本文關(guān)鍵詞：喹諾酮類(lèi)藥物誘導(dǎo)銅綠假單胞菌后對(duì)其生物膜形成能力影響的研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的:用喹諾酮類(lèi)藥物對(duì)PA進(jìn)行誘導(dǎo),測(cè)定環(huán)丙沙星、左氧氟沙星、莫西沙星和氧氟沙星四種喹諾酮類(lèi)藥物誘導(dǎo)后PA的MIC值變化;測(cè)定對(duì)PA進(jìn)行二次誘導(dǎo)八代后其毒力因子表達(dá)和生物膜形成能力的影響,從而解釋喹諾酮類(lèi)藥物對(duì)PA的PQS信號(hào)系統(tǒng)的影響。方法:篩選來(lái)自臨床的銅綠假單胞菌菌株18株,都經(jīng)過(guò)VITEK-2細(xì)菌鑒定儀重新鑒定;標(biāo)準(zhǔn)菌株P(guān)AO1株和QS系統(tǒng)雙缺陷標(biāo)準(zhǔn)菌株P(guān)AOJP1株,共20株。(1)誘導(dǎo)前MIC值的測(cè)定:采用瓊脂倍比稀釋法,多點(diǎn)接種儀測(cè)定菌株的MIC值,S、I、R判斷標(biāo)準(zhǔn)依據(jù)CLSI(2013版);(2)用PA對(duì)四種喹諾酮類(lèi)藥物環(huán)丙沙星、左氧氟沙星、莫西沙星和氧氟沙星的0.5倍MIC值一次誘導(dǎo)培養(yǎng)四代后,MIC值的測(cè)定:采用瓊脂倍比稀釋法,多點(diǎn)接種儀測(cè)定0.5倍MIC值一次誘導(dǎo)后菌株的MIC值,記錄其變化;(3)用上述四種喹諾酮類(lèi)藥物對(duì)PA進(jìn)行0.5倍MIC二次誘導(dǎo)培養(yǎng)四代后,MIC值的測(cè)定:同(2);(4)四種喹諾酮類(lèi)藥物對(duì)PA進(jìn)行二次誘導(dǎo)八代后其毒力因子的變化:包括彈性蛋白酶活性測(cè)定、綠膿菌素活性測(cè)定和鞭毛泳動(dòng)能力的測(cè)定;(5)四種喹諾酮類(lèi)藥物對(duì)PA進(jìn)行二次誘導(dǎo)八代后其生物膜形成能力的變化:利用平板法制備生物膜、染色法建立生物膜,結(jié)合酶標(biāo)儀測(cè)定570nm波長(zhǎng)處的A來(lái)定量分析PA生物膜形成能力;(6)統(tǒng)計(jì)學(xué)方法:用SPSS19.0軟件對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行分析,所有檢測(cè)結(jié)果的組間比較采用非參數(shù)檢驗(yàn)中的兩相關(guān)樣本的秩和檢驗(yàn)。結(jié)果:(1)誘導(dǎo)前菌株的MIC值結(jié)果:環(huán)丙沙星的敏感率最高,為77.78%;左氧氟沙星的敏感率次之,為66.67%;氧氟沙星的敏感率為61.11%;莫西沙星雖無(wú)判斷標(biāo)準(zhǔn),但是依據(jù)左氧氟沙星和氧氟沙星的折點(diǎn)標(biāo)準(zhǔn),計(jì)算出為38.89%。(2)0.5倍MIC值一次誘導(dǎo)培養(yǎng)四代后菌株的MIC值變化:與誘導(dǎo)前相比,環(huán)丙沙星誘導(dǎo)后原來(lái)敏感的12株細(xì)菌的MIC值均有不同程度的升高,其中2株菌變化的最明顯,MIC值升高了8倍;左氧氟沙星誘導(dǎo)后原來(lái)敏感的12株細(xì)菌的MIC值也均有不同程度的升高,其中1株菌的MIC值甚至升高了64倍;莫西沙星誘導(dǎo)后原來(lái)敏感的12株細(xì)菌的MIC值亦均有不同程度的升高,其中6株菌變化的最明顯,MIC值升高了8倍;氧氟沙星誘導(dǎo)后原來(lái)敏感的12株細(xì)菌的MIC值也均有不同程度的升高,其中6株菌的MIC值變化的最明顯,升高了8倍;原來(lái)對(duì)四種喹諾酮類(lèi)藥物非敏感的6株菌中有相同的1株經(jīng)過(guò)誘導(dǎo)后MIC值升高。(3)0.5倍MIC值二次誘導(dǎo)培養(yǎng)四代后菌株的MIC值變化:與0.5倍MIC一次誘導(dǎo)培養(yǎng)四代后的結(jié)果相比,經(jīng)過(guò)環(huán)丙沙星二次誘導(dǎo)后原來(lái)MIC值升高的菌株其MIC仍升高,而原來(lái)MIC未變的菌株中有3株二次誘導(dǎo)后MIC值升高;經(jīng)過(guò)左氧氟沙星二次誘導(dǎo)后除1株菌對(duì)左氧氟沙星的MIC值未變外,原來(lái)MIC值升高的菌株的MIC值仍升高;經(jīng)過(guò)氧氟沙星和莫西沙星二次誘導(dǎo)后原來(lái)MIC值升高的菌株其MIC仍升高,而原來(lái)MIC未變的菌株誘導(dǎo)后MIC值仍未變。(4)彈性蛋白酶活性測(cè)定:相較誘導(dǎo)前,環(huán)丙沙星誘導(dǎo)后,18株細(xì)菌中16株的OD值升高,其中1株升高的最明顯,由誘導(dǎo)前的2.00升高到了3.10;左氧氟沙星誘導(dǎo)后,18株細(xì)菌中13株的OD值升高,其中1株升高的最明顯,OD值由誘導(dǎo)前的1.60升高到了3.00;莫西沙星誘導(dǎo)后,18株細(xì)菌中15株的OD值升高,其中2株升高的最明顯,OD值升高了1.00個(gè)單位;氧氟沙星誘導(dǎo)后,18株細(xì)菌中14株的OD值升高,其中2株升高的最明顯,OD值升高了0.80個(gè)單位;綠膿菌素活性測(cè)定:相較誘導(dǎo)前,環(huán)丙沙星誘導(dǎo)后,18株細(xì)菌中15株的OD值升高,其中1株升高的最明顯,由誘導(dǎo)前的0.11升高到了0.21;左氧氟沙星誘導(dǎo)后,18株細(xì)菌中14株的OD值升高,其中1株升高的最明顯,由誘導(dǎo)前的0.11升高到了0.29;莫西沙星誘導(dǎo)后,18株細(xì)菌中14株的OD值升高,其中3株升高的最明顯,OD值升高了0.15個(gè)單位;氧氟沙星誘導(dǎo)后,18株細(xì)菌中14株的OD值升高,其中5株升高的最明顯,OD值升高了0.08個(gè)單位;鞭毛泳動(dòng)能力:相較誘導(dǎo)前,環(huán)丙沙星誘導(dǎo)后,18株細(xì)菌中17株的d值變大,其中1株升高的最明顯,直徑由誘導(dǎo)前的3.80cm升高到了5.70cm;左氧氟沙星誘導(dǎo)后,18株細(xì)菌中14株的d值變大,其中1株升高的最明顯,直徑由誘導(dǎo)前的3.80cm升高到了5.10cm;莫西沙星誘導(dǎo)后,18株細(xì)菌中15株的d值變大,其中3株升高的最明顯,直徑均變大了1.40cm;氧氟沙星誘導(dǎo)后,18株細(xì)菌中15株的d值變大,其中4株升高的最明顯,直徑均變大了1.00cm;前后比較均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。(5)生物膜形成能力測(cè)定:相較誘導(dǎo)前,環(huán)丙沙星誘導(dǎo)后,18株細(xì)菌中16株的A570升高,其中1株升高的最明顯,由誘導(dǎo)前的0.72升高到了1.82;左氧氟沙星誘導(dǎo)后,18株細(xì)菌中14株的A570升高,其中1株升高的最明顯,由誘導(dǎo)前的0.72升高到了2.43;莫西沙星誘導(dǎo)后,18株細(xì)菌中14株的A570升高,其中1株升高的最明顯,由誘導(dǎo)前的0.72升高到了1.82;氧氟沙星誘導(dǎo)后,18株細(xì)菌中13株的A570升高,其中1株升高的最明顯,由誘導(dǎo)前的0.72升高到了1.82;前后比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。結(jié)論:1、用低于MIC值濃度的喹諾酮類(lèi)藥物對(duì)PA分別進(jìn)行二次誘導(dǎo)各四代后,與誘導(dǎo)前相比:原先敏感菌株的MIC值均有了不同程度的升高,有的甚至發(fā)生耐藥;而原先非敏感的菌株,其MIC值卻幾乎無(wú)變化。這提示:臨床上使用喹諾酮類(lèi)藥物治療PA引起的感染時(shí),切勿反復(fù)重復(fù)使用,否則會(huì)誘發(fā)耐藥菌的產(chǎn)生。2、用喹諾酮類(lèi)藥物誘導(dǎo)后,PA的毒力因子表達(dá)能力和生物膜形成能力明顯增強(qiáng),從而推測(cè)喹諾酮類(lèi)藥物可能作為外加PQS信號(hào)分子參與了生物膜的形成。
【關(guān)鍵詞】：銅綠假單胞菌 PQS信號(hào)系統(tǒng) 喹諾酮類(lèi)藥物 誘導(dǎo)
【學(xué)位授予單位】：山西醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類(lèi)號(hào)】：R96
【目錄】：

• 中文摘要6-9
• 英文摘要9-13
• 常用縮寫(xiě)詞中英文對(duì)照表13-15
• 前言15-17
• 第一部分 測(cè)定喹諾酮類(lèi)藥物誘導(dǎo)菌株前、后MIC值的變化17-30
• 1 材料與方法17-20
• 1.1 材料17-18
• 1.2 方法18-20
• 2 結(jié)果20-27
• 2.1 銅綠假單胞菌對(duì)四種藥物的MIC20-22
• 2.2 一次 0.5 倍MIC誘導(dǎo)銅綠假單胞菌后MIC測(cè)定22-24
• 2.3 二次 0.5 倍MIC誘導(dǎo)銅綠假單胞菌后MIC測(cè)定24-27
• 3 討論27-29
• 3.1 PA對(duì)喹諾酮類(lèi)藥物的作用特點(diǎn)27-28
• 3.2 PA被誘導(dǎo)后的影響28-29
• 4 結(jié)論29-30
• 4.1 PA誘導(dǎo)前、后MIC變化29
• 4.2 臨床提示29-30
• 第二部分 測(cè)定誘導(dǎo)前、后菌株毒力因子及其生物膜形成能力的變化30-53
• 1 材料與方法30-34
• 1.1 材料30-31
• 1.2 方法31-34
• 2 結(jié)果34-50
• 2.1 彈性蛋白酶活性測(cè)定結(jié)果對(duì)比34-37
• 2.2 綠膿菌素活性測(cè)定結(jié)果對(duì)比37-41
• 2.3 鞭毛泳動(dòng)能力測(cè)定結(jié)果對(duì)比41-45
• 2.4 生物膜形成能力測(cè)定結(jié)果對(duì)比45-50
• 3 討論50-52
• 3.1 PA毒力因子作用50
• 3.2 PA生物膜作用50-52
• 4 結(jié)論52-53
• 4.1 PA誘導(dǎo)前、后毒力因子和生物膜作用52
• 4.2 研究拓展52-53
• 參考文獻(xiàn)53-55
• 綜述55-58
• 參考文獻(xiàn)57-58
• 致謝58-59
• 在學(xué)期間承擔(dān)/參與的科研課題與研究成果59-60
• 個(gè)人簡(jiǎn)歷60

【參考文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前1條

1 徐黔寧,王偉平,張仙森;銅綠假單胞菌感染分布及藥敏分析[J];中華醫(yī)院感染學(xué)雜志;2005年02期

中國(guó)碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前1條

1 王姝云;臨床分離銅綠假單胞菌株的臨床分布特征及Quorum Sensing系統(tǒng)編碼基因的研究[D];山西醫(yī)科大學(xué);2014年

  本文關(guān)鍵詞：喹諾酮類(lèi)藥物誘導(dǎo)銅綠假單胞菌后對(duì)其生物膜形成能力影響的研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

，

本文編號(hào)：372316