發(fā)布時(shí)間：2021-07-17 08:43

　　研究目的:海馬神經(jīng)發(fā)生與學(xué)習(xí)和記憶密切相關(guān),并且海馬神經(jīng)發(fā)生失調(diào)參與許多神經(jīng)退行性疾病的發(fā)生發(fā)展。鹽皮質(zhì)激素受體（Mineralocorticoid receptor,MR）在調(diào)節(jié)應(yīng)激反應(yīng),神經(jīng)內(nèi)分泌和認(rèn)知功能中起著至關(guān)重要的作用,并且參與調(diào)節(jié)神經(jīng)網(wǎng)絡(luò)的完整性和穩(wěn)定性。然而,尚不清楚MR在術(shù)后認(rèn)知功能障礙（Postoperative cognitive dysfunction,POCD）發(fā)病機(jī)理中的潛在作用。通過(guò)行為學(xué)、分子生物學(xué)等研究手段,對(duì)老年小鼠的術(shù)后認(rèn)知功能、神經(jīng)發(fā)生變化、海馬組織PI3K/AKT/GSK-3β信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路相關(guān)蛋白表達(dá)等方面進(jìn)行檢測(cè)和分析,探討MR活化對(duì)老年小鼠術(shù)后海馬神經(jīng)發(fā)生和認(rèn)知功能的作用及機(jī)制,為POCD的認(rèn)識(shí)和治療提供新的作用靶點(diǎn)和實(shí)驗(yàn)證據(jù)。方法:1.在本研究中,將老年小鼠隨機(jī)分為5組:對(duì)照組（C組）,手術(shù)組（S組）、手術(shù)+醛固酮組（S+ALDO組）、手術(shù)+渥曼青霉素組（S+WORT組）、手術(shù)+醛固酮+渥曼青霉素組（S+ALDO+WORT組）。術(shù)后即刻小鼠腹腔注射醛固酮（100ug/kg）和/或渥曼青霉素（1mg/kg）治療;于處死前一天小鼠腹腔注射Br... 

【文章來(lái)源】：南華大學(xué)湖南省

【文章頁(yè)數(shù)】：98 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

1各組老年小鼠不同時(shí)間點(diǎn)Morris水迷宮試驗(yàn)結(jié)果對(duì)照組(C組，n=6)、手術(shù)組(組,n=6)、手術(shù)+醛固酮組(S+ALDO組,n=6)小鼠水迷宮結(jié)果的比較

第3章實(shí)驗(yàn)結(jié)果19曠場(chǎng)試驗(yàn)結(jié)果顯示：與C組相比，S組在術(shù)后1、3、7天（P<0.01）和14天（P<0.05）站立次數(shù)減少（圖3.1.2A）；術(shù)后1、3、7天S組小鼠跨格次數(shù)少于C組（P<0.01）（圖3.1.2B）；術(shù)后14天兩組小鼠跨格次數(shù)結(jié)果差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）（圖3.1.2B）（表3.1.2）。表明手術(shù)應(yīng)激減少小鼠的活動(dòng)和探索行為。與S組相比，S+ALDO組術(shù)后3、7天站立次數(shù)增加（P<0.01），術(shù)后3天（P<0.01）、7天（P<0.05）跨格次數(shù)增加。術(shù)后1、14天兩組小鼠站立次數(shù)和跨格次數(shù)結(jié)果差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）（圖3.1.2A,B）（表3.1.2）。表明醛固酮處理可明顯增加手術(shù)小鼠的活動(dòng)和探索行為，并且在術(shù)后第3天和第7天作用最明顯。表3.1.2各組老年小鼠術(shù)后曠場(chǎng)試驗(yàn)結(jié)果注：**P<0.01,*P<0.05與對(duì)照組（C）比較；##P<0.01，#P<0.05與手術(shù)組（S）比較。圖3.1.2各組老年小鼠不同時(shí)間點(diǎn)曠場(chǎng)試驗(yàn)結(jié)果對(duì)照組(C組，n=6)、手術(shù)組(S組,n=6)、指標(biāo)術(shù)后1天術(shù)后3天術(shù)后7天術(shù)后14天站立次數(shù)C組S組S+ALDO組跨格次數(shù)C組S組S+ALDO組5.0±1.72.1±1.2**2.5±1.415.0±3.16.4±2.1**7.6±0.54.7±2.13.1±0.7**4.8±1.5##14.4±1.19.4±0.8**14.0±3.5##4.9±1.13.3±1.0**4.4±1.2##13.4±0.711.1±1.8**13.1±3.2#4.9±0.74.2±2.0*4.4±0.214.1±1.412.6±0.813.4±1.1

南華大學(xué)碩士學(xué)位論文22圖3.2(B)醛固酮對(duì)老年小鼠術(shù)后海馬神經(jīng)干細(xì)胞增殖的影響對(duì)照組(C組,n=6)、手術(shù)組(S組,n=6)、手術(shù)+醛固酮組(S+ALDO組,n=6)小鼠海馬齒狀回BrdU+/Nestin+數(shù)目的比較。**P<0.01與對(duì)照組比較;##P<0.01與手術(shù)組比較。3.3PI3K/AKT/GSK-3β信號(hào)通路在醛固酮調(diào)節(jié)老年小鼠術(shù)后海馬神經(jīng)干細(xì)胞增殖和認(rèn)知功能中的作用GSK-3β參與的多種細(xì)胞外和細(xì)胞內(nèi)信號(hào)傳導(dǎo)機(jī)制可調(diào)節(jié)神經(jīng)干細(xì)胞的增殖和分化。在神經(jīng)發(fā)育的早期，GSK-3β通過(guò)β-catenin，Notch，F(xiàn)GF和Wnt信號(hào)傳導(dǎo)來(lái)調(diào)節(jié)神經(jīng)祖細(xì)胞的自我更新[48,49]。GSK-3β是PI3K/AKT通路的下游底物,抑制PI3K/AKT通路,可以降低GSK-3β在Ser9位點(diǎn)的磷酸化,從而激活GSK-3β的活性[50]。渥曼青霉素作為PI3K的抑制劑,通過(guò)抑制PI3K和AKT的磷酸化間接地激活GSK-3β的活性。因此，為了探討醛固酮逆轉(zhuǎn)手術(shù)應(yīng)激對(duì)海馬神經(jīng)干細(xì)胞增殖和認(rèn)知功能影響的分子機(jī)制，我們檢測(cè)了PI3K/AKT/GSK-3β信號(hào)通路相關(guān)蛋白的表達(dá)情況。上述實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示醛固酮在術(shù)后第3天和第7天作用最明顯，因此，我們選擇在術(shù)后第3天用渥曼青霉素抑制PI3K，檢測(cè)術(shù)后第3天小鼠海馬神經(jīng)干細(xì)胞的增殖和認(rèn)知功能情況，以及P-AKT、P-GSK-3β、AKT、GSK-3β蛋白的表達(dá)情況。3.3.1醛固酮對(duì)PI3K/AKT/GSK-3β信號(hào)通路的影響

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]術(shù)后認(rèn)知功能障礙的研究進(jìn)展[J]. 都義日,米衛(wèi)東.  重慶醫(yī)學(xué). 2019(06)
[2]The role of general anesthetics and the mechanisms of hippocampal and extra-hippocampal dysfunctions in the genesis of postoperative cognitive dysfunction[J]. Marco Cascella,Sabrina Bimonte.  Neural Regeneration Research. 2017(11)
[3]Bumetanide promotes neural precursor cell regeneration and dendritic development in the hippocampal dentate gyrus in the chronic stage of cerebral ischemia[J]. Wang-shu Xu,Xuan Sun,Cheng-guang Song,Xiao-peng Mu,Wen-ping Ma,Xing-hu Zhang,Chuan-sheng Zhao.  Neural Regeneration Research. 2016(05)



本文編號(hào)：3287842