海戰(zhàn)傷大鼠血糖變化特點及機制探討

發(fā)布時間：2017-09-14 04:29

本文關鍵詞：海戰(zhàn)傷大鼠血糖變化特點及機制探討

【摘要】： 第一部分海水浸泡對腹部開放傷大鼠血糖的影響實驗目的:通過觀測海戰(zhàn)傷大鼠隨機血糖及IPGTT等糖代謝相關指標隨時間的變化特點,研究腹部開放合并海水浸泡大鼠是否存在血糖代謝的異常。實驗內容:成年雄性SD大鼠,18只,隨機分為3組,每組6只。分別為對照組(C組),腹部開放傷45min組(L45組),腹部開放合并海水浸泡45min組(L+S45組)。觀測術前及術后各時間點下列指標水平,包括(1)體溫;(2)IPGTT;(3)隨機血糖。實驗方法:大鼠體溫測定采用電子體溫計測定肛溫方法。大鼠血糖通過尾尖取血后快速血糖儀測定。IPGTT按照AMDCC的步驟進行少許改變,主要步驟是大鼠禁食6h后測定空腹血糖,隨即用10%的葡萄糖按照0.01ml/g劑量腹腔注射,于5, 15, 30, 60, 120min時分別測定血糖水平。結果:術前各組大鼠體重、肛溫、隨機血糖、IPGTT無明顯差異,術后各項結果提示(1)同C組相比,兩個手術組大鼠肛溫均出現不同程度降低,其中L+S45組體溫最低,低體溫持續(xù)時間最長;(2)同C組相比,兩組術后隨機血糖均明顯升高。術畢當時L45組大鼠血糖最高,L+S45組大鼠次之。術后6小時,兩組大鼠血糖開始出現下降但仍明顯高于C組。術后18h,L+S45組大鼠血糖高于L45組大鼠且該差異一直持續(xù)到傷后90h,186h時三組血糖無差異。(3)術后各時間點各組IPGTT存在差異。IPGTT異常一方面表現為L+S45組和L45組大鼠術后IPGTT各點血糖同術前相比均升高,曲線下糖面積(AUC)明顯增加,而對照組無明顯變化;另一方面,L+S45組大鼠與L45組大鼠相比,IPGTT異常及AUC增加更明顯,持續(xù)時間更長。結論:(1)海戰(zhàn)傷大鼠會出現高血糖,但是在術后短期(0-6h)L45組大鼠隨機血糖高于L+S45組大鼠,后期(≥18h)L+S45組大鼠血糖高于L45組大鼠。 (2)L+S45組大鼠術后糖耐量異常程度更重且異常持續(xù)時間更長。 (3)海水浸泡導致腹部開放傷大鼠低體溫狀態(tài)明顯加重。第二部分海戰(zhàn)傷大鼠傷后早期IPGTT變化與器官損傷指標的相關性研究實驗目的:通過對比不同致傷條件下大鼠傷后12h的復溫過程,IPGTT的變化以及14h時血生化指標,分析海戰(zhàn)傷模型中的創(chuàng)傷、低溫以及高滲3種致傷因素是否同糖代謝異常相關,海戰(zhàn)傷后血糖紊亂是否具有指示器官損傷程度的臨床意義。實驗內容:按照接受處理的方法不同,SD大鼠被隨機分入5組:麻醉對照組(C組)、腹膜切開縫合組(L組)、腹部開放傷45min組(L45組)、腹部開放合并林格氏液浸泡45min組(L+R45組)及腹部開放合并海水浸泡45min組(L+S45組),每組6只。術前各項指標基線水平觀測包括1)術前體溫;2)術前IPGTT;3)術前隨機血糖水平。術后各項指標觀測包括1)術后12h內體溫變化觀測;2)術后12h時IPGTT情況;3)術后14h各項生化指標的檢測實驗方法:經下腔靜脈抽取靜脈血,3000rpm離心10min,后送我院生化室。以貝克曼全自動生化分析儀進行以下指標的的測定:ALT、AST、Cr、BUN、CK、電解質(K、Na、Cl、Ca)。結果:術前各組大鼠體重、肛溫、隨機血糖、IPGTT無明顯差異,提示隨機分組均衡性良好,無組間及組內差異。術后結果提示1)手術結束時,L+R45組和L+S45組大鼠肛溫最低,L45組大鼠肛溫次之,L組和C組較術前略有降低。術后6h時L+R45組和L+S45組及L45組大鼠肛溫較C組仍有不同程度的降低,12h時L+R45組體溫接近正常,但是L+S45大鼠肛溫低于術前水平。2) C組及L組IPGTT與術前相比無明顯差異,L45組、L+R45組、L+S45組均有明顯改變,其AUC依次升高,與對照組相比具有顯著統(tǒng)計學差異。3)與C組相比,L組出現AST、CK升高;L 45組大鼠出現ALT、AST、Cr、BUN、CK升高;L+R45組與L45組大鼠相比各項生化指標變化更加顯著,但電解質正常;L+S45組生化各項指標均與對照組和其余手術各組存在顯著差異,電解質明顯異常。4)將所有大鼠術后12h的IPGTT曲線下糖面積進行了統(tǒng)計,按照四分位數分為四個組別,通過生化指標,比較了這四個組別器官損傷程度的區(qū)別,結果顯示,隨著AUC值的升高,大鼠生化指標異常程度均明顯加重。5)通過二元線性回歸分析提示低體溫及電解質紊亂均對術后IPGTT異常有影響。結論:1、海戰(zhàn)傷大鼠的低體溫狀態(tài)及高滲性水電解質紊亂均是IPGTT異常的獨立影響因素; 2、IPGTT異常與海戰(zhàn)傷各器官損害程度密切相關,可以作為傷情判斷的一項指標; 3、海戰(zhàn)傷大鼠發(fā)生低體溫及高滲性水電解質紊亂是加重傷后器官功能損害的可能原因。第三部分海戰(zhàn)傷大鼠傷后12小時肝臟胰島素抵抗機制的研究實驗目的:通過檢測腹部開放傷45min和腹部開放合并海水浸泡45min大鼠傷后12h時肝臟組織的IR,IRS-1的表達水平及磷酸化水平,探討海戰(zhàn)傷大鼠糖耐量異常是否由于胰島素信號通路活性改變所致,以及胰島素信號通路活性改變的可能原因。實驗內容:成年雄性SD大鼠,18只,體重220-250g。隨機分為3組,每組6只。分別為對照組(C組),腹部開放傷45min組(L45組),腹部開放合并海水浸泡45min組(L+S45組)。12h時用western blot法檢測肝臟IR, IRS-1,IRS-1酪氨酸磷酸化以及絲氨酸磷酸化表達水平。實驗方法:將3組大鼠中的每組分為門靜脈注射胰島素組和非注射組,其中胰島素組用0.4ml的0.9%氯化鈉稀釋5U胰島素后由大鼠門靜脈注入,對照組僅注射0.4ml的0.9%氯化鈉,等待1min取下肝臟放入液氮中。實驗時從液氮中取出組織進行研磨,提取總蛋白后進行western blot檢測。結果:1、各組大鼠術后肝臟IR表達水平無明顯差異。2、各組大鼠術后肝臟IRS-1表達水平無明顯差異。3、各組大鼠術后肝IRS-1酪氨酸酸酸化水平表達有差異:對照組,L45組和L+S45組酪氨酸磷酸化水平依次降低。4、各組大鼠術后肝臟IRS-1絲氨酸酸化水平表達有差異:對照組,L45組和L+S45組絲氨酸磷酸化水平依次升高。結論:(1)L+S45大鼠和L45組大鼠在12h時IR,IRS-1總蛋白表達水平無明顯異; (2)兩組大鼠均會出現IRS-1酪氨酸磷酸化水平降低,其中L+S45明顯降低,說明胰島素信號通路出現異常,表現為受體后水平異常糖,這提示糖耐量異�？赡苁怯捎诎l(fā)生了胰島素抵抗, (3)IRS-1絲氨酸磷酸化增強可能是機制之一。
【關鍵詞】：創(chuàng)傷 寒冷高滲 海水浸泡 血糖 胰島素抵抗
【學位授予單位】：中國人民解放軍軍事醫(yī)學科學院
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2010
【分類號】：R82
【目錄】：