目的探討普萘洛爾抑制前列腺癌發(fā)生、發(fā)展的分子機(jī)制。方法采用Real-Time qPCR檢測(cè)miR-382和SETD8 mRNA的表達(dá),Western blotting檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)SETD8、p53、p21、凋亡相關(guān)蛋白(Bcl-2、Bax和Caspase 9)和轉(zhuǎn)移相關(guān)蛋白(N-cad、E-cad和Vimentin)的表達(dá)水平,CCK-8檢測(cè)細(xì)胞增殖能力,雙熒光素酶報(bào)告基因系統(tǒng)檢測(cè)miR-382對(duì)SETD8的靶向調(diào)控作用,Transwell侵襲實(shí)驗(yàn)檢測(cè)細(xì)胞遷移能力,構(gòu)建荷瘤小鼠動(dòng)物模型驗(yàn)證普萘洛爾在動(dòng)物體內(nèi)對(duì)前列腺癌的抑制作用。結(jié)果 miR-382在前列腺癌組織和細(xì)胞中顯著下調(diào),而SETD8顯著上調(diào),兩者呈負(fù)相關(guān)。普萘洛爾能夠通過miR-382調(diào)控SETD8/p53/p21通路,抑制前列腺癌細(xì)胞增殖和遷移,并促進(jìn)細(xì)胞凋亡,延長(zhǎng)荷瘤小鼠存活時(shí)間。結(jié)論普萘洛爾能夠通過miR-382/SETD8/p53/p21分子軸抑制前列腺癌的發(fā)展和轉(zhuǎn)移。

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圖3普萘洛爾對(duì)前列腺癌細(xì)胞系LNcaP和PC3內(nèi)SETD8和p53蛋白表達(dá)水平(xˉ±s,n=6)?

將普萘洛爾與前列腺癌細(xì)胞共培養(yǎng)12,24,36和48h,CCK-8檢測(cè)細(xì)胞增殖能力結(jié)果見圖4。與對(duì)照組比較,共培養(yǎng)48h,普萘洛爾能夠明顯抑制兩株前列腺癌細(xì)胞的增殖能力(P=0.053,0.048),共培養(yǎng)時(shí)間越長(zhǎng),效果越明顯。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,與普萘洛爾單獨(dú)組比較,普萘洛爾和m....

圖43組LNCaP和PC3細(xì)胞增殖能力(xˉ±s,n=6)?

圖3普萘洛爾對(duì)前列腺癌細(xì)胞系LNcaP和PC3內(nèi)SETD8和p53蛋白表達(dá)水平(xˉ±s,n=6)?2.4miR-382通過SETD8調(diào)控p53/p21信號(hào)通路

圖6Westernblotting法檢測(cè)前列腺癌細(xì)胞系LNCaP和PC3內(nèi)SETD8表達(dá)水平

圖53組小鼠存活時(shí)間圖73組基因檢測(cè)結(jié)果雙熒光素酶報(bào)告基因

圖73組基因檢測(cè)結(jié)果雙熒光素酶報(bào)告基因

圖6Westernblotting法檢測(cè)前列腺癌細(xì)胞系LNCaP和PC3內(nèi)SETD8表達(dá)水平圖8超表達(dá)SETD8對(duì)前列腺癌細(xì)胞系內(nèi)p53和p21表達(dá)水平的影響

本文編號(hào)：3984276