本文關(guān)鍵詞：新型天蠶素A-馬蓋寧雜合肽破損耐甲氧西林金黃色葡萄球菌細(xì)胞膜的機(jī)制研究，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的研究新型天蠶素A-馬蓋寧雜合肽破損臨床分離的耐甲氧西林金黃色葡萄球菌(MRSA)的機(jī)制,為臨床應(yīng)用天蠶素A-馬蓋寧雜合肽對(duì)抗MRSA的感染奠定基礎(chǔ)。方法1采用微量肉湯稀釋法測(cè)定天蠶素A-馬蓋寧雜合肽對(duì)MRSA的最小抑菌濃度(MIC);2通過(guò)電位測(cè)定儀測(cè)定天蠶素A-馬蓋寧雜合肽作用于MRSA后細(xì)菌細(xì)胞膜表面電位的變化;通過(guò)十六烷吸附試驗(yàn)計(jì)算細(xì)菌吸附率來(lái)判斷雜合肽對(duì)細(xì)菌細(xì)胞膜表面疏水性的影響;3采用薄膜水化法制備磷脂模擬細(xì)菌細(xì)胞膜后與天蠶素A-馬蓋寧雜合肽作用;通過(guò)熒光/化學(xué)發(fā)光分析儀檢測(cè)天蠶素A-馬蓋寧雜合肽作用后脂質(zhì)體內(nèi)熒光素的泄露率;通過(guò)加入空白脂質(zhì)體前后異硫氰酸熒光素(FITC)標(biāo)記肽的熒光光譜的變化來(lái)觀察FITC-肽是否能夠使脂質(zhì)體破裂;使用熒光/化學(xué)發(fā)光分析儀檢測(cè)FITC-肽與熒光淬滅劑丙烯酰胺溶液相互作用后熒光強(qiáng)度的變化來(lái)判斷脂質(zhì)體是否能保護(hù)雜合肽免受熒光淬滅劑的淬滅;4通過(guò)聯(lián)合藥敏實(shí)驗(yàn)觀察天蠶素A-馬蓋寧雜合肽對(duì)細(xì)菌細(xì)胞外膜滲透性的影響;5通過(guò)β-半乳糖苷酶實(shí)驗(yàn)觀察天蠶素A-馬蓋寧雜合肽對(duì)細(xì)胞質(zhì)膜滲透性的影響;6采用原子吸收光譜儀檢測(cè)天蠶素A-馬蓋寧雜合肽對(duì)細(xì)菌細(xì)胞外K+的濃度的影響;7通過(guò)透射電子顯微鏡觀察天蠶素A-馬蓋寧雜合肽作用于MRSA后細(xì)菌細(xì)胞膜的變化;8流式細(xì)胞儀分析天蠶素A-馬蓋寧雜合肽作用于MRSA后細(xì)菌細(xì)胞膜完整性的變化。.結(jié)果1天蠶素A-馬蓋寧肽對(duì)MRSA的最小抑菌濃度為64μg/m L;2天蠶素A-馬蓋寧雜合肽與帶負(fù)電的MRSA相互作用使其細(xì)胞表面電位由-0.95增加到-0.50;MRSA細(xì)胞表面吸附率由2.97%增加到9.22%;3天蠶素A-馬蓋寧雜合肽作用脂質(zhì)體后,隨著該雜合肽作用濃度的增強(qiáng),脂質(zhì)體熒光素的泄漏率增加;當(dāng)加入空白脂質(zhì)體后,FITC基團(tuán)最大熒光強(qiáng)度的波長(zhǎng)從550.4nm變?yōu)?36.2nm,同時(shí)熒光強(qiáng)度增強(qiáng);熒光淬滅劑作用于FITC-肽時(shí),加入空白脂質(zhì)體之后,FITC-肽的熒光強(qiáng)度降低被抑制;4天蠶素A-馬蓋寧雜合肽分別與利福平、紅霉素,米諾環(huán)素的分級(jí)抑制指數(shù)均0.5,表現(xiàn)為協(xié)同作用;5隨著天蠶素A-馬蓋寧雜合肽作用時(shí)間的延長(zhǎng),MRSA菌液的OD405吸光值升高;6天蠶素A-馬蓋寧雜合肽作用于MRSA后細(xì)胞外的K+濃度升高;7隨著天蠶素A-馬蓋寧雜合肽作用時(shí)間的延長(zhǎng)MRSA細(xì)胞膜破裂,MRSA細(xì)胞內(nèi)的物質(zhì)滲出到細(xì)胞外,甚至引起擬核消失;8天蠶素A-馬蓋寧雜合肽引起熒光染料碘化丙啶(PI)流入MRSA細(xì)胞內(nèi),PI著染陽(yáng)性細(xì)胞比率增高。結(jié)論通過(guò)實(shí)驗(yàn)研究得出新型天蠶素A-馬蓋寧雜合肽對(duì)MRSA細(xì)胞膜有一定的滲透作用,最終導(dǎo)致細(xì)胞膜的破損。
【關(guān)鍵詞】：天蠶素A-馬蓋寧雜合肽 耐甲氧西林金黃色葡萄球菌 表面特性 脂質(zhì)體 滲透性 透射電子顯微鏡 鉀離子 流式細(xì)胞儀 作用機(jī)制
【學(xué)位授予單位】：寧夏醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類(lèi)號(hào)】：R96
【目錄】：

• 摘要4-6
• Abstract6-9
• 中英文縮略詞表9-12
• 前言12-16
• 材料與方法16-28
• 實(shí)驗(yàn)結(jié)果28-35
• 討論35-41
• 結(jié)論41-42
• 參考文獻(xiàn)42-48
• 綜述48-56
• 綜述參考文獻(xiàn)53-56
• 致謝56-57
• 攻讀學(xué)位期間發(fā)表的學(xué)術(shù)論文目錄57-58
• 個(gè)人簡(jiǎn)歷58

【參考文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前4條

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中國(guó)碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前1條

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本文編號(hào)：378105