。說(shuō)明姜黃素能有效抑制神經(jīng)膠質(zhì)瘤的細(xì)胞遷移能力。
【學(xué)位授予單位】：湖北科技學(xué)院
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2019
【分類(lèi)號(hào)】：R285

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本文編號(hào)：2603044