為建立有效的α6/α3β2β3 nAChRs(α6/α3β2β3,或簡寫為α6β2^*,*代表其他亞基)體外重組表達實驗模型,利用非洲爪蟾卵母細胞表達體系,采用顯微注射RNA的方法,利用雙電極電壓鉗技術檢測電流,對α6/α3β2β3nAChRs亞型進行體外重組表達研究,并對其表達條件進行優(yōu)化,獲得了α6/α3β2β3 nAChRs優(yōu)化的重組表達體系.煙堿型乙酰膽堿受體(nAChRs)是一類重要的配體門控離子通道,其亞型眾多且結構相似,但各亞型的生理學和藥理學功能截然不同.天然的α6β2^*nAChRs很難體外表達,體外表達模型的表達電流非常小.因此,本實驗擬研究優(yōu)化該亞型的表達,進行優(yōu)化后的體外表達模型,產生的激發(fā)電流顯著提高,為以該亞型為靶點的新藥篩選提供實驗模型和基礎.

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【文章目錄】：
1 材料與方法
    1.1 實驗材料、試劑與儀器
    1.2 受體亞基質粒的提取和酶切
    1.3 cRNA的制備
    1.4 非洲爪蟾卵母細胞的獲取
    1.5 顯微注射
    1.6 電生理實驗數(shù)據采集
    1.7 條件優(yōu)化設置
2 結果與分析
    2.1 n ACh R亞基質粒的制備和酶切
    2.2 cRNA的制備和檢測
    2.3 非洲爪蟾卵母細胞的篩選
    2.4 α6/α3β2β3 n ACh Rs亞型表達檢測
3 討論
4 結論



本文編號：3798833