目的:通過研究冷凍干燥（凍干）前后人外周血單個核細胞（PBMCs）特性變化,分析凍干對PBMCs的影響。研究不同保存條件下凍干后樣品的性能變化,為研制可長期保存的細胞制品提供可能的解決方案。方法:從人全血中分離PBMCs,在等滲固定液中固定后,通過不同的工藝凍干,以流式細胞術檢測細胞大小、胞內顆粒多少、特異性抗原表達和平均熒光強度等特性。結果:凍干不改變細胞大小、胞內顆粒多少和CD3/CD4/CD8陽性細胞百分率。同一組細胞凍干前后CD3+細胞陽性率分別為76.23%±0.68%和76.84%±1.5%;CD4+細胞陽性率分別為41.22%±0.15%和40.41%±0.77%;CD8+細胞陽性率分別為29.05%±0.2%和28.70%±0.54%。在6個月的研究周期內,-20℃和2～8℃條件下保存的樣本,細胞大小、胞內顆粒多少和陽性細胞百分率未見改變。20～25℃和37℃保存的樣本,14 d內均未見以上特性改變。結論:凍干不改變細胞大小,胞內顆粒多少及其所表達的白細胞分化抗原數(shù)量等特性。并且凍干細胞在-20℃或者2～8℃條件下穩(wěn)定,可長期保存。 

【文章來源】：藥物分析雜志. 2020,40(09)北大核心CSCD

【文章頁數(shù)】：9 頁

【部分圖文】：

直接在凍干機中預凍樣品（A）和-80℃樣品（B）凍干曲線

凍干前（A）和凍干后（B) PBMC流式雙參數(shù)散點圖

凍干前后CD3,CD4和CD8細胞百分數(shù)對比圖（無顯著差異）

【參考文獻】：
期刊論文
[1]標本保存時間及溫度對流式細胞儀檢測非健康人外周血淋巴細胞亞群影響研究[J]. 方芳,陳柯霖,劉淑靜,周金,張國軍,康熙雄.  檢驗醫(yī)學與臨床. 2016(09)
[2]不同流式細胞分析儀檢測淋巴細胞亞群的比較研究[J]. 王維維,奚迪,袁向亮,沈立松.  中華檢驗醫(yī)學雜志. 2016 (05)
[3]標本前處理因素對流式細胞術檢測淋巴細胞亞群的影響[J]. 費奇力,王維維,袁向亮,張良.  診斷學理論與實踐. 2014(03)
[4]FSC/SSC和CD45/SSC分群法流式T淋巴細胞亞群分析的實驗研究[J]. 劉毓剛,劉霞,吳麗娟.  國際檢驗醫(yī)學雜志. 2012(02)
[5]流式細胞免疫分型在臨床的應用研究[J]. 周萍,唐吉斌.  國際檢驗醫(yī)學雜志. 2011(16)
[6]流式細胞術表型分析的質量控制[J]. 吳麗娟,許東升.  中華檢驗醫(yī)學雜志. 2011 (05)
[7]海藻糖和透明質酸對凍干雙歧桿菌細胞的保護作用[J]. 張玉華,孟一,凌沛學,籍保平.  食品科學. 2010(07)
[8]淋巴細胞免疫表型質控品的初步研究[J]. 吳瑜,張春濤,趙晨燕,劉春雨,王佑春.  臨床輸血與檢驗. 2008(03)
[9]流式細胞儀的原理和臨床應用[J]. 沈二霞.  現(xiàn)代醫(yī)學儀器與應用. 2008(01)
[10]紅細胞凍干保存中的滲透性損傷實驗研究[J]. 舒志全,羅昭鋒,郭曉婕,劉忠,何立群,高大勇.  北京生物醫(yī)學工程. 2006(06)

碩士論文
[1]T淋巴細胞亞群分析全血質控物的研制與評價[D]. 王力.中國協(xié)和醫(yī)科大學 2009



本文編號：3278263