目的:研究黃腐醇體外緩解過(guò)氧化氫（H₂O₂）誘導(dǎo)SH-SY5Y細(xì)胞死亡的抗氧化損傷機(jī)制。方法:體外培養(yǎng)SH-SY5Y細(xì)胞,采用MTT法分別研究不同濃度的黃腐醇對(duì)SH-SY5Y細(xì)胞的毒性作用和對(duì)H₂O₂誘導(dǎo)細(xì)胞損傷的保護(hù)作用;采用流式細(xì)胞儀和顯微成像實(shí)驗(yàn)檢測(cè)黃腐醇對(duì)細(xì)胞內(nèi)活性氧（ROS）水平的影響;采用免疫熒光實(shí)驗(yàn)檢測(cè)黃腐醇對(duì)核因子E2相關(guān)因子2（Nrf2）核轉(zhuǎn)位的影響及用Western Blot分析黃腐醇對(duì)抗氧化蛋白血紅素加氧酶-1（HO-1）和谷氨酸半胱氨酸連接酶催化亞基（GCLC）的影響。結(jié)果:黃腐醇濃度≤0.5μmol·L-1時(shí)對(duì)SH-SY5Y細(xì)胞無(wú)毒性作用,黃腐醇對(duì)H₂O₂誘導(dǎo)的細(xì)胞損傷具有濃度依賴(lài)性保護(hù)作用（P<0.05或P<0.01）;同時(shí)黃腐醇能降低H₂O₂誘導(dǎo)的細(xì)胞內(nèi)ROS水平和促進(jìn)Nrf2核轉(zhuǎn)位（P<0.05）及濃度依賴(lài)性地提高HO-1和GCLC蛋白的表達(dá)（P<0.05或... 

【文章來(lái)源】：中國(guó)藥師. 2020,23(07)

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【部分圖文】：

不同濃度的黃腐醇對(duì)SH-SY5Y細(xì)胞的毒性作用(n=3)

與對(duì)照組相比，用H2O2處理的SH-SY5Y細(xì)胞僅顯示約65%的細(xì)胞生成率。但細(xì)胞用不同濃度(0.1,0.25,0.5μmol·L-1)黃腐醇預(yù)處理24 h，然后用H2O2損傷后，發(fā)現(xiàn)黃腐醇呈濃度依賴(lài)性保護(hù)細(xì)胞(P<0.05或P<0.01)。結(jié)果見(jiàn)圖2。2.3 黃腐醇對(duì)H2O2誘導(dǎo)SH-SY5Y細(xì)胞內(nèi)ROS水平的影響

流式細(xì)胞實(shí)驗(yàn)表明，用H2O2刺激細(xì)胞導(dǎo)致細(xì)胞內(nèi)ROS大量產(chǎn)生，而使用不同濃度(0.25,0.5μmol·L-1)黃腐醇處理后能夠有效降低細(xì)胞內(nèi)的ROS水平。同時(shí)，倒置熒光顯微鏡的結(jié)果也表明，當(dāng)使用H2O2作用細(xì)胞后細(xì)胞內(nèi)出現(xiàn)明顯的亮綠色熒光;但當(dāng)使用黃腐醇后，細(xì)胞內(nèi)的亮綠色熒光變淡，說(shuō)明黃腐醇能夠降低ROS水平。結(jié)果見(jiàn)圖3。2.4 黃腐醇對(duì)SH-SY5Y細(xì)胞內(nèi)Nrf2核轉(zhuǎn)位的影響

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]Design, synthesis and biological evaluation of chalcone analogues with novel dual antioxidant mechanisms as potential anti-ischemic stroke agents[J]. Jiabing Wang,Lili Huang,Chanchan Cheng,Ge Li,Jingwen Xie,Mengya Shen,Qian Chen,Wulan Li,Wenfei He,Peihong Qiu,Jianzhang Wu.  Acta Pharmaceutica Sinica B. 2019(02)



本文編號(hào)：3496333