本文關(guān)鍵詞：模擬微重力效應(yīng)對(duì)果蠅發(fā)育及相關(guān)基因的影響

  更多相關(guān)文章： 模擬微重力效應(yīng) 果蠅 發(fā)育 細(xì)胞凋亡

【摘要】： 空間環(huán)境是一類(lèi)特殊的極端環(huán)境,它不同于人類(lèi)居住的地球環(huán)境,具有強(qiáng)烈的空間輻射、高真空、微重力等特點(diǎn)。這些特殊環(huán)境對(duì)生物的影響都是人們目前正在探索的領(lǐng)域。其中空間微重力是如何影響動(dòng)物的發(fā)育,一直是該領(lǐng)域的重要科學(xué)問(wèn)題。 本次試驗(yàn)以野生型黑腹果蠅(Drosophila melanogaster)卵為材料,通過(guò)雙軸驅(qū)動(dòng)回轉(zhuǎn)器模擬微重力效應(yīng),針對(duì)果蠅卵的不同發(fā)育時(shí)期(成蛹期和羽化期)進(jìn)行微重力處理,研究模擬微重力效應(yīng)對(duì)黑腹果蠅發(fā)育的影響。果蠅發(fā)育基礎(chǔ)生理學(xué)指標(biāo)包括：孵化率、發(fā)育速度、繁殖能力和壽命。由于在果蠅的在成蛹期和羽化期變態(tài)發(fā)育過(guò)程中,細(xì)胞凋亡和細(xì)胞增殖對(duì)其發(fā)揮著非常重要的作用。為了更深層探究模擬微重力對(duì)果蠅發(fā)育的影響機(jī)制,我們利用RT-PCR的方法對(duì)與細(xì)胞凋亡和增殖相關(guān)的重要基因的表達(dá)情況進(jìn)行研究。細(xì)胞凋亡通路基因包括caspase-1, rpr, grim, hid, skl, p53, diap1, diap2和thread。細(xì)胞增殖相關(guān)基因包括corkscrew, IMP-L2, headcase和tolkin。 結(jié)果表明,與對(duì)照組相比。經(jīng)微重力處理后的果蠅的發(fā)育速度明顯延遲,蛹化和羽化時(shí)間均比對(duì)照組延遲了18.61%和12.24%。雄性果蠅的壽命與對(duì)照組相比出現(xiàn)明顯縮短。對(duì)細(xì)胞凋亡和增殖相關(guān)信號(hào)通路的結(jié)果分析發(fā)現(xiàn),在細(xì)胞凋亡信號(hào)通路中：促進(jìn)凋亡的caspase-1, p53, hid, grim和skl基因表達(dá)發(fā)生顯著上調(diào)；抑制凋亡的diapl和thread的基因表達(dá)發(fā)生顯著下調(diào)。細(xì)胞增殖相關(guān)基因IMP-L2和corkscrew的表達(dá)水平發(fā)生下調(diào)。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明：模擬微重力處理促進(jìn)了果蠅細(xì)胞凋亡,并抑制了細(xì)胞增殖,干擾了果蠅發(fā)育過(guò)程中細(xì)胞凋亡和增殖的平衡,這可能是導(dǎo)致果蠅發(fā)育速度延遲的重要原因之一
【關(guān)鍵詞】：模擬微重力效應(yīng) 果蠅 發(fā)育 細(xì)胞凋亡
【學(xué)位授予單位】：大連海事大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2010
【分類(lèi)號(hào)】：R85
【目錄】：

• 摘要5-6
• ABSTRACT6-9
• 引言9-10
• 第1章 緒論10-27
• 1.1 空間與微重力科學(xué)概述10-11
• 1.2 空間微重力和地面模擬微重力11-13
• 1.2.1 自由落體裝置11
• 1.2.2 失重飛機(jī)拋物線(xiàn)飛行11-12
• 1.2.3 生物火箭12
• 1.2.4 航天飛機(jī)(space shuttle)12-13
• 1.3 地面回轉(zhuǎn)器模擬微重力效應(yīng)13-14
• 1.4 地面研究微重力的主要模型14-15
• 1.5 微重力的生物學(xué)效應(yīng)15-18
• 1.5.1 微重力對(duì)骨骼系統(tǒng)的影響15-16
• 1.5.2 微重力對(duì)肌肉系統(tǒng)的影響16
• 1.5.3 微重力對(duì)心臟的影響16-17
• 1.5.4 微重力對(duì)免疫系統(tǒng)的影響17-18
• 1.6 模式生物果蠅的優(yōu)勢(shì)18-19
• 1.7 微重力對(duì)果蠅相關(guān)研究19-21
• 1.8 程序性細(xì)胞死亡和果蠅胚胎發(fā)育21-26
• 1.9 本課題研究的目的和意義26-27
• 第2章 實(shí)驗(yàn)材料和方法27-39
• 2.1 實(shí)驗(yàn)儀器與試劑27
• 2.1.1 主要儀器設(shè)備27
• 2.1.2 常用試劑及配方27
• 2.2 果蠅實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)27-29
• 2.2.1 果蠅培養(yǎng)基27-28
• 2.2.2 果蠅的傳代、轉(zhuǎn)移28
• 2.2.3 果蠅培養(yǎng)基長(zhǎng)霉處理28
• 2.2.4 同步化收集果蠅卵28-29
• 2.3 模擬微重力處理果蠅卵29-30
• 2.4 果蠅的生存試驗(yàn)30-32
• 2.4.1 果蠅發(fā)育速度及孵化率試驗(yàn)31
• 2.4.2 果蠅繁殖能力試驗(yàn)31-32
• 2.4.3 壽命試驗(yàn)32
• 2.5 RT-PCR檢測(cè)目的基因表達(dá)32-39
• 2.5.1 單只果蠅總RNA的提取32-33
• 2.5.2 果蠅總RNA反轉(zhuǎn)錄試驗(yàn)33-34
• 2.5.3 目的基因的PCR擴(kuò)增34-37
• 2.5.4 目的基因表達(dá)量的統(tǒng)計(jì)分析37-39
• 第3章:試驗(yàn)結(jié)果和討論39-56
• 3.1 果蠅的發(fā)育試驗(yàn)39-43
• 3.1.1 果蠅卵的收集39-40
• 3.1.2 果蠅的孵化率40
• 3.1.3 果蠅的發(fā)育速度40-42
• 3.1.4 果蠅的繁殖力42-43
• 3.1.5 果蠅的壽命43
• 3.2 果蠅發(fā)育相關(guān)基因表達(dá)結(jié)果43-52
• 3.2.1 單只果蠅總RNA的濃度測(cè)定43-44
• 3.2.2 反轉(zhuǎn)錄合成cDNA44-45
• 3.2.3 目的基因的PCR特異性擴(kuò)增45-47
• 3.2.4 目的基因表達(dá)量的統(tǒng)計(jì)分析47-52
• 3.3 分析與討論52-56
• 結(jié)論和展望56-58
• 結(jié)論56
• 展望56-58
• 參考文獻(xiàn)58-62
• 附錄A 果蠅凋亡通路圖62-63
• 附錄B 果蠅生活史63-64
• 致謝64-65

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號(hào)：1002601