本文關鍵詞：甲基苯丙胺急性作用的分子機制研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：甲基苯丙胺(methamphetamine, METH)為化學合成物質(zhì),歸屬于苯胺類藥物,純白晶體狀,熟稱冰毒,常作為人工合成的興奮劑使用,主要作用于中樞神經(jīng)系統(tǒng),能使人產(chǎn)生興奮,欣快感并具有致幻性,因此,多次吸食可導致藥物成癮。長期使用甲基苯丙胺會引起多巴胺信號發(fā)生改變,導致機體內(nèi)神經(jīng)元產(chǎn)生異常和神經(jīng)退行性的病變。急性注射METH后,腦區(qū)內(nèi)多巴胺信號發(fā)生改變,但具體的多巴胺信號轉(zhuǎn)導機制還太不清楚,因此,本文主要研究METH急性作用,可以進一步明確METH的作用機制。METH長期作用可引起細胞的信號分子如多巴胺(dopamine, DA)、多巴胺受體(dopamine receptor, DR)、多巴胺轉(zhuǎn)運體(Dopamine transporter, DAT)細胞周期依賴性蛋白激酶5(Cyclin-dependent kinase 5, CDK5)、及環(huán)磷酸腺苷調(diào)節(jié)的磷酸化蛋白-32(dopamine and cAMP-regulate phosphoprotein of mass-32, DARPP-32)等相關分子的改變。許多神經(jīng)遞質(zhì)與大腦內(nèi)復雜功能有關,多巴胺(dopamine, DA)是其中之一,DA作用范圍廣,在個體行為上和情感認知功能方面,以及獎賞效應中起重要的作用。DA主要通過與多巴胺受體(dopamine receptor, DR)結(jié)合,而發(fā)揮了各種功能。DR在各腦區(qū)的分布含量不一致,根據(jù)受體亞基差異,分為D1類受體和D2類受體。多巴胺轉(zhuǎn)運體(dopamine transporter, DAT)是一類典型的膜蛋白,主要分布在DA神經(jīng)元結(jié)構(gòu)的突觸前膜,能對釋放到突觸間隙的DA進行再攝取,調(diào)節(jié)突觸間隙的DA濃度,進而調(diào)控多巴胺能神經(jīng)系統(tǒng)功能。硫氧還蛋白-1(Thioredoxin-1, Trx-1)是機體內(nèi)廣泛存在氧化還原調(diào)節(jié)蛋白,具有調(diào)節(jié)轉(zhuǎn)錄因子活性,抑制細胞凋亡的作用。中腦腹側(cè)被蓋區(qū)域(Ventral Tegmentale Area, VTA),伏隔核(nucleus accumbens, NAc)和額葉皮質(zhì)是大腦中重要的腦區(qū),與獎賞行為密切相關。本文采用嗜鉻瘤細胞(rat pheochromaocytoma tumor cell line, PC 12 cells)作為實驗對象,用METH急性刺激PC12細胞,檢測Trx-1以及相關分子表達情況。研究發(fā)現(xiàn),10 μM的METH對PC12細胞中Trx-1、CDK5. DARPP32的表達有具誘導作用,在2h表達最高,D1R、TH、MAO均無明顯變化,而D2R的表達在12h和24 h顯著上升。將C57BL/6小鼠分為四組：野生型對照組(C)、野生型甲基苯丙胺組(M)、h-Trx-1轉(zhuǎn)基因型對照組(TG)、h-Trx-1轉(zhuǎn)基因型甲基苯丙胺組(TG+M),腹腔注射甲基苯丙胺4h后,獲取腦組織,結(jié)果發(fā)現(xiàn)在VTA、PFC、NAc中,Trx-1、D1R表達增加,同時D2R、DARPP-32表達減低。Trx-1高表達可以抵消這些作用。綜上所述,METH急性刺激調(diào)節(jié)D1R、D2R、和DARPP-32等相關分子表達。Trx-1具有抑制這些分子的變化的作用,因此,進一步研究Trx-1調(diào)節(jié)甲基苯丙胺作用機制,為甲基苯丙胺成癮戒斷治療提供新的理論依據(jù)。
【關鍵詞】：甲基苯丙胺 硫氧還蛋白-1 多巴胺 多巴胺受體
【學位授予單位】：昆明理工大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2015
【分類號】：R96
【目錄】：

• 摘要4-6
• Abstract6-15
• 縮略語索引15-16
• 第一章 緒論16-34
• 1.1 毒品和甲基苯丙胺16-17
• 1.1.1 甲基苯丙胺簡介16-17
• 1.2 多巴胺和多巴胺受體17-18
• 1.3 DR在大腦中的作用18-20
• 1.3.1 DA具有增強突觸生長作用18-19
• 1.3.2 DR在紋狀體和前額葉皮質(zhì)中調(diào)節(jié)神經(jīng)突起生長19
• 1.3.3 DR調(diào)節(jié)前額葉皮質(zhì)神經(jīng)細胞的分裂和定向移動19-20
• 1.3.4 DA調(diào)節(jié)神經(jīng)遞質(zhì)20
• 1.4 DR信號傳導機制和METH作用機理20-23
• 1.4.1 DR的信號傳導機制20-21
• 1.4.2 METH的相關作用機理21-23
• 1.5 硫氧還蛋白-123-24
• 1.5.1 硫氧還蛋白-1簡介23-24
• 1.6 Trx-1的相關生物學功能24-30
• 1.6.1 抗氧化作用25-26
• 1.6.2 抑制細胞凋亡作用26
• 1.6.3 生長因子作用26-27
• 1.6.4 調(diào)節(jié)轉(zhuǎn)錄因子27
• 1.6.5 介導炎癥反應27-28
• 1.6.6 促進蛋白質(zhì)折疊28
• 1.6.7 Trx-1與腫瘤28-29
• 1.6.8 Trx-1與神經(jīng)系統(tǒng)相關疾病29-30
• 1.7 CDK530-31
• 1.7.1 CDK5簡介30
• 1.7.2 CDK5與藥物成癮30-31
• 1.8 DARPP-3231-32
• 1.9 本論文研究的目的及意義32-34
• 第二章 METH對Trx-1表達水平的影響及其信號通路研究34-52
• 2.1 引言34
• 2.2 實驗方案34
• 2.3 實驗材料34-40
• 2.3.1 實驗細胞及藥物34
• 2.3.2 主要試劑34-36
• 2.3.3 實驗儀器36-37
• 2.3.4 主要試劑的配制37-40
• 2.4 實驗方法40-46
• 2.4.1 細胞培養(yǎng)40-41
• 2.4.2 細胞排板與藥物刺激41-42
• 2.4.3 提取細胞總蛋白42-43
• 2.4.4 細胞計數(shù)43-44
• 2.4.5 MTT實驗44-46
• 2.4.6 統(tǒng)計學處理46
• 2.5 實驗結(jié)果46-51
• 2.5.1 濃度依賴實驗：METH對Trx-1最佳作用濃度的確定46
• 2.5.2 時間依賴實驗：MTT檢測PC12細胞存活率46-47
• 2.5.3 不同濃度METH對PC12細胞相關蛋白水平表達的影響47-51
• 2.6 小結(jié)51-52
• 第三章 METH調(diào)節(jié)小鼠各腦區(qū)蛋白表達52-62
• 3.1 引言52
• 3.2 實驗方案52
• 3.3 材料與方法52-53
• 3.3.1 實驗動物與器械52
• 3.3.2 C57BL/6小鼠飼養(yǎng)52-53
• 3.3.3 組織取材及保存53
• 3.3.4 小鼠腦組織中總蛋白的提取53
• 3.3.5 蛋白免疫印跡法(Western Blot)53
• 3.4 統(tǒng)計學處理53
• 3.5 實驗結(jié)果53-61
• 3.5.1 METH給藥對小鼠各腦區(qū)中Trx-1表達水平的影響54-56
• 3.5.2 METH給藥對小鼠各腦區(qū)中D1R表達水平的影響56-58
• 3.5.3 METH給藥對小鼠各腦區(qū)中D2R表達水平的影響58-59
• 3.5.4 METH給藥對小鼠各腦區(qū)中DARPP-32表達水平的影響59-61
• 3.6 討論61-62
• 第四章 結(jié)論與討論62-66
• 4.1 結(jié)論62-63
• 4.1.1 確定PC12細胞中METH誘導Trx-1表達的最佳作用劑量62
• 4.1.2 確定PC12細胞中METH誘導Trx-1表達的最佳作用時間62
• 4.1.3 證明了甲基苯丙胺作用下Trx-1參與了多巴胺受體轉(zhuǎn)導通路62
• 4.1.4 證明了甲基苯丙胺作用下DARPP-32的表達變化與硫氧還蛋白-1 存在一定相關性62-63
• 4.1.5 硫氧還蛋白-1與METH急性作用有關63
• 4.2 討論63-66
• 致謝66-68
• 參考文獻68-74
• 附錄A74

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1 連玉龍,劉繼文;緊張調(diào)節(jié)的分子機制研究進展[J];環(huán)境與職業(yè)醫(yī)學;2004年04期

2 陳義,黃秀榕,祁明信;細胞脹亡的分子機制研究進展[J];中國病理生理雜志;2004年11期

3 翁鷺娜;黃河寧;;茶多酚抑制腫瘤的分子機制研究進展[J];海峽藥學;2008年04期

4 陳淑珍;甄永蘇;邵榮光;;力達霉素抗腫瘤作用及其分子機制研究新進展[J];中國抗生素雜志;2010年06期

5 袁衛(wèi)紅,宋暉,陳必良;早產(chǎn)的分子機制研究進展[J];醫(yī)學信息;2000年10期

6 李藝,楊信怡,游雪甫;耐甲氧西林金葡菌的耐藥分子機制研究[J];國外醫(yī)藥(抗生素分冊);2005年04期

7 李新枝;蔡佩玲;牟林春;;鎘致癌分子機制研究進展[J];四川解剖學雜志;2006年02期

8 鞠桂芝;低水平輻射及有關因子生物效應的生化與分子機制研究[J];國外醫(yī)學(衛(wèi)生學分冊);1994年04期

9 ;《聚丙烯酸甲酯/非晶體氧化硅納米顆粒對大鼠肺臟/胸膜的急性與亞急性影響及其分子機制研究》[J];安全;2012年11期

10 陳潔;趙正言;;攝食調(diào)控的分子機制研究進展[J];中國循證兒科雜志;2007年01期

中國重要會議論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 祝慧鳳;徐曉玉;;中醫(yī)藥影響血管生成的分子機制研究進展[A];全國中西醫(yī)結(jié)合治療心血管病及血瘀證高級論壇和研修班論文匯編[C];2004年

2 孫長灝;;肥胖分子機制研究進展及幾個新領域[A];首屆中國西部營養(yǎng)與健康、亞健康學術會議論文集[C];2005年

3 戴克勝;;不同重力環(huán)境下血小板生理功能改變及其分子機制研究[A];中國生理學會第八屆全國青年生理學工作者學術會議論文摘要[C];2009年

4 丁梅;;神經(jīng)突觸特異性形成的分子機制研究[A];“基因、進化與生理功能多樣性”海內(nèi)外學術研討會暨中國生理學會第七屆比較生理學學術會議論文摘要[C];2009年

5 陳蔚;張曉博;葉婭;張京娜;王世明;陳金朋;瞿佳;;智能環(huán)境控制系統(tǒng)誘導的小鼠干眼模型及分子機制研究[A];2008年浙江省眼科學術會議論文集[C];2008年

6 胡根林;姜槐;付一提;曾群力;魯?shù)聫?;極低頻磁場對細胞間隙連接通訊的抑制作用及其分子機制研究[A];新世紀 新機遇 新挑戰(zhàn)——知識創(chuàng)新和高新技術產(chǎn)業(yè)發(fā)展（上冊）[C];2001年

7 沙家豪;;精子遺傳信息穩(wěn)定傳遞的分子機制研究(英文)[A];2012全國發(fā)育生物學大會摘要集[C];2012年

8 朱彪;;卡波氏肉瘤相關的皰疹病毒致病的分子機制研究進展[A];中華醫(yī)學會全國第九次感染病學學術會議論文匯編[C];2006年

9 劉冬英;王茵;;茶葉多酚心血管保護作用的分子機制研究進展[A];婦幼與青少年營養(yǎng)進展學術研討會及《中國孕婦、乳母和0-6歲兒童膳食指南》宣傳推廣會論文匯編[C];2009年

10 劉冬英;王茵;;茶葉多酚心血管保護作用的分子機制研究進展[A];食品、飼料安全與風險評估學術會議論文集[C];2010年

中國重要報紙全文數(shù)據(jù)庫 前5條

1 吳一福;心腦血管保護分子機制研究瞄準新思路[N];中國醫(yī)藥報;2012年

2 王旭東;開拓鼻咽癌變分子機制研究[N];科技日報;2007年

3 章米力;我國在血栓形成分子機制研究領域獲得進展[N];大眾科技報;2008年

4 記者 熊昌彪;片仔癀抑癌分子機制研究獲進展[N];中國醫(yī)藥報;2014年

5 通訊員 張獻懷;嚴重創(chuàng)傷修復再生的細胞與分子機制研究項目納入國家973計劃[N];光明日報;2011年

中國博士學位論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 肖夢陶;代謝基因FH和SDH突變導致代謝失衡調(diào)控表觀遺傳相關分子機制研究[D];復旦大學;2014年

2 張軍東;抗真菌天然產(chǎn)物的篩選與分子機制研究[D];第二軍醫(yī)大學;2006年

3 徐誠望;EDAG調(diào)控造血的分子機制研究[D];中國人民解放軍軍事醫(yī)學科學院;2008年

4 李大為;RLIM參與p53功能調(diào)控及其分子機制研究[D];復旦大學;2011年

5 楊海燕;Fechtner綜合征的臨床及分子機制研究[D];蘇州大學;2007年

6 汪曉燕;滋補肝腎、行氣活血類中藥延緩線蟲衰老的作用及分子機制研究[D];中國中醫(yī)科學院;2010年

7 以敏;桃仁改善不同病因所致血液循環(huán)障礙的藥效及相關分子機制研究[D];廣西醫(yī)科大學;2012年

8 郭珊珊;多甲氧基黃酮的抗炎活性及相關分子機制研究[D];中國海洋大學;2012年

9 薛妮娜;新型HSP90抑制劑篩選及抗胰腺癌增殖作用和分子機制研究 HSP90抑制劑誘導胰腺癌細胞IGF-1Rβ自噬性降解的分子機制研究[D];北京協(xié)和醫(yī)學院;2015年

10 許嬋娟;GABA_B受體神經(jīng)保護功能的分子機制研究及其與G蛋白動態(tài)相互作用研究[D];華中科技大學;2011年

中國碩士學位論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 吳劍鋒;甲基苯丙胺急性作用的分子機制研究[D];昆明理工大學;2015年

2 秦園;CD36對LPS誘導的自噬和炎癥因子的影響及分子機制研究[D];蘇州大學;2015年

3 王成泉;體內(nèi)Period2基因調(diào)控X線照射后人膠質(zhì)瘤細胞MDM2基因致凋亡的分子機制研究[D];寧夏醫(yī)科大學;2015年

4 陳忠翔;重金屬鎘脅迫細胞氧化毒理分子機制研究[D];東華大學;2014年

5 王曉紅;桃柁酚對金黃色葡萄球菌生物膜形成的影響及其分子機制研究[D];西北農(nóng)林科技大學;2012年

6 萬霞;TRPA1通道整流的決定因素及分子機制研究[D];重慶醫(yī)科大學;2013年

7 陳宏鑫;~(125)I粒子植入對正常家兔喉組織損傷的分子機制研究[D];暨南大學;2013年

8 胡仁萍;納米氧化鈦導致小鼠學習記憶損傷的分子機制研究[D];蘇州大學;2013年

9 雷蕾;Tespal調(diào)控T細胞受體信號傳導的分子機制研究[D];浙江大學;2013年

10 李倩;自由基清除劑Tempol的抗缺氧作用及其分子機制研究[D];蘭州大學;2013年

  本文關鍵詞：甲基苯丙胺急性作用的分子機制研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

，

本文編號：428281