【摘要】：乳糜瀉在工業(yè)化國家和白種人中的發(fā)病率已上升至1%-8%。在我國,乳糜瀉的冰山也正在浮起。在以小麥為主食的山東人群中,乳糜瀉的發(fā)病率達到了0.76%。目前,終生嚴格堅持無麩質飲食是治療乳糜瀉的最佳方法。然而,因我國無麩質食品生產(chǎn)鏈缺失,人們對無麩質飲食意識度不高而且小麥粉和麩質蛋白作為配料已廣泛用于加工食品中,導致乳糜瀉患者在日常生活中難以完全避免攝入麩質。另外,長期無麩質飲食將會影響患者的社會交往活動,對其心理與經(jīng)濟造成負擔。由此可見,探尋新的冶療方法用于輔助或替代無麩質飲食療法具有重要意義。抗氧化物具有清除活性自由基,緩解氧化應激以及抑制某些促炎因子表達的作用,那么抗氧化物是否可以在一定程度上緩解乳糜瀉的氧化應激及某些病癥,成為治療乳糜瀉的輔助手段,這值得進一步研究。本研究通過采用Caco-2細胞構建乳糜瀉氧化應激模型,應用現(xiàn)代分子生物學技術篩選可以消減麩質蛋白毒性作用的天然抗氧化物并對其分子作用機制進行了研究。主要方法、結果和結論如下:(1)乳糜瀉氧化應激模型的構建Caco-2細胞經(jīng)過不同濃度,不同作用時間的麩質蛋白衍生肽段p31-43處理,以細胞內ROS水平、SOD酶活性、MDA和GSH含量為檢測指標,成功構建了基于Caco-2細胞的乳糜瀉氧化應激模型。(2)消減麩質蛋白毒性作用的天然抗氧化物篩選選取不同作用時間,不同濃度以及不同種類的天然抗氧化物預處理已成功建立的細胞模型,從麩質蛋白衍生肽段p31-43所誘導的細胞氧化損傷、乳糜瀉標志物及炎癥因子表達、小腸上皮屏障功能紊亂三方面篩選可以消減麩質蛋白毒性作用的天然抗氧化物。結果從槲皮素、表沒食子兒茶素沒食子酸酯、染料木素、β-胡蘿卜素、楊梅酮、山柰酚、白藜蘆醇7種天然抗氧化物中成功篩選到了槲皮素、表沒食子兒茶素沒食子酸酯和白藜蘆醇3種。(3)抗氧化物消減麩質蛋白毒性作用分子機制的研究通過Q-PCR技術研究抗氧化物對Nrf2、mTOR、SIRT三條信號通路中關鍵基因表達的影響,以此對其分子作用機制進行初步研究。結果顯示篩選所得到的3種天然抗氧化物分子作用機制各不相同,其中白藜蘆醇的處理可以促進sirt1和sirt3基因的表達,說明白藜蘆醇消減麩質蛋白毒性作用的機制與SIRT信號通路的激活相關。
【圖文】：

2圖 1.1 麩質蛋白對氧化應激和基因表達的影響自于 Celiac Disease, Inflammation and Oxidative Damage‖

和還原劑等[39]。下文主要對涉及到的是一類主要存在于植物體內的天然抗氧要分為聚合體和非聚合體兩大類。非聚合物。如表沒食子兒茶素沒食子酸酯，槲蘆醇等。大豆，洋蔥，綠茶，藍莓提取合而成，且統(tǒng)稱為單寧類物質。原花青葡萄籽，，蘋果提取物均屬于此類[40]。氧化物都具有圖 1.2 所示的 2-苯基氧雜據(jù)母核結構上取代基團的差異又分成黃黃烷酮醇類、花青素類等。由于氫質子能力的大小與分子中質子氫的提供能力-OH‖基團數(shù)越多，則清除自由基的能力
【學位授予單位】：南昌大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2019
【分類號】：R151

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本文編號：2644242