【摘要】：【研究目的】探討草甘膦類除草劑農(nóng)達(dá)(roundup,活性成分為草甘膦)對(duì)雄性Balb/c小鼠生殖功能與免疫功能的影響。【研究方法】1.將60只成年SPF級(jí)雄性Balb/c小鼠隨機(jī)分為四個(gè)劑量組,分別為陰性對(duì)照(蒸餾水)組、20 mg/kg農(nóng)達(dá)染毒劑量組、200 mg/kg農(nóng)達(dá)染毒劑量組和2 000 mg/kg農(nóng)達(dá)染毒劑量組,每組15只實(shí)驗(yàn)動(dòng)物。選擇經(jīng)口灌胃的染毒的方式,染毒容量為20ml/kg(每千克小鼠體重灌胃重量為20毫克),每天1次,連續(xù)染毒30d。染毒結(jié)束后,對(duì)小鼠精子數(shù)量、精子活動(dòng)度和血清中睪酮(T)水平進(jìn)行測定。制取小鼠睪丸組織勻漿,測定乳酸脫氫酶(LDH)、琥珀酸脫氫酶(SDH)、γ-谷氨酰轉(zhuǎn)移酶(γ-GT)三種睪丸酶的活力以及氧化應(yīng)激指標(biāo)丙二醛(MDA)含量和總超氧化物歧化酶(T-SOD)、谷胱甘肽過氧化物酶(GSH-Px)的活力。在光學(xué)顯微鏡下觀察小鼠睪丸組織結(jié)構(gòu)的病理變化,采用缺口末端標(biāo)記技術(shù)(TUNEL法)對(duì)實(shí)驗(yàn)小的鼠睪丸組織細(xì)胞的凋亡情況進(jìn)行檢測。2.將40只成年SPF級(jí)雄性Balb/c小鼠隨機(jī)分為4組,每組10只實(shí)驗(yàn)動(dòng)物。實(shí)驗(yàn)設(shè)立陰性對(duì)照(蒸餾水)組和20農(nóng)達(dá)染毒劑量組、200 mg/kg農(nóng)達(dá)染毒劑量組、2 000 mg/kg農(nóng)達(dá)染毒劑量組,采用經(jīng)口灌胃方式對(duì)動(dòng)物進(jìn)行染毒,染毒容量為20 ml/kg,每天1次,連續(xù)30d。實(shí)驗(yàn)動(dòng)物模型建立后,分別計(jì)算每個(gè)農(nóng)達(dá)染毒劑量組小鼠脾臟系數(shù)、胸腺系數(shù),采用流式細(xì)胞術(shù)(FCM)分析小鼠脾臟中CD3~+、CD4~+、CD8~+T細(xì)胞,CD45r~+B細(xì)胞,CD49b~+NK細(xì)胞比例和小鼠胸腺中CD4~+、CD8~+T細(xì)胞比例并分別計(jì)算小鼠脾臟和胸腺CD4~+T/CD8~+T比值;同時(shí)分別測定小鼠脾臟組織勻漿和胸腺組織勻漿中氧化應(yīng)激指標(biāo)MDA含量和T-SOD、GSH-Px活力�！狙芯拷Y(jié)果】1.農(nóng)達(dá)染毒對(duì)雄性Balb/c小鼠生殖功能的影響與陰性對(duì)照組相比,200農(nóng)達(dá)染毒劑量組、2 000 mg/kg農(nóng)達(dá)染毒劑量組小鼠的體重和各農(nóng)達(dá)染毒組小鼠的睪丸重量有明顯降低(P0.01);200農(nóng)達(dá)染毒劑量組、2 000 mg/kg農(nóng)達(dá)染毒劑量組小鼠精子數(shù)量明顯減少、精子活動(dòng)度顯著降低;各劑量農(nóng)達(dá)染毒組小鼠血清睪酮水平與陰性對(duì)照組相比均有明顯降低,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.01)。農(nóng)達(dá)染毒可引起實(shí)驗(yàn)小鼠睪丸組織不同程度的病理損傷,主要表現(xiàn)為各級(jí)生精細(xì)胞排列紊亂及脫落,同時(shí)出現(xiàn)了部分細(xì)胞變性的、壞死甚至核固縮,在曲細(xì)精管的管腔中可以見到還未成熟的生精細(xì)胞的脫落,成熟精子數(shù)量明顯減少,隨染毒劑量增加,損害進(jìn)一步加重。TUNEL法檢測表明200mg/kg農(nóng)達(dá)染毒劑量組、2 000mg/kg染毒組小鼠睪丸組織細(xì)胞凋亡率明顯高于陰性對(duì)照組(P0.01)。200 mg/kg農(nóng)達(dá)染毒劑量組、2 000 mg/kg農(nóng)達(dá)染毒劑量組小鼠睪丸勻漿中LDH活性有下降趨勢(shì),SDH活性有先升高后降低的趨勢(shì),各染毒組小鼠睪丸組織勻漿中LDH、SDH和γ-GT活性與陰性對(duì)照組相比無顯著差異(P0.05)。2 000mg/kg農(nóng)達(dá)染毒劑量組小鼠睪丸組織勻漿中MDA含量有明顯升高(P0.01),各劑量染毒組小鼠睪丸組織勻漿中GSH-Px活性均降低,與陰性對(duì)照組相比,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05,P0.01)。2.農(nóng)達(dá)染毒對(duì)雄性Balb/c小鼠免疫功能的影響農(nóng)達(dá)染毒30 d后,200 mg/kg農(nóng)達(dá)染毒組、2 000 mg/kg農(nóng)達(dá)染毒組小鼠脾臟重量有明顯減低(P0.01)。各劑量農(nóng)達(dá)染毒組小鼠脾臟CD4~+T細(xì)胞比例有明顯升高(P0.01),200農(nóng)達(dá)染毒劑量組、2 000 mg/kg農(nóng)達(dá)染毒劑量組小鼠脾臟CD3~+、CD8~+T細(xì)胞比例明顯高于陰性對(duì)照組;CD3~-CD45r~+B細(xì)胞比例則明顯低于陰性對(duì)照組(P0.01);CD3~-CD49b~+NK細(xì)胞比例無明顯變化。各染毒組小鼠脾臟CD4~+T/CD8~+T比值均降低,但只有200 mg/kg劑量組比值與陰性對(duì)照組相比,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.01)。200 mg/kg、2 000 mg/kg農(nóng)達(dá)染毒組小鼠胸腺CD4~+、CD8~+T細(xì)胞比例明顯高于陰性對(duì)照組(P0.05,P0.01);各染毒組小鼠胸腺CD4~+T/CD8~+T比值均有顯著降低(P0.01)。各染毒組小鼠脾臟勻漿中MDA含量均顯著增加,GSH-Px活力均明顯降低(P0.05,P0.01)。200mg/kg農(nóng)達(dá)染毒劑量組、2 000 mg/kg農(nóng)達(dá)染毒劑量組小鼠胸腺勻漿中MDA含量明顯升高,T-SOD、GSH-Px活力有明顯降低(P0.05,P0.01)�！狙芯拷Y(jié)論】1.在本實(shí)驗(yàn)染毒時(shí)間和劑量范圍內(nèi),除草劑農(nóng)達(dá)對(duì)雄性Balb/c小鼠的生殖功能有一定的毒性作用,它可能透過血睪屏障對(duì)睪丸組織產(chǎn)生直接的損害作用,降低小鼠精子數(shù)量、精子活動(dòng)度和血清睪酮水平。2.農(nóng)達(dá)可能破壞雄性Balb/c小鼠睪丸組織相關(guān)酶活性的平衡,破壞小鼠睪丸組織內(nèi)氧化平衡狀態(tài),誘導(dǎo)睪丸組織細(xì)胞的凋亡。3.農(nóng)達(dá)可能通過影響雄性Balb/c小鼠脾臟、胸腺淋巴細(xì)胞亞群和氧化應(yīng)激狀態(tài),從而影響小鼠機(jī)體的免疫狀態(tài)。
【圖文】：

農(nóng)達(dá)分子結(jié)構(gòu)式

圖 2 各劑量農(nóng)達(dá)染毒組小鼠體重的變化情況2 農(nóng)達(dá)染毒對(duì)小鼠睪丸、附睪重量及睪丸系數(shù)、附睪系數(shù)的影響方差分析結(jié)果顯示（見表 1-5），，與陰性對(duì)照組相比，各劑量染毒組小鼠睪丸重
【學(xué)位授予單位】：濟(jì)南大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2018
【分類號(hào)】：R114

【參考文獻(xiàn)】

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