本文關(guān)鍵詞：重金屬導(dǎo)致細(xì)胞損傷的研究，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：隨著經(jīng)濟(jì)不斷發(fā)展,食品安全、環(huán)境問題也在不斷浮現(xiàn),重金屬超標(biāo)問題無(wú)時(shí)無(wú)刻不在影響人們的身體健康,越來(lái)越引起人們的重視。重金屬常來(lái)自于污染的水、土壤、大氣。當(dāng)重金屬進(jìn)入體內(nèi)后,重金屬可能與細(xì)胞中某些蛋白質(zhì)或者酶發(fā)生反應(yīng),造成其活性喪失,還可能損傷DNA,影響細(xì)胞復(fù)制,造成DNA突變,還會(huì)累積在體內(nèi)某些器官中,造成慢性中毒,嚴(yán)重?fù)p害身體健康。本研究以探究重金屬對(duì)細(xì)胞損傷為出發(fā)點(diǎn),首先對(duì)樣品前處理進(jìn)行了優(yōu)化,確定了最佳酸體系和酸比例,還對(duì)石墨爐程序升溫進(jìn)行優(yōu)化,得到了最佳灰化和原子化溫度,然后運(yùn)用高分辨率連續(xù)光源石墨爐原子吸收光譜法分別測(cè)定了經(jīng)過不同濃度鎘、鉛、鎳和銅處理的培養(yǎng)基培養(yǎng)的細(xì)胞對(duì)四種重金屬的吸收作用,選取了酶標(biāo)儀測(cè)量吸光值方法測(cè)定細(xì)胞在含有不同濃度重金屬的培養(yǎng)基中的存活率。結(jié)果表明,四種重金屬中,Cd處理的細(xì)胞存活率在81.8-100%之間,Pb處理的細(xì)胞存活率在66.4-100%之間,Ni處理的細(xì)胞存活率在89.5-100%之間,Cu處理的細(xì)胞存活率在47.2-100%之間,其中細(xì)胞在Pb和Cu中存活率變化趨勢(shì)要明顯于Cd和Ni。隨著重金屬濃度不斷增多,細(xì)胞存活率在下降,其中Pb和Cu的存活率隨濃度增加有明顯下降,Cd和Ni下降不明顯,說(shuō)明細(xì)胞對(duì)Cd和Ni的耐受性要強(qiáng)于Pb和Cu,可能與細(xì)胞中谷胱甘肽等蛋白質(zhì)表達(dá)有關(guān),這些蛋白與重金屬Cd和Ni結(jié)合作用強(qiáng)于Pb和Cu,避免了重金屬損傷DNA、抑制細(xì)胞增殖,從而減弱了細(xì)胞凋亡。細(xì)胞對(duì)Cd的吸收率為20.0-76.0%,對(duì)Pb的吸收率為1.0-20.7%,對(duì)Ni的吸收率為64.5-87.6%,對(duì)Cu的吸收率為2.9-11.5%。細(xì)胞對(duì)Ni和Cd吸收較明顯,對(duì)Pb和Cu吸收作用較低,可見細(xì)胞對(duì)重金屬有選擇性吸收。細(xì)胞對(duì)Cd的吸收率呈逐漸上升的趨勢(shì),當(dāng)Cd濃度超過10μg/L時(shí),細(xì)胞對(duì)Cd吸收率明顯升高,在25μg/L時(shí)達(dá)到峰值,吸收率達(dá)到76.0%,且隨著濃度升高吸收率不再上升,受重金屬濃度升高影響很小,這可能與鈣離子通道蛋白結(jié)構(gòu)改變有關(guān),使得更多的Cd無(wú)法進(jìn)入細(xì)胞。細(xì)胞對(duì)Pb的吸收率呈逐漸上升又逐漸下降的趨勢(shì),當(dāng)Pb濃度在300μg/L時(shí)吸收率達(dá)到最大值20.7%,隨后隨著濃度升高逐漸遞減至2.9%,這可能與酶蛋白或金屬結(jié)合蛋白上的二價(jià)金屬離子結(jié)合位點(diǎn)改變有關(guān)。細(xì)胞對(duì)Ni的吸收率呈逐漸升高隨后略微降低的趨勢(shì),在500μg/L時(shí)吸收率達(dá)到最大值87.6%,隨后吸收率略微降低,受重金屬濃度增加的影響不大,這可能與細(xì)胞Ca2+協(xié)同轉(zhuǎn)運(yùn)、二價(jià)陽(yáng)離子載體運(yùn)輸有關(guān)。細(xì)胞對(duì)Cu的吸收率呈逐漸增高又逐漸降低的趨勢(shì),在3000μg/L時(shí)吸收率達(dá)到最大值11.5%,隨后逐漸降低至8.8%,可能與Cu作用的靶點(diǎn)線粒體的自我保護(hù)有關(guān)。雖然細(xì)胞對(duì)Cd和Ni的吸收率較高,但是細(xì)胞對(duì)Cd和Ni的耐受性卻要強(qiáng)于Pb和Cu,導(dǎo)致的細(xì)胞凋亡作用弱于Pb和Cu,這可能由于Cd和Ni通過離子泵或者蛋白結(jié)合后進(jìn)入細(xì)胞形成金屬離子-蛋白復(fù)合物導(dǎo)致毒性下降有著一定聯(lián)系。本研究為重金屬導(dǎo)致細(xì)胞損傷程度檢測(cè)提供了豐富的實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù),采用的濕法消解作為細(xì)胞與培養(yǎng)基樣品前處理方法為細(xì)胞重金屬含量檢測(cè)提供了可靠的前處理方法,運(yùn)用高分辨率連續(xù)光源石墨爐原子吸收光譜法為細(xì)胞中重金屬含量檢測(cè)提供了可靠的檢測(cè)方法,并探討了細(xì)胞對(duì)不同重金屬的吸收率及受影響的情況,對(duì)于研究重金屬的健康危害具有重要意義。
【關(guān)鍵詞】：重金屬 細(xì)胞損傷 原子吸收光譜法 定量檢測(cè)
【學(xué)位授予單位】：北京工業(yè)大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號(hào)】：R114
【目錄】：

• 摘要4-6
• Abstract6-10
• 第1章 緒論10-28
• 1.1 研究背景10
• 1.2 重金屬對(duì)人體的危害10-11
• 1.3 重金屬導(dǎo)致細(xì)胞損傷機(jī)制11-28
• 1.3.1 鎘對(duì)細(xì)胞的損傷機(jī)理12-17
• 1.3.2 鉛對(duì)細(xì)胞的損傷機(jī)理17-19
• 1.3.3 鎳對(duì)細(xì)胞的損傷機(jī)理19-24
• 1.3.4 銅對(duì)細(xì)胞的損傷機(jī)理24-28
• 第2章 含重金屬培養(yǎng)基與細(xì)胞消解方法研究28-36
• 2.1 引言28
• 2.2 儀器與試劑28-29
• 2.2.1 儀器28-29
• 2.2.2 試劑29
• 2.3 樣品消解方法29-31
• 2.3.1 濕法消解酸體系的優(yōu)化29-30
• 2.3.2 濕法消解酸比例的優(yōu)化30-31
• 2.3.3 濕法消解程序升溫的優(yōu)化31
• 2.4 結(jié)果與討論31-34
• 2.5 本章小結(jié)34-36
• 第3章 石墨爐原子吸收光譜法測(cè)定細(xì)胞中的重金屬36-54
• 3.1 引言36
• 3.2 原子吸收光譜法36-40
• 3.2.1 高分辨率連續(xù)光源原子吸收光譜法36-39
• 3.2.2 原子吸收光譜儀定量分析方法和分析參數(shù)39-40
• 3.3 主要儀器和試劑40-42
• 3.3.1 儀器40-41
• 3.3.2 試劑41
• 3.3.3 實(shí)驗(yàn)所需溶液的配制41-42
• 3.4 實(shí)驗(yàn)方法42-44
• 3.4.1 細(xì)胞傳代培養(yǎng)42
• 3.4.2 細(xì)胞存活率的測(cè)定42-43
• 3.4.3 原子吸收測(cè)定條件43
• 3.4.4 細(xì)胞與培養(yǎng)基的消解43-44
• 3.5 結(jié)果與討論44-53
• 3.5.1 基體改進(jìn)劑的選擇44
• 3.5.2 儀器工作條件的選擇44-46
• 3.5.3 標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制46-47
• 3.5.4 靈敏度和準(zhǔn)確性47-48
• 3.5.5 樣品的測(cè)定48-53
• 3.6 本章小結(jié)53-54
• 結(jié)論54-56
• 參考文獻(xiàn)56-64
• 攻讀碩士學(xué)位期間所發(fā)表的學(xué)術(shù)論文64-66
• 致謝66

【相似文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 蔣錦琪,張平寬,關(guān)韶峰,吳京,于方治,密繼紅;磁場(chǎng)對(duì)加熱所致紅細(xì)胞損傷的保護(hù)作用觀察[J];生物磁學(xué);2003年01期

2 張家驤;缺氧引起細(xì)胞損傷的一般機(jī)理[J];小兒急救醫(yī)學(xué)雜志;1995年01期

3 田中,李艷斌;運(yùn)動(dòng)與紅細(xì)胞損傷[J];山東體育科技;1998年04期

4 ;國(guó)外窗口[J];醫(yī)學(xué)信息薈萃;1993年04期

5 葉煦亭;鎘中毒誘發(fā)的自由基對(duì)紅細(xì)胞損傷及帶3蛋白表達(dá)的影響[J];第二軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報(bào);1999年04期

6 賀永明;崔鳳梅;;低劑量輻照細(xì)胞損傷機(jī)制[J];中國(guó)醫(yī)學(xué)創(chuàng)新;2012年06期

7 Trump BF;Berezesky IK;譚景瑩;;離子調(diào)節(jié)、細(xì)胞損傷與致癌作用[J];國(guó)外醫(yī)學(xué)(衛(wèi)生經(jīng)濟(jì)分冊(cè));1988年03期

8 趙國(guó)華;韓笑;;蟲草素對(duì)β-淀粉樣蛋白誘導(dǎo)PC12細(xì)胞損傷的保護(hù)作用[J];北華大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版);2012年04期

9 韓銘;鄧子輝;薛輝;李永明;顏光濤;;瘦素減輕6-羥基多巴胺誘導(dǎo)的SH-SY5Y細(xì)胞損傷[J];解放軍醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào);2014年01期

10 康美艷;;血液冷藏時(shí)間對(duì)濾白過程紅細(xì)胞損傷的探討[J];中國(guó)輸血雜志;2012年S1期

中國(guó)重要會(huì)議論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 李成檀;張緯萍;袁玉梅;方三華;魏爾清;;5-脂氧酶在PC12細(xì)胞缺糖低氧損傷時(shí)的激活及機(jī)制[A];中國(guó)藥理學(xué)會(huì)第九次全國(guó)會(huì)員代表大會(huì)暨全國(guó)藥理學(xué)術(shù)會(huì)議論文集[C];2007年

2 劉樹滔;張晨;趙花琴;陳曉超;饒平凡;;融合蛋白PTD-SOD對(duì)紫外輻射引起的細(xì)胞損傷的保護(hù)作用[A];中國(guó)食品科學(xué)技術(shù)學(xué)會(huì)第五屆年會(huì)暨第四屆東西方食品業(yè)高層論壇論文摘要集[C];2007年

3 張晨;趙花琴;劉元?jiǎng)?饒平凡;劉樹滔;;PTD-SOD對(duì)紫外線造成的細(xì)胞損傷的保護(hù)作用(英文)[A];華東六省一市生物化學(xué)與分子生物學(xué)會(huì)2008年學(xué)術(shù)交流會(huì)論文摘要匯編[C];2008年

4 賀靜;李雅莉;張?zhí)m;;藥物對(duì)過氧化氫致細(xì)胞損傷的保護(hù)作用[A];2013年全國(guó)老年性癡呆與相關(guān)疾病學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編[C];2013年

5 崔玉芳;楊紅;高亞兵;崔雪梅;熊呈琦;高臨路;王德文;;電磁脈沖對(duì)犬淋巴細(xì)胞損傷及其機(jī)理的實(shí)驗(yàn)研究[A];面向二十一世紀(jì)的生物醫(yī)學(xué)體視學(xué)和軍事病理學(xué)論文摘要匯編[C];2000年

6 王子兵;崔玉芳;郭瑛;徐菡;姜竺君;靳巍;董波;毛建平;;輻射誘發(fā)的人AHH-1 T細(xì)胞損傷特點(diǎn)及機(jī)制探討[A];第六屆全國(guó)生物醫(yī)學(xué)體視學(xué)學(xué)術(shù)會(huì)議暨第九屆全軍軍事病理學(xué)學(xué)術(shù)會(huì)議、第五屆全軍定量病理學(xué)學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編[C];2005年

7 張祥宏;申海濤;呂平;邢欣;邢凌霄;嚴(yán)霞;王俊靈;;JNK信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路在黃曲霉毒素G1誘導(dǎo)A549細(xì)胞損傷中的意義[A];全國(guó)腫瘤流行病學(xué)和腫瘤病因?qū)W學(xué)術(shù)會(huì)議論文集[C];2007年

8 王小洪;孟海偉;馮蕾;吳鳳霞;何秀全;景愛紅;張忠和;劉樹偉;;EGB761對(duì)6-OHDA所致PC12細(xì)胞損傷的抑制作用研究[A];中國(guó)解剖學(xué)會(huì)2011年年會(huì)論文文摘匯編[C];2011年

9 魏偉平;薛耀明;高方;朱波;李晨鐘;;高糖誘導(dǎo)INS-1細(xì)胞損傷的記憶效應(yīng)研究[A];中華醫(yī)學(xué)會(huì)第十次全國(guó)內(nèi)分泌學(xué)學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編[C];2011年

10 韓陽(yáng)光;許靜;楊卓;;LIF對(duì)AMA誘導(dǎo)的PC12細(xì)胞損傷的保護(hù)作用[A];中國(guó)生理學(xué)會(huì)第23屆全國(guó)會(huì)員代表大會(huì)暨生理學(xué)學(xué)術(shù)大會(huì)論文摘要文集[C];2010年

中國(guó)重要報(bào)紙全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前2條

1 記者 常麗君;干細(xì)胞利用“急救箱”修復(fù)細(xì)胞損傷[N];科技日?qǐng)?bào);2014年

2 本報(bào)記者 李禾;怎樣飲食才能有效預(yù)防癌癥？[N];科技日?qǐng)?bào);2008年

中國(guó)博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前1條

1 馬嶸;促紅細(xì)胞生成素對(duì)Aβ_(25-35)致PC12細(xì)胞損傷的保護(hù)作用及機(jī)制研究[D];華中科技大學(xué);2009年

中國(guó)碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 聶齊;重金屬導(dǎo)致細(xì)胞損傷的研究[D];北京工業(yè)大學(xué);2015年

2 樊茹;黃酮類化合物CJY對(duì)β-淀粉樣蛋白25-35介導(dǎo)的PC12細(xì)胞損傷的保護(hù)作用及其機(jī)制研究[D];河南大學(xué);2012年

3 鄭小敏;施普善注射液對(duì)谷氨酸引起的SH-SY5Y細(xì)胞損傷作用的保護(hù)機(jī)制研究[D];復(fù)旦大學(xué);2009年

4 覃麗琳;氟的細(xì)胞損傷作用及硒和維生素E的干預(yù)效果研究[D];廣西醫(yī)科大學(xué);2013年

5 何國(guó)維;L-抗壞血酸和D-異抗壞血酸的促氧化作用及其機(jī)制研究[D];廣西醫(yī)科大學(xué);2013年

6 龍穎;卷煙煙氣抽提物致BEAS-2B細(xì)胞損傷及茶多酚保護(hù)作用[D];南華大學(xué);2011年

7 俞慧;茶多酚對(duì)草甘膦致小鼠睪丸支持細(xì)胞損傷的保護(hù)作用[D];蚌埠醫(yī)學(xué)院;2013年

8 王麗娜;開心散對(duì)Aβ_（25-35）誘導(dǎo)SK-N-SH細(xì)胞損傷的保護(hù)作用及機(jī)制的研究[D];山東大學(xué);2006年

9 李彩蓮;小檗堿對(duì)H_2O_2和Aβ（25-35）誘導(dǎo)PC12細(xì)胞損傷的作用及其機(jī)制[D];華中科技大學(xué);2006年

10 許若頎;血紅素氧合酶對(duì)長(zhǎng)波紫外線導(dǎo)致人體皮膚角質(zhì)形成細(xì)胞損傷作用的初步研究[D];重慶大學(xué);2012年

  本文關(guān)鍵詞：重金屬導(dǎo)致細(xì)胞損傷的研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

本文編號(hào)：484486