從木質(zhì)纖維素載體中釋放提取生物樣本DNA的研究
發(fā)布時(shí)間:2021-06-16 18:59
隨著現(xiàn)代科技的不斷進(jìn)步,DNA技術(shù)越來(lái)越受到重視。作為能夠識(shí)別鎖定嫌疑人的有力工具,DNA檢驗(yàn)技術(shù)在刑事案件檢驗(yàn)中得到廣泛應(yīng)用在重大疑難案件中發(fā)揮了重要作用。陳舊生物樣本檢驗(yàn)是目前DNA檢驗(yàn)技術(shù)中需解決的難題,在實(shí)際工作中我們發(fā)現(xiàn),陳舊生物樣本物證經(jīng)常出現(xiàn)檢驗(yàn)位點(diǎn)檢出不全,甚至無(wú)法得到有效分型的現(xiàn)象。致使一些重大疑難命案積案使破受到影響陳舊生物樣本物證因?yàn)樯飿颖窘䴘?rùn)到木質(zhì)纖維素載體里時(shí)問(wèn)較長(zhǎng),不可避免地受外在條件環(huán)境中的光、空氣、水分等的影響[1],現(xiàn)有的生物樣本處理和DNA提取方法都對(duì)于鑲嵌在緊密載體內(nèi)部的生物樣本和木質(zhì)纖維素載體交聯(lián)的生物樣本處理不足,生物樣本無(wú)法充分釋放,對(duì)于保存時(shí)間長(zhǎng)、蛋白變性程度嚴(yán)重,以及與載體交聯(lián)嚴(yán)重的生物樣本的DNA提取都不理想,有時(shí)甚至無(wú)法獲得有效DNA,因而浪費(fèi)了寶貴的生物樣本和現(xiàn)場(chǎng)檢材,影響了案件偵破和關(guān)鍵證據(jù)的取得。為了從陳年的含有生物樣本的木質(zhì)纖維素類物證檢材中提取出DNA生物樣本證據(jù)并進(jìn)行檢驗(yàn),本研究利用高溫老化的方法對(duì)物證進(jìn)行老化模擬實(shí)驗(yàn),由于在法醫(yī)學(xué)中,木質(zhì)纖維素物證檢材主要分為紙類和棉布類,所以本研究分別針對(duì)兩類進(jìn)...
【文章來(lái)源】:吉林大學(xué)吉林省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校
【文章頁(yè)數(shù)】:63 頁(yè)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【部分圖文】:
木質(zhì)纖維素的結(jié)構(gòu)示意圖
即纖維素酶蛋白含量為 1.87 mg/ml,1 ml 標(biāo)準(zhǔn)體系解棉布釋放還原糖的量最大為 1.63 mg/ml,為最佳纖維素酶復(fù)配表 2.6 針對(duì)紙類木質(zhì)纖維素的纖維素酶用量研究結(jié)果表號(hào) 1 2 3 4 5 6 7 8 蛋白含量g)0.37 0.75 1.12 1.50 1.87 2.24 2.62 2.99 釋放量/ml)0.03 0.27 0.50 0.87 1.63 1.18 0.86 0.68 酶最佳反應(yīng)時(shí)間研究S 法測(cè)還原糖含量所得 OD540,即為對(duì)應(yīng)纖維素酶用量降解采集應(yīng)時(shí)間水解采集卡的還原糖釋放量如圖 2.1 所示,由此可得反應(yīng)素酶釋放還原糖的量在 30 min 時(shí)最大為 1.672 mg/ml,在之后的平緩甚至緩慢下降,即選用 30 min 作為復(fù)配酶反應(yīng)的時(shí)間。
圖 2.2 束斑直徑為 50 μm 時(shí)的烘干 20 小時(shí)的血液采集卡組的電鏡照片如圖圖 2.3 所示,束斑直徑為 50 μm 時(shí)的烘干 7 天的血液采集卡組的電鏡照片,圖 2中左側(cè) c 圖為對(duì)照組未經(jīng)復(fù)配酶處理的烘干 7 天的血液采集卡的電鏡照片,右側(cè) d 圖為實(shí)驗(yàn)組經(jīng)復(fù)配酶處理的烘干 7 天的血液采集卡的電鏡照片。在圖 c 中,首先因?yàn)檠翰杉ǖ睦w維經(jīng)過(guò)了 7 天的老化實(shí)驗(yàn)處理,采集卡的纖維與圖 2.2 中 a 小圖有明顯的差別,雖然未經(jīng)復(fù)配酶處理表面就已不太平滑,但整體仍為圓柱狀,有較為淺淺的小溝壑;在圖 d 中纖維表面極其不平整,非常不平滑,出現(xiàn)了極其明顯的溝壑,甚至中間有很長(zhǎng)很深的溝壑表明復(fù)配酶對(duì)血液采集卡的纖維更為明顯的降解作用。
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]磁珠DNA自動(dòng)提取系統(tǒng)在法醫(yī)檢驗(yàn)中的應(yīng)用研究[J]. 劉桂濤,徐興馳. 法制博覽. 2019(04)
[2]不同保存時(shí)間對(duì)于血液DNA提取質(zhì)量的影響[J]. 孫婷,納莉,丁璐,周瑜,盧震輝,杜勇. 中國(guó)繼續(xù)醫(yī)學(xué)教育. 2019(03)
[3]卵泡液中游離線粒體DNA提取和定量方法的研究[J]. 劉宇,趙雪,鄒敏,邵淑敏,李嬌,張衷源,汪文諍,張玲. 生殖醫(yī)學(xué)雜志. 2018(11)
[4]國(guó)產(chǎn)和進(jìn)口磁珠提取試劑盒提取微量DNA的對(duì)比分析[J]. 李麗芬,林超奇,李小丹. 海峽科學(xué). 2018(11)
[5]5種試劑盒對(duì)血漿游離DNA提取效果的比較[J]. 李雪蓮,齊謝敏,鄒秉杰,黃青,宋沁馨,周國(guó)華. 中國(guó)現(xiàn)代應(yīng)用藥學(xué). 2018(08)
[6]一種磁珠提取結(jié)合實(shí)時(shí)熒光定量核酸擴(kuò)增定量檢測(cè)重組人血白蛋白中畢赤酵母DNA殘留方法的建立[J]. 王敏力,馬秋平,侯繼鋒. 中國(guó)藥學(xué)雜志. 2018(10)
[7]全自動(dòng)核酸提取儀與手動(dòng)提取組織DNA的效率比較[J]. 林丹義,張科平,許潔,顏黎栩,駱新蘭,劉艷輝. 臨床與實(shí)驗(yàn)病理學(xué)雜志. 2017(12)
[8]“動(dòng)物組織中DNA的分離提取及含量測(cè)定”實(shí)驗(yàn)教學(xué)改革[J]. 趙玉紅,李欣,李小菊,周浩,李登文,石建黨,張金紅,趙立青. 實(shí)驗(yàn)技術(shù)與管理. 2017(11)
[9]應(yīng)用M48磁珠試劑盒提取牙齒DNA[J]. 程沖,陳啟鳴. 海峽科學(xué). 2017(11)
[10]利用顯微搜索衣物上血跡進(jìn)行DNA檢驗(yàn)1例[J]. 張瑾,張穎,劉開(kāi)會(huì),溫帥媛,白艷平,陶克明. 中國(guó)法醫(yī)學(xué)雜志. 2015(05)
博士論文
[1]不同預(yù)處理工藝對(duì)稻殼纖維素酶酶解效果的影響[D]. 余君.華中農(nóng)業(yè)大學(xué) 2008
碩士論文
[1]天然纖維素超微結(jié)構(gòu)層次及不同內(nèi)切纖維素酶降解特異性的研究[D]. 陳玉.山東大學(xué) 2017
本文編號(hào):3233611
【文章來(lái)源】:吉林大學(xué)吉林省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校
【文章頁(yè)數(shù)】:63 頁(yè)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【部分圖文】:
木質(zhì)纖維素的結(jié)構(gòu)示意圖
即纖維素酶蛋白含量為 1.87 mg/ml,1 ml 標(biāo)準(zhǔn)體系解棉布釋放還原糖的量最大為 1.63 mg/ml,為最佳纖維素酶復(fù)配表 2.6 針對(duì)紙類木質(zhì)纖維素的纖維素酶用量研究結(jié)果表號(hào) 1 2 3 4 5 6 7 8 蛋白含量g)0.37 0.75 1.12 1.50 1.87 2.24 2.62 2.99 釋放量/ml)0.03 0.27 0.50 0.87 1.63 1.18 0.86 0.68 酶最佳反應(yīng)時(shí)間研究S 法測(cè)還原糖含量所得 OD540,即為對(duì)應(yīng)纖維素酶用量降解采集應(yīng)時(shí)間水解采集卡的還原糖釋放量如圖 2.1 所示,由此可得反應(yīng)素酶釋放還原糖的量在 30 min 時(shí)最大為 1.672 mg/ml,在之后的平緩甚至緩慢下降,即選用 30 min 作為復(fù)配酶反應(yīng)的時(shí)間。
圖 2.2 束斑直徑為 50 μm 時(shí)的烘干 20 小時(shí)的血液采集卡組的電鏡照片如圖圖 2.3 所示,束斑直徑為 50 μm 時(shí)的烘干 7 天的血液采集卡組的電鏡照片,圖 2中左側(cè) c 圖為對(duì)照組未經(jīng)復(fù)配酶處理的烘干 7 天的血液采集卡的電鏡照片,右側(cè) d 圖為實(shí)驗(yàn)組經(jīng)復(fù)配酶處理的烘干 7 天的血液采集卡的電鏡照片。在圖 c 中,首先因?yàn)檠翰杉ǖ睦w維經(jīng)過(guò)了 7 天的老化實(shí)驗(yàn)處理,采集卡的纖維與圖 2.2 中 a 小圖有明顯的差別,雖然未經(jīng)復(fù)配酶處理表面就已不太平滑,但整體仍為圓柱狀,有較為淺淺的小溝壑;在圖 d 中纖維表面極其不平整,非常不平滑,出現(xiàn)了極其明顯的溝壑,甚至中間有很長(zhǎng)很深的溝壑表明復(fù)配酶對(duì)血液采集卡的纖維更為明顯的降解作用。
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]磁珠DNA自動(dòng)提取系統(tǒng)在法醫(yī)檢驗(yàn)中的應(yīng)用研究[J]. 劉桂濤,徐興馳. 法制博覽. 2019(04)
[2]不同保存時(shí)間對(duì)于血液DNA提取質(zhì)量的影響[J]. 孫婷,納莉,丁璐,周瑜,盧震輝,杜勇. 中國(guó)繼續(xù)醫(yī)學(xué)教育. 2019(03)
[3]卵泡液中游離線粒體DNA提取和定量方法的研究[J]. 劉宇,趙雪,鄒敏,邵淑敏,李嬌,張衷源,汪文諍,張玲. 生殖醫(yī)學(xué)雜志. 2018(11)
[4]國(guó)產(chǎn)和進(jìn)口磁珠提取試劑盒提取微量DNA的對(duì)比分析[J]. 李麗芬,林超奇,李小丹. 海峽科學(xué). 2018(11)
[5]5種試劑盒對(duì)血漿游離DNA提取效果的比較[J]. 李雪蓮,齊謝敏,鄒秉杰,黃青,宋沁馨,周國(guó)華. 中國(guó)現(xiàn)代應(yīng)用藥學(xué). 2018(08)
[6]一種磁珠提取結(jié)合實(shí)時(shí)熒光定量核酸擴(kuò)增定量檢測(cè)重組人血白蛋白中畢赤酵母DNA殘留方法的建立[J]. 王敏力,馬秋平,侯繼鋒. 中國(guó)藥學(xué)雜志. 2018(10)
[7]全自動(dòng)核酸提取儀與手動(dòng)提取組織DNA的效率比較[J]. 林丹義,張科平,許潔,顏黎栩,駱新蘭,劉艷輝. 臨床與實(shí)驗(yàn)病理學(xué)雜志. 2017(12)
[8]“動(dòng)物組織中DNA的分離提取及含量測(cè)定”實(shí)驗(yàn)教學(xué)改革[J]. 趙玉紅,李欣,李小菊,周浩,李登文,石建黨,張金紅,趙立青. 實(shí)驗(yàn)技術(shù)與管理. 2017(11)
[9]應(yīng)用M48磁珠試劑盒提取牙齒DNA[J]. 程沖,陳啟鳴. 海峽科學(xué). 2017(11)
[10]利用顯微搜索衣物上血跡進(jìn)行DNA檢驗(yàn)1例[J]. 張瑾,張穎,劉開(kāi)會(huì),溫帥媛,白艷平,陶克明. 中國(guó)法醫(yī)學(xué)雜志. 2015(05)
博士論文
[1]不同預(yù)處理工藝對(duì)稻殼纖維素酶酶解效果的影響[D]. 余君.華中農(nóng)業(yè)大學(xué) 2008
碩士論文
[1]天然纖維素超微結(jié)構(gòu)層次及不同內(nèi)切纖維素酶降解特異性的研究[D]. 陳玉.山東大學(xué) 2017
本文編號(hào):3233611
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