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發(fā)布時(shí)間:2022-07-03 19:46
  目的 用Streptomyces lividans GX28異源合成N-乙;,并研究N-乙;返目钩喑痹寤钚。方法 前期研究發(fā)現(xiàn)Bacillus atrophaeus C89芳香族氨基酸脫羧酶(aromatic l-amino acid decarboxylase,AADC)能將L-色氨酸脫羧成L-色胺。氨基酸多序列比對(duì)發(fā)現(xiàn)S.lividans GX28基因組中存在使色胺乙;拿。通過克隆、重組將aadc基因轉(zhuǎn)入S.lividans GX28中構(gòu)建重組菌株,HPLC檢測(cè)目標(biāo)產(chǎn)物,NMR鑒定化合物的結(jié)構(gòu)。檢測(cè)化合物對(duì)3種赤潮微藻的毒性。結(jié)果 S.lividans GX28中的蛋白WP015609847.1含有芳烷基胺N-乙酰轉(zhuǎn)移酶(alkyl amine N-acetyltransferase,AANAT)的底物結(jié)合位點(diǎn)(P64和F188)和催化位點(diǎn)(Y168),推測(cè)其為AANAT。宿主的發(fā)酵產(chǎn)物中分離得到N-乙;。N-乙;穼(duì)墨西哥原甲藻的生長(zhǎng)具有較強(qiáng)的抑制作... 

【文章頁數(shù)】:8 頁

【文章目錄】:
1 材料與方法
    1.1 材料
        1.1.1 主要試劑與儀器
        1.1.2 菌株、質(zhì)粒、引物和藻株
        1.1.3 主要培養(yǎng)基
    1.2 方法
        1.2.1 氨基酸多序列比對(duì)推測(cè)S. lividans GX28中AANAT類乙酰轉(zhuǎn)移酶
        1.2.2 aadc基因的克隆和重組表達(dá)載體pJNA2554的構(gòu)建
        1.2.3 重組質(zhì)粒pJNA2554電轉(zhuǎn)化E. coli ET12567
        1.2.4 重組質(zhì)粒pJNA2554轉(zhuǎn)移至S. lividans GX28
        1.2.5 重組菌S. lividans SJNA18發(fā)酵產(chǎn)物分析與結(jié)構(gòu)鑒定
        1.2.6 赤潮微藻的生物測(cè)定方法
2 結(jié)果與分析
    2.1 氨基酸多序列比對(duì)推測(cè)結(jié)果
    2.2 重組菌S. lividans SJNA18發(fā)酵產(chǎn)物的分析、提取與結(jié)構(gòu)鑒定
    2.3 N-乙;穼(duì)3種赤潮微藻生長(zhǎng)的影響
3 討論與結(jié)論



本文編號(hào):3655532

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