乳腺癌是嚴(yán)重威脅全球女性健康的常見(jiàn)惡性腫瘤之一。在美國(guó)女性癌癥中是除了皮膚癌之外的最普遍的癌癥,占接近三分之一。美國(guó)癌癥協(xié)會(huì)2018年最新數(shù)據(jù)表明,乳腺癌在預(yù)計(jì)新發(fā)人數(shù)上位居第一,預(yù)計(jì)死亡人數(shù)上排名第二（僅次于肺及支氣管癌）。目前,乳腺癌治療存在很多難點(diǎn),特別是一些患者在接受治療時(shí)發(fā)生耐藥及術(shù)后放化療后腫瘤復(fù)發(fā)、轉(zhuǎn)移。近些年來(lái),有研究表明,自噬在乳腺癌的發(fā)生發(fā)展以及治療過(guò)程中發(fā)揮著重要的作用。如何改善乳腺癌的治療效果已成為研究熱點(diǎn)。自噬是一種廣泛存在于真核生物的細(xì)胞中高度保守的一種依賴溶酶體的降解途徑,是通過(guò)清除自身衰老、受損的細(xì)胞器,或通過(guò)降解蛋白質(zhì)、脂類等生物大分子供細(xì)胞再次利用,以維持細(xì)胞內(nèi)環(huán)境穩(wěn)態(tài)。自噬常作為一種細(xì)胞在特殊情況下的保護(hù)自我的一種機(jī)制,例如在機(jī)體出現(xiàn)損傷、缺氧、應(yīng)激等病理生理情況后一種調(diào)控細(xì)胞代謝活動(dòng)的過(guò)程,可被認(rèn)為是與化療失敗的重要耐藥機(jī)制之一。本課題選用廣譜抗癌藥多西他賽（DTX）和自噬抑制ATG7siRNA（siATG7）,通過(guò)硫辛酸修飾的固有無(wú)序多肽形成的多肽膠束加以介導(dǎo),并載入化療藥多西他賽,從體內(nèi)和體外對(duì)其抗乳腺癌的作用機(jī)制進(jìn)行研究。本課題分為三個(gè)部分... 

【文章頁(yè)數(shù)】：82 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
ABSTRACT
縮略詞表
前言
第一章 共載多西他賽和 siATG7的硫辛酸多肽膠束構(gòu)建及表征
    1 儀器和材料
        1.1 儀器
        1.2 試劑和材料
    2 實(shí)驗(yàn)方法
        2.1 多肽載體合成
        2.2 硫辛酸修飾的多肽載體的表征
        2.3 臨界膠束濃度考察
        2.4 共載多西他賽和siATG7硫辛酸多肽膠束構(gòu)建
    3 結(jié)果
        3.1 LA-CL的純度鑒定結(jié)果
        3.2 多肽LA-CLss聚合物的1H-NMR鑒定結(jié)果
        3.3 臨界膠束濃度考察結(jié)果
        3.4 共載多西他賽和siATG7硫辛酸多肽膠束粒徑和電位
        3.5 載藥量和包封率
        3.6 瓊脂糖凝膠電泳考察結(jié)果
        3.7 多西他賽體外釋放
    4 討論
    5 小結(jié)
第二章 共載多西他賽和siATG7的硫辛酸多肽膠束抗乳腺癌作用體外評(píng)價(jià)
    1 儀器和材料
        1.1 儀器
        1.2 試劑和材料
    2 實(shí)驗(yàn)方法
        2.1 實(shí)驗(yàn)細(xì)胞培養(yǎng)
        2.2 不同乳腺癌細(xì)胞系中體外抗增殖作用考察
        2.3 不同乳腺癌細(xì)胞系中促凋亡作用考察
        2.4 細(xì)胞攝取考察
        2.5 胞內(nèi)分布考察
        2.6 周期阻滯考察
        2.7 流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)細(xì)胞自噬
        2.8 激光共聚焦實(shí)驗(yàn)觀察自噬流
        2.9 透射電鏡觀察自噬泡
        2.10 實(shí)時(shí)熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)
        2.11 Westernblot實(shí)驗(yàn)
        2.12 數(shù)據(jù)處理和統(tǒng)計(jì)方法
    3 結(jié)果
        3.1 不同乳腺癌細(xì)胞系中體外抗增殖作用考察結(jié)果
        3.2 不同乳腺癌細(xì)胞系中促凋亡作用考察結(jié)果
        3.3 細(xì)胞攝取考察結(jié)果
        3.4 胞內(nèi)分布考察結(jié)果
        3.5 周期阻滯考察結(jié)果
        3.6 流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)細(xì)胞自噬結(jié)果
        3.7 激光共聚焦實(shí)驗(yàn)觀察自噬流結(jié)果
        3.8 透射電鏡觀察自噬泡結(jié)果
        3.9 實(shí)時(shí)熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)結(jié)果
        3.10 Westernblot實(shí)驗(yàn)結(jié)果
    4 討論
    5 小結(jié)
第三章 共載多西他賽和siATG7的多肽膠束抗乳腺癌作用體內(nèi)評(píng)價(jià)
    1 儀器和材料
        1.1 儀器
        1.2 試劑和材料
        1.3 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物
    2 實(shí)驗(yàn)方法
        2.1 細(xì)胞培養(yǎng)
        2.2 人乳腺癌細(xì)胞皮下裸鼠移植瘤模型的構(gòu)建
        2.3 共載多西他賽和siATG7多肽膠束的體內(nèi)分布情況
        2.4 共載多西他賽和siATG7多肽膠束體內(nèi)藥效考察
        2.5 數(shù)據(jù)處理和統(tǒng)計(jì)方法
    3 結(jié)果
        3.1 裸鼠移植瘤造模結(jié)果
        3.2 多肽膠束體內(nèi)分布實(shí)驗(yàn)考察結(jié)果
        3.3 腫瘤生長(zhǎng)抑制及生存期考察結(jié)果
        3.4 組織學(xué)及免疫組化考察結(jié)果
    4 討論
    5 小結(jié)
全文總結(jié)
參考文獻(xiàn)
特色與創(chuàng)新之處
綜述
    1 引言
    2 CPPS分類
    3 CPPS穿膜機(jī)制
    4 CPPS在靶向治療腫瘤中的應(yīng)用
    5 結(jié)語(yǔ)與展望
    參考文獻(xiàn)
科研工作簡(jiǎn)介
致謝



本文編號(hào)：3681498