替普瑞酮對百草枯誘導的SH-SY5Y細胞TDP43蛋白異常聚集抑制作用的研究
發(fā)布時間:2022-02-19 09:17
目的探討替普瑞酮(GGA)對百草枯(PQ)誘導的SH-SY5Y氧化應激模型細胞中TAR DNA/RNA結(jié)合蛋白43(TDP43)蛋白異常聚集的影響及其相關(guān)機制。方法將SH-SY5Y細胞分為無任何處理組(A組),以100μmol/L的GGA處理SH-SY5Y細胞24 h組(B組),分別以0、20、50、100μmol/L的GGA處理氧化應激模型細胞24 h組(C~F組)。分別用MTT比色法、流式細胞儀與免疫印跡法(Western blot)檢測各組SH-SY5Y細胞的存活率、凋亡率、TDP43蛋白表達水平、P62蛋白表達水平及LC3BⅡ/Ⅰ比值。為觀察GGA對TDP43蛋白表達水平影響是否通過自噬發(fā)揮作用,將SH-SY5Y細胞分為無任何處理組(A組),分別以0、50、50μmol/L的GGA處理氧化應激模型細胞24 h組(G~I組),其中I組用5 mmol/L的3-MA阻斷自噬,利用Western blot檢測各組SH-SY5Y細胞TDP43蛋白表達水平和LC3BⅡ/Ⅰ比值。結(jié)果 A~F組SH-SY5Y細胞的存活率、凋亡率、TDP43蛋白表達水平、P62蛋白表達水平及LC3BⅡ/Ⅰ比值比...
【文章來源】:精準醫(yī)學雜志. 2020,35(03)
【文章頁數(shù)】:5 頁
【文章目錄】:
1 材料與方法
1.1 材料
1.2 細胞模型的制備及細胞免疫熒光化學染色檢測細胞內(nèi)TDP43
1.3 MTT比色法檢測SH-SY5Y細胞存活率
1.4 流式細胞儀檢測SH-SY5Y細胞凋亡情況
1.5 免疫印跡法(Western blot)檢測細胞中P62、TDP43蛋白表達水平及LC3BⅡ/Ⅰ比值
1.6 Western blot檢測3-MA阻斷自噬后細胞中TDP43蛋白表達水平
1.7 統(tǒng)計學分析
2 結(jié) 果
2.1 細胞免疫熒光化學染色檢測細胞模型內(nèi)TDP43表達情況
2.2 各組SH-SY5Y細胞存活率和凋亡率比較
2.3 各組SH-SY5Y細胞中TDP43、P62蛋白表達水平及LC3BⅡ/Ⅰ比值比較
2.4 3-MA阻斷自噬后各組細胞中TDP43 蛋白與LC3BⅡ/Ⅰ比值情況
3 討 論
本文編號:3632637
【文章來源】:精準醫(yī)學雜志. 2020,35(03)
【文章頁數(shù)】:5 頁
【文章目錄】:
1 材料與方法
1.1 材料
1.2 細胞模型的制備及細胞免疫熒光化學染色檢測細胞內(nèi)TDP43
1.3 MTT比色法檢測SH-SY5Y細胞存活率
1.4 流式細胞儀檢測SH-SY5Y細胞凋亡情況
1.5 免疫印跡法(Western blot)檢測細胞中P62、TDP43蛋白表達水平及LC3BⅡ/Ⅰ比值
1.6 Western blot檢測3-MA阻斷自噬后細胞中TDP43蛋白表達水平
1.7 統(tǒng)計學分析
2 結(jié) 果
2.1 細胞免疫熒光化學染色檢測細胞模型內(nèi)TDP43表達情況
2.2 各組SH-SY5Y細胞存活率和凋亡率比較
2.3 各組SH-SY5Y細胞中TDP43、P62蛋白表達水平及LC3BⅡ/Ⅰ比值比較
2.4 3-MA阻斷自噬后各組細胞中TDP43 蛋白與LC3BⅡ/Ⅰ比值情況
3 討 論
本文編號:3632637
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