目的探討5-氟尿嘧啶(5-Fu)對宮頸癌細(xì)胞增殖、侵襲、遷移的影響及其作用機制。方法將宮頸癌細(xì)胞HeLa分為對照組、低、中、高劑量5-Fu組。對照組細(xì)胞不做任何處理;低、中、高劑量5-Fu組分別用5,10,20 mmol·L^-1的5-Fu處理24 h。將miR-NC、miR-23a-3p轉(zhuǎn)染至HeLa細(xì)胞6 h后用10 mmol·L^-1的5-Fu處理24 h,記為第1轉(zhuǎn)染組、第2轉(zhuǎn)染組;將anti-miR-NC、anti-miR-23a-3p轉(zhuǎn)染至HeLa,記為第3轉(zhuǎn)染組、第4轉(zhuǎn)染組。以噻唑藍(lán)(MTT)比色法檢測細(xì)胞增殖抑制率;以Transwell檢測細(xì)胞遷移和侵襲。結(jié)果對照組、低、中、高劑量5-Fu組、第1轉(zhuǎn)染組、第2轉(zhuǎn)染組、第3轉(zhuǎn)染組、第4轉(zhuǎn)染組細(xì)胞培養(yǎng)48 h后增殖抑制率分別為(0.31±0.03)%,(20.04±2.11)%,(48.82±4.93)%,(68.24±6.94)%,(49.51±4.96)%,(15.24±1.56)%,(0.28±0.03)%,(37.51±3.86)%,細(xì)胞遷移數(shù)分別為(155.00±15.70)...

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【文章目錄】：
材料與方法
    1 材料
    2 實驗方法
        2.1 轉(zhuǎn)染前分組與處置
        2.2 轉(zhuǎn)染后分組與處置
        2.3 以MTT法檢測細(xì)胞增殖抑制率
        2.4 以Transwell實驗檢測細(xì)胞遷移和侵襲
        2.5 以蛋白質(zhì)印跡(Western Blot)法檢測G1/S-特異性周期蛋白-D1(CyclinD1)、P21、上皮型鈣黏蛋白(E-cadherin)、基質(zhì)金屬蛋白酶2(MMP-2)、脾酪氨酸激酶(Syk)蛋白表達(dá)水平
        2.6 以實時熒光定量PCR(qRT-PCR)檢測miR-23a-3p和Syk表達(dá)水平
        2.7 熒光素酶報告實驗檢測miR-23a-3p和Syk的靶向關(guān)系
    3 統(tǒng)計學(xué)處理
結(jié) 果
    1 各組細(xì)胞HeLa增殖抑制情況
    2 各組細(xì)胞HeLa遷移、侵襲情況
    3 各組細(xì)胞HeLa增殖、遷移、侵襲相關(guān)蛋白情況
    4 各組細(xì)胞HeLa中miR-23a-3p表達(dá)情況
    5 miR-23a-3p靶向調(diào)控Syk
討 論



本文編號：3771060