本文關(guān)鍵詞：沙奎那韋固體臘質(zhì)納米粒的制備及口服吸收研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：固體脂質(zhì)納米粒(Solid lipid nanoparticles, SLN)是近年來在藥劑學領(lǐng)域研究比較熱門的一類新型的納米載體,因其具有生物相容性好,提高藥物穩(wěn)定性,調(diào)控藥物釋放行為,可實現(xiàn)藥物靶向傳遞,及適合工業(yè)生產(chǎn)等特性從而受到廣泛關(guān)注。近幾年的研究發(fā)現(xiàn),固體脂質(zhì)納米粒作為口服藥物載體,可以有效提高藥物的口服吸收和生物利用度。本研究針對抗HIV藥物沙奎那韋口服生物利用度低的問題,利用低毒性、生物相容性好、生物可降解的單甘脂為脂質(zhì)材料,制備沙奎那韋固體脂質(zhì)納米粒,并開展聚乙二醇的研究,并考察其作為口服藥物載體,在大鼠體內(nèi)的藥代動力學行為,以期為開發(fā)沙奎那韋新型給藥系統(tǒng)提供實驗依據(jù)。.研究選用沙奎那韋為模型藥物,首先通過離子復合法制備沙奎那韋-卵磷脂復合物,采用差示熱掃描法(DSC)確證復合物的結(jié)構(gòu)；以單甘脂為脂質(zhì)材料,采用溶劑擴散法,制備沙奎那韋固體脂質(zhì)納米粒,通過聚乙二醇---硬脂酸(PEG2000-SA)投料量的調(diào)控,研究不同聚乙二醇修飾比例的沙奎那韋固體脂質(zhì)納米粒的粒徑大小及形態(tài)、藥物包封率、載藥量及藥物體外釋放等理化性質(zhì)。結(jié)果表明：當沙奎那韋與卵磷脂的質(zhì)量比為1：1.5時,沙奎那韋可與卵磷脂有效復合,形成沙奎那韋-卵磷脂復合物；通過粒徑儀測定和透射電鏡的觀察,發(fā)現(xiàn)未經(jīng)PEG修飾的SLN粒徑在275 nm左右,隨著PEG修飾量的增加粒徑減小；當PEG修飾比例為10%時,其粒徑為158 nm左右；水溶性藥物沙奎那韋與卵磷脂復合后,可被脂質(zhì)材料有效包封,沙奎那韋固體脂質(zhì)納米粒的藥物包封率為99.19%,載藥量可達19.87%,聚乙二醇修飾后其藥物包封率有所下降,但仍在95%以上；體外釋放結(jié)果顯示沙奎那韋固體脂質(zhì)納米粒對藥物具有緩釋作用,72小時的藥物累積釋放量為19.23%,且其釋放速率隨著聚乙二醇的修飾比例的增加而減緩。建立HPLC測定沙奎那韋血藥濃度的方法學。采用SD大鼠為模型動物,以沙奎那韋混懸劑為對照,考察沙奎那韋固體脂質(zhì)納米粒及不同比例聚乙二醇修飾SLN口服給藥后,在大鼠體內(nèi)的藥代動力學行為。研究結(jié)果顯示：大鼠口服沙奎那韋固體脂質(zhì)納米粒、5%聚乙二醇修飾SLN (pSLN-5%)和10%聚乙二醇修飾SLN (pSLN-10%)的相對于口服沙奎那韋混懸液的生物利用度分別為200.68%,6175.85%,10115.35%,其口服相對生物利用度隨著聚乙二醇修飾比例的增加而增加。相比于沙奎那韋混懸劑,pSLN-5%和pSLN-10%,其體內(nèi)平均滯留時間從4.62小時,增加到36.21小時和51.68小時；其Cmax從0.33mg/L增加到,7.46mg/L和8.42mg/L。結(jié)果表明固體脂質(zhì)納米粒通過PEG修飾可顯著延長藥物的體內(nèi)滯留時間,增加藥物轉(zhuǎn)運效率,降低藥物的消除速率,可大幅度地提高沙奎那韋的口服生物利用度。為闡明固體脂質(zhì)納米粒及其聚乙二醇修飾SLN (pSLN)提高沙奎那韋口服生物利用度的機制,進一步采用犬腎上皮連續(xù)細胞系(MDCK)作為體外跨膜轉(zhuǎn)運吸收的評價模型細胞,以四唑藍比色(MTT)法測定固體脂質(zhì)納米粒及其聚乙二醇修飾SLN的細胞毒性；培養(yǎng)MDCK細胞單層,以沙奎那韋混懸劑為對照,評價SLN及pSLN的跨膜轉(zhuǎn)運能力；以異硫氫基熒光素標記SLN及pSLN研究納米粒的MDCK細胞攝取能力。細胞毒性研究結(jié)法果顯示：沙奎那韋的固體脂質(zhì)納米粒對MDCK細胞的半數(shù)致死率(IC50)為269.02μg/mL,聚乙二醇修飾后其毒性進一步降低,采用5%和10%聚乙二醇修飾的SLN,其ICs0分別為549.25和550.47μg/mL�？缂毎麊螌幽まD(zhuǎn)運結(jié)果表明：相比于沙奎那韋溶液,SLN具有加強的跨細胞單層膜轉(zhuǎn)運能力,其Papp分別為0.09×10-5cm/s、0.18×10-5cm/s,且隨著聚乙二醇修飾比例的增加而提高,10%聚乙二醇修飾SLN (pSLN-10%)的Papp為0.40×10-5cm/s。MDCK細胞攝取研究結(jié)果表明：SLN具有較強的MDCK細胞攝取和轉(zhuǎn)運能力,且其攝取和轉(zhuǎn)運能力隨著聚乙二醇修飾比例的增加而增加。本研究的結(jié)果表明,結(jié)合離子復合和溶劑擴散法制備的固體脂質(zhì)納米粒,可實現(xiàn)對水溶性藥物沙奎那韋的有效包封和高效負載,并可通過胃腸道上皮細胞的主動轉(zhuǎn)運,顯著提高藥物的口服吸收和生物利用度,其基于聚乙二醇修飾沙奎那韋固體脂質(zhì)納米粒的新型制劑,有望實現(xiàn)降低沙奎那韋口服制劑的給藥劑量和毒副作用,提高患者的依從性。
【關(guān)鍵詞】：沙奎那韋 固體脂質(zhì)納米粒 體外釋放 藥代動力學 細胞轉(zhuǎn)運
【學位授予單位】：浙江大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2015
【分類號】：R943
【目錄】：

• 致謝4-5
• 中文摘要5-8
• ABSTRACT8-15
• 引言15-19
• 第一章 沙奎那韋固體脂質(zhì)納米粒的合成及理化性質(zhì)研究19-34
• 1.1 材料與儀器19-20
• 1.1.1 材料19
• 1.1.2 儀器19-20
• 1.2 實驗方法20-23
• 1.2.1 沙奎那韋-磷脂復合物的合成20
• 1.2.2 沙奎那韋-磷脂復合形成的結(jié)構(gòu)驗證20
• 1.2.3 固體脂質(zhì)納米粒的制備20-21
• 1.2.4 沙奎那韋固體脂質(zhì)納米粒的理化性質(zhì)研究21-23
• 1.3 結(jié)果與討論23-33
• 1.3.1 沙奎那韋-磷脂復合物的制備23-24
• 1.3.2 沙奎那韋磷脂復合形成的結(jié)構(gòu)驗證24-25
• 1.3.3 沙奎那韋固體脂質(zhì)納米粒的制備25-26
• 1.3.4 沙奎那韋固體脂質(zhì)納米粒粒徑與形態(tài)26-27
• 1.3.5 沙奎那韋固體脂質(zhì)納米粒的包封率(ER)及載藥量(DL)27-31
• 1.3.6 沙奎那韋固體脂質(zhì)納米粒的體外藥物釋放研究31-33
• 1.4 小結(jié)33-34
• 第二章 沙奎那韋固體脂質(zhì)納米粒的大鼠體內(nèi)藥代動力學研究34-43
• 2.1 材料與儀器34
• 2.1.1 材料34
• 2.1.2 儀器34
• 2.2 實驗方法34-36
• 2.2.1 沙奎那韋固體脂質(zhì)納米粒的制備34-35
• 2.2.2 沙奎那韋固體脂質(zhì)納米粒血漿中標準曲線的制備及方法學驗證35
• 2.2.3 生物樣品的分析35-36
• 2.3 結(jié)果與討論36-42
• 2.3.1 沙奎那韋固體脂質(zhì)納米粒血漿中標準曲線的制備及方法學驗證36-39
• 2.3.2 大鼠體內(nèi)藥代動力學的考察39-42
• 2.4 小結(jié)42-43
• 第三章 沙奎那韋固體脂質(zhì)納米粒的MDCK細胞跨膜轉(zhuǎn)運研究43-54
• 3.1 材料與儀器43-44
• 3.1.1 材料43-44
• 3.1.2 儀器44
• 3.2 實驗方法44-47
• 3.2.1 ODA-FITC的合成及熒光標記的固體脂質(zhì)納米粒的制備44-45
• 3.2.2 MDCK細胞的培養(yǎng)45
• 3.2.3 沙奎那韋固體脂質(zhì)納米粒的細胞毒性評價45
• 3.2.4 沙奎那韋固體脂質(zhì)納米粒細胞單層膜(MDCK)轉(zhuǎn)運45-47
• 3.2.5 沙奎那韋固體脂質(zhì)納米粒的細胞攝取研究47
• 3.3 結(jié)果與討論47-53
• 3.3.1 沙奎那韋固體脂質(zhì)納米粒的細胞毒性評價47-48
• 3.3.2 沙奎那韋固體脂質(zhì)納米�？缂毎麊螌幽�(MDCK)轉(zhuǎn)運研究48-51
• 3.3.3 沙奎那韋固體脂質(zhì)納米粒的細胞攝取研究51-53
• 3.4 小結(jié)53-54
• 結(jié)論54-56
• 參考文獻56-61
• 綜述61-77
• 參考文獻74-77
• 作者簡歷77

【共引文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 黎映勝;;犬瘟熱診斷方法的研究進展[J];甘肅畜牧獸醫(yī);2009年06期

2 溫潔霞;林洪羽;王利月;李文艷;張考;陳慧慧;仲飛;李秀錦;;重組豬IL-7在真核細胞的分泌表達及生物活性分析[J];河北農(nóng)業(yè)大學學報;2013年03期

3 李紅霞;吳莉莉;宋佳;張業(yè)旺;;聚合物膠束在藥物傳輸系統(tǒng)中的應用[J];材料導報;2013年13期

4 李志松;李志杰;王海燕;;壽光市某犬瘟熱病毒的分離鑒定及其致病性[J];山東畜牧獸醫(yī);2014年07期

5 郭小建;張光明;馮飛;劉愛榮;萬小榮;郭春絨;;雙生病毒基因組變異的研究進展[J];河南農(nóng)業(yè)科學;2011年05期

6 李鑫;楊霞;;菏澤市犬瘟熱發(fā)病調(diào)查[J];黑龍江農(nóng)業(yè)科學;2014年04期

7 吳立華;靳亮;王金昌;王洪秀;;美國白蛾核型多角體病毒的研究進展[J];江西科學;2014年02期

8 羅輯;周國英;朱積余;;核型多角體病毒基因組學研究進展[J];林業(yè)科學研究;2014年04期

9 陶田谷晟;秦建輝;李思遠;濮興杰;李曉鵬;肖嘯;;戊肝對不同生長階段豬的感染率以及其對肝功能的影響[J];黑龍江畜牧獸醫(yī);2014年23期

10 羅輯;周國英;朱積余;;油桐尺蛾核型多角體病毒廣西株全基因組序列[J];林業(yè)科學研究;2015年05期

中國重要會議論文全文數(shù)據(jù)庫 前2條

1 張曉燕;李倩;孫建緒;曲昌海;鄭愛萍;;納米效應對難溶性藥物阿瑞匹坦體內(nèi)外性質(zhì)的影響[A];2013年中國藥學大會暨第十三屆中國藥師周論文集[C];2013年

2 歐歌;廖德華;戴偉;張凱;向大雄;;皮膚局部給藥微乳的研究進展[A];“好醫(yī)生杯”中藥制劑創(chuàng)新與發(fā)展論壇論文集（下）[C];2013年

中國博士學位論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 馬新穎;侵染廣西番茄和一品紅的雙生病毒研究[D];浙江大學;2004年

2 陶小榮;中國番茄黃化曲葉病毒（TYLCCNV）致病分子機理及其衛(wèi)星DNA誘導的基因沉默研究[D];浙江大學;2004年

3 黃家風;廣西雜草雙生病毒的分子鑒定[D];浙江大學;2005年

4 孔慶波;轉(zhuǎn)移因子增強犬細胞免疫功能的作用機理研究[D];西北農(nóng)林科技大學;2005年

5 張小霞;ClanGV的分子生物學特性和棉鈴蟲PM的研究[D];中國科學院研究生院（武漢病毒研究所）;2005年

6 郭小建;四種雙生病毒的分子鑒定[D];浙江大學;2006年

7 何秀霞;中國番茄黃化曲葉病毒衛(wèi)星DNA誘導的番茄根系FRO1和IRT的基因沉默的研究[D];吉林大學;2006年

8 徐曉忠;菜豆金色花葉屬病毒群體遺傳學、密碼子使用及進化分析[D];浙江大學;2008年

9 屈勇剛;戊型肝炎病毒流行病學及其感染機理探索研究[D];吉林大學;2008年

10 段彥麗;美國白蛾NPV與Bt混合致病機理及其對寄主種群持續(xù)控制作用[D];中國林業(yè)科學研究院;2008年

中國碩士學位論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 于云奇;四川攀枝花賽葵上雙生病毒的檢測與鑒定[D];西南大學;2012年

2 范三微;侵染勝紅薊和假馬鞭的雙生病毒的分子鑒定[D];浙江大學;2003年

3 常建軍;豬、犬轉(zhuǎn)移因子對犬細胞免疫影響的比較研究[D];西北農(nóng)林科技大學;2005年

4 劉振國;賽葵上雙生病毒的分子鑒定[D];福建農(nóng)林大學;2006年

5 冷雪;豬圓環(huán)病毒2型吉林地方株ORF2基因的克隆、測序及原核表達[D];吉林農(nóng)業(yè)大學;2006年

6 詹惠春;諾瓦克樣病毒的分子流行病學研究[D];第一軍醫(yī)大學;2006年

7 劉舟;勝紅薊黃脈病毒福建煙草分離物F2及其編碼的C5基因的分子鑒定[D];福建農(nóng)林大學;2007年

8 王鈺璇;豬瘟病毒E0結(jié)構(gòu)蛋白核心抗原位點的表達及抗原性研究[D];甘肅農(nóng)業(yè)大學;2007年

9 王榮;豬瘟和藍耳病快速檢測方法的建立和應用[D];福建農(nóng)林大學;2009年

10 張潔;福建省兩種雙生病毒的致病機制研究[D];福建農(nóng)林大學;2009年

  本文關(guān)鍵詞：沙奎那韋固體臘質(zhì)納米粒的制備及口服吸收研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

，

本文編號：281559