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鹽酸右美托咪定對脂多糖誘導Kupffer細胞核苷酸結合寡聚化結構域樣受體蛋白3炎癥小體通路的研究

發(fā)布時間:2021-10-30 05:36
  目的探討鹽酸右美托咪定對脂多糖(LPS)誘導Kupffer細胞(KCs)核苷酸結合寡聚化結構域樣受體蛋白3(NLRP3)炎癥小體通路的影響。方法用500 ng·mL-1 LPS處理KCs 24 h,構建炎性因子釋放模型細胞。將模型細胞隨機分為模型組和低、中、高劑量實驗組,另取正常KCs作為空白組?瞻捉M和模型組均不給予藥物處理,正常培養(yǎng)7 h;低、中、高劑量實驗組分別給予50,200和500 ng·mL-1鹽酸右美托咪定處理1 h,繼續(xù)孵育6 h。用噻唑藍法檢測各組細胞的存活率,用Western Blotting法檢測各組細胞炎癥小體相關蛋白的表達水平。結果干預后,低、高劑量實驗組和模型組、空白組的細胞存活率分別為(60.11±4.69)%,(85.02±5.04)%,(51.24±4.22)%和(100.00±5.24)%,NLRP3蛋白相對表達水平分別為2.49±0.28,1.21±0.21,3.37±0.30和1.02±0.22,半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-1相對表達水平分別為2.68±0.26,1.17±0.22,3.54±0.34和1.... 

【文章來源】:中國臨床藥理學雜志. 2020,36(22)北大核心CSCD

【文章頁數(shù)】:4 頁

【文章目錄】:
材料與方法
    1 材料
    2 實驗方法
        2.1 細胞培養(yǎng)
        2.2 模型構建[4]
        2.3 細胞分組與給藥方法
        2.4 主要觀察指標
            2.4.1 用噻唑藍(MTT)法檢測各組細胞的存活率[5]
            2.4.2 用Western Blotting法檢測各組細胞炎癥小體相關蛋白的表達水平[4]
        2.5 亞組觀察指標
            2.5.1 用酶聯(lián)免疫吸附實驗(ELISA)法檢測各組細胞上清液中腫瘤壞死因子-α(TNF-α)、IL-6和IL-1β水平[6]
            2.5.2 用逆轉錄聚合酶鏈反應(RT-PCR)法檢測炎癥小體相關分子mRNA的表達水平
    3 統(tǒng)計學處理
結 果
    1 5組細胞存活率的比較
    2 5組細胞炎癥小體相關蛋白表達水平的比較
    3 5組細胞上清液中TNF-α、IL-6和IL-1β釋放量的比較
    4 5組細胞中炎癥小體相關分子mRNA表達水平的影響
討 論



本文編號:3466157

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