目的:明確干細(xì)胞中煙堿型乙酰膽堿受體（nAChRs）亞基的表達(dá)以及尼古丁處理后受體改變的情況。方法:選擇胚胎、胚胎樣干細(xì)胞和成體干細(xì)胞作為探究對象。采用無飼養(yǎng)層細(xì)胞的方法培養(yǎng)人胚胎干細(xì)胞系H9和人誘導(dǎo)多能干細(xì)胞（IPSC）;成體干細(xì)胞選擇人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞（UCMSC）和人骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞（BMMSC）。4種細(xì)胞傳代培養(yǎng)后分成對照組和處理組,處理組培養(yǎng)基中加入尼古丁,分別提取總RNA和蛋白。采用RT-PCR、RT-qPCR和Western blot檢測nAChRs亞基的mRNA和蛋白表達(dá)水平,采用細(xì)胞免疫熒光染色檢測受體亞基的表達(dá)位置。結(jié)果:RT-PCR和Western blot結(jié)果顯示,H9細(xì)胞、IPSC和UCMSC中均檢測到nAChRs的α2、α3、α4、α7、α9和β1亞基,而BMMSC僅α4、α7、α9和β1表達(dá)明顯。尼古丁處理后,RT-qPCR結(jié)果顯示α2在H9細(xì)胞和UCMSC中顯著下調(diào),而在IPSC中發(fā)生上調(diào);β2在BMMSC和IPSC中顯著上調(diào),而在UCMSC中顯著下調(diào)。結(jié)論:胚胎干細(xì)胞和成體干細(xì)胞中表達(dá)的nAChRs亞基不同,且分化潛能越高,表達(dá)種類越多。尼古丁對nAC... 

【文章來源】：中國病理生理雜志. 2020,36(07)北大核心CSCD

【文章頁數(shù)】：7 頁

【部分圖文】：

各種干細(xì)胞的形態(tài)觀察

RT-PCR和瓊脂糖凝膠電泳檢測各種干細(xì)胞內(nèi)nAChRs亞基的mRNA表達(dá)

Western blot檢測各種干細(xì)胞內(nèi)nAChRs亞基的蛋白表達(dá)

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]尼古丁對人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞增殖和遷移的影響[J]. 曾慧蘭,卜欠欠,陳慧中,覃永亮,李陽,柏小芬,鐘啟,余泮熹,劉宏偉,劉革修,蘇澤軒.  中國病理生理雜志. 2013(05)



本文編號：3235210