本文關鍵詞：PEG化FGFR3靶向免疫脂質體的制備及表征，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：成纖維細胞生長因子受體3(fibroblast growth factor receptor 3,FGFR3)是FGFR家族的一員,在細胞的增殖分化中起到重要的調節(jié)作用,與許多腫瘤的發(fā)生存在著密切的關系,已成為腫瘤治療的一個潛在靶點。本課題中,我們設計了一種靶向FGFR3且?guī)в邪腚装彼釟埢膯捂溈贵w(single chain fragment variable,Sc Fv),并使其與脂質體制備原料偶聯(lián),制備成為免疫脂質體,從而達到藥物對腫瘤的靶向遞送。我們通過PCR擴增目的基因,通過分子生物學手段構建p ET-20b-Sc Fv-Cys重組質粒,并在大腸桿菌內完成可溶性表達。經鎳親和層析柱純化,得到純度95%的目的蛋白,產量可達每升菌液10mg以上。然后在氮氣保護的條件下完成Sc Fv-Cys與脂質體制備原料mal PEG2000-DSPE的偶聯(lián),獲得Sc Fv-PEG2000-DSPE。采用旋轉蒸發(fā)成膜和超聲的方法制備脂質體和免疫脂質體,經濾膜過濾篩選后,利用激光粒度分析儀和電子顯微鏡檢測,顯示脂質體有較好的粒徑和形態(tài)。最后,通過熒光脂質體轉染實驗,顯示免疫脂質體對FGFR3高表達的膀胱癌細胞RT112有較明顯的靶向效果,而陰性對照T24細胞沒有明顯的靶向效果,證明免疫脂質體的制備成功。綜上所述,我們成功制備了一種PEG化的靶向FGFR3的免疫脂質體,并對其表征,證明了它的靶向效果。作為一個新型的藥物靶向遞送系統(tǒng),其在腫瘤治療和藥物的開發(fā)方面具有良好的應用前景。
【關鍵詞】：成纖維細胞生長因子受體3(FGFR3) 單鏈抗體 免疫脂質體 藥物靶向遞送系統(tǒng)
【學位授予單位】：吉林大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2016
【分類號】：R943
【目錄】：

• 中文摘要4-5
• Abstract5-6
• 英文縮略詞6-9
• 第1章 緒論9-13
• 1 成纖維細胞生長因子及成纖維細胞生長因子受體9
• 2 單鏈抗體及其表達系統(tǒng)9-10
• 3 腫瘤靶向系統(tǒng)的藥物選擇10-11
• 4 脂質體和免疫脂質體11
• 5 課題設計思路11-13
• 第2章 材料與方法13-29
• 1 實驗材料13-17
• 1.1 主要生化和分子生物學試劑13-14
• 1.2 器材和主要儀器14-16
• 1.3 細胞16
• 1.4 質粒及載體16
• 1.5 實驗室常用溶液16-17
• 2 實驗方法17-29
• 2.1 pET-20b-ScFv-Cys表達載體的建立17-22
• 2.2 單鏈抗體ScFv-Cys的誘導表達22-23
• 2.3 單鏈抗體ScFv-Cys蛋白的純化及鑒定23-25
• 2.4 脂質體及免疫脂質體的制備及表征25-27
• 2.5 脂質體及免疫脂質體的靶向效果研究27-29
• 第3章 實驗結果29-38
• 1 pET-20b-ScFv-Cys表達載體的建立29-30
• 2 單鏈抗體ScFv-Cys的表達30-32
• 3 單鏈抗體ScFv-Cys的純化及鑒定32-33
• 4 脂質體及免疫脂質體的制備和表征33-36
• 5 脂質體及免疫脂質體靶向效果研究36-38
• 第4章 討論38-42
• 參考文獻42-45
• 作者簡介及在校期間科研成果45-46
• 致謝46-47
• 附錄47-48

【參考文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前4條

1 秦海艷;毛曉燕;喬玉玲;李曉進;趙紅;;單鏈抗體的研究進展[J];現(xiàn)代生物醫(yī)學進展;2011年04期

2 楊彤;;新型脂質體的研究進展[J];醫(yī)藥導報;2009年03期

3 韓薩茹拉;高愛琴;李金泉;張燕軍;梅步俊;;成纖維細胞生長因子(FGF)研究進展[J];安徽農業(yè)科學;2009年07期

4 蘇楠;陳林;;FGFR3在骨骼發(fā)育和疾病中作用的研究進展[J];國際遺傳學雜志;2006年03期

  本文關鍵詞：PEG化FGFR3靶向免疫脂質體的制備及表征，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

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本文編號：348997