研究背景:隨著分子生物學(xué)和結(jié)構(gòu)生物學(xué)的發(fā)展,作為受體的生物大分子的三維結(jié)構(gòu)被越來越多的發(fā)現(xiàn)和測(cè)定。根據(jù)已知生物大分子的結(jié)構(gòu)信息,利用計(jì)算化學(xué)和計(jì)算生物學(xué)方法篩選與其相互作用的小分子,即基于結(jié)構(gòu)的藥物設(shè)計(jì)方法（structure-based durg design,SBDD）。這個(gè)方法能夠大大降低新藥研發(fā)的成本和周期,因此越來越多的應(yīng)用在目前的藥物研發(fā)領(lǐng)域。腫瘤作為一種嚴(yán)重威脅人類健康的疾病,一直是科學(xué)家們致力于攻克的目標(biāo)。細(xì)胞周期蛋白依賴性激酶（cyclin dependent kinase,CDK）,是絲/蘇氨酸蛋白激酶家族中的一員,是參與細(xì)胞周期調(diào)控的關(guān)鍵酶。CDK2作為其中一個(gè)亞型,其與cyclinE和cyclin A結(jié)合后,能夠促進(jìn)細(xì)胞G1到S期的轉(zhuǎn)變,同時(shí)參與調(diào)控S期進(jìn)程。有研究發(fā)現(xiàn),超過80%的癌癥都會(huì)出現(xiàn)CDK2過表達(dá),如肝癌,乳腺癌等,因此發(fā)現(xiàn)靶向作用于CDK2的抑制劑有利于發(fā)現(xiàn)新型抗癌藥物;信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)與轉(zhuǎn)錄激活因子3（signal transducer and activator of transcription 3,STAT3）參與JAK-STAT3信號(hào)通路的作用,J... 

【文章來源】：大連醫(yī)科大學(xué)遼寧省

【文章頁數(shù)】：70 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
前言
第一部 CDK2 ATP競(jìng)爭(zhēng)性小分子抑制劑的篩選、改造和活性檢測(cè)
    材料和方法
        1. 材料
            1.1 菌種、載體和細(xì)胞系
            1.2 儀器和試劑
            1.3 主要反應(yīng)緩沖液
        2. 方法
            2.1 虛擬篩選
            2.2 CDK2-cyclinA2復(fù)合物表達(dá)純化
            2.3 體外酶活檢測(cè)體系建立
            2.4 競(jìng)爭(zhēng)性實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證
            2.5 HepG2細(xì)胞培養(yǎng)和CCK8實(shí)驗(yàn)
    結(jié)果
        1. 分子對(duì)接結(jié)果
        2. CDK2-cyclinA2復(fù)合物純化結(jié)果
        3. 小分子體外酶活檢測(cè)結(jié)果
        4. ATP競(jìng)爭(zhēng)性實(shí)驗(yàn)結(jié)果
        5. 細(xì)胞增殖抑制實(shí)驗(yàn)
    討論
    結(jié)論
第二部 STAT3小分子抑制劑的篩選和活性檢測(cè)
    材料和方法
        1. 材料
        2. 方法
            2.1 虛擬篩選
            2.2 STAT3蛋白表達(dá)純化
            2.3 STAT3突變體構(gòu)建
            2.4 熒光偏振實(shí)驗(yàn)
            2.5 CCK-8 實(shí)驗(yàn)
            2.6 Biacore實(shí)驗(yàn)
    結(jié)果
        1.分子對(duì)接結(jié)果
        2.STAT3純化結(jié)果
        3.FP實(shí)驗(yàn)結(jié)果
        4.小分子對(duì)癌細(xì)胞的增殖抑制
        5.B9在STAT3蛋白上的作用位點(diǎn)是SH2結(jié)構(gòu)域
    討論
    結(jié)論
參考文獻(xiàn)
綜述
    參考文獻(xiàn)
攻讀學(xué)位期間發(fā)表文章情況
致謝


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]熒光偏振技術(shù)在生命科學(xué)中的研究進(jìn)展[J]. 趙晨,張亮,倪原.  現(xiàn)代生物醫(yī)學(xué)進(jìn)展. 2010(16)
[2]STAT3信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路及腫瘤治療的方法[J]. 李慶偉,褚丹,王繼紅.  沈陽師范大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版). 2009(02)



本文編號(hào)：3215575