目的 病毒性流感是我國乃至WHO認(rèn)定的重大傳染病,疫苗不能有效預(yù)防其暴發(fā)與流行,抗流感藥物耐藥現(xiàn)象較為普遍,防治流感已成為亟待解決的醫(yī)學(xué)問題。本文研究白及菲類化合物的抗流感病毒藥效,并從干預(yù)病毒吸附、病毒復(fù)制、病毒釋放及調(diào)節(jié)宿主基因表達(dá)和細(xì)胞因子探討其作用機(jī)制,為白及用于流感的防治提供科學(xué)依據(jù)。方法1.通過建立流感病毒A/Sydney/5/97（H3N2）鼠肺適應(yīng)株感染小鼠模型試驗(yàn)考察白及醇提物抗流感病毒藥效。建立流感病毒感染BALB/c小鼠模型,設(shè)置陽性藥物達(dá)菲組（0.03g/kg）,計算肺指數(shù)及肺指數(shù)抑制率,RT-PCR檢測肺組織中的病毒載量,HE染色觀察肺組織的病理改變,評價白及醇提物在小鼠模型中抗流感病毒藥效。2.利用流感病毒感染雞胚模型及MDCK細(xì)胞模型研究白及菲類化合物的抗流感病毒藥效。將白及菲類化合物與等量的100EID₅₀病毒液37℃孵育1h,接種雞胚尿囊腔,34℃孵育48h后收集尿囊液測其血凝效價并計算抑制率,評價白及菲類化合物抗流感病毒藥效。MDCK細(xì)胞在細(xì)胞培養(yǎng)板中長成完全單層后,以三種不同的加藥方式,即在病毒感染的18h前用菲類化合物處理細(xì)... 

【文章來源】：浙江中醫(yī)藥大學(xué)浙江省

【文章頁數(shù)】：80 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
中文摘要
ABSTRACT
前言
第一部分 白及醇提物小鼠體內(nèi)抗流感病毒藥效研究
    一、材料與方法
        (一)實(shí)驗(yàn)材料
            1.藥品
            2.病毒株、雞胚
            3.實(shí)驗(yàn)動物
            4.實(shí)驗(yàn)試劑
            5.實(shí)驗(yàn)器材
            6.引物序列
        (二)實(shí)驗(yàn)方法
            1.鼠肺適應(yīng)株病毒的制備
            2.小鼠流感病毒半數(shù)致死劑量(MLD50)的測定
            3.白及醇提物對小鼠的毒性試驗(yàn)
            4.白及醇提物對流感病毒感染小鼠肺指數(shù)及肺指數(shù)抑制率影響
            5.白及醇提物對流感病毒感染小鼠肺組織病毒載量的變化
            6.白及醇提物對流感病毒感染小鼠肺組織病理切片觀察
    二、實(shí)驗(yàn)結(jié)果
        (一)鼠肺適應(yīng)株病毒的制備結(jié)果
        (二)小鼠流感病毒半數(shù)致死劑量(MLD50)的測定結(jié)果
        (三)白及醇提物對小鼠的毒性試驗(yàn)結(jié)果
        (四)白及醇提物對流感病毒感染小鼠肺指數(shù)及肺指數(shù)抑制率結(jié)果..
        (五)小鼠肺組織中病毒載量變化結(jié)果
        (六)小鼠肺組織病理切片觀察結(jié)果
    三、分析與討論
    四、小結(jié)
第二部分 白及菲類化合物抗流感病毒藥效研究
    一、材料與方法
        (一)實(shí)驗(yàn)材料
            1.白及菲類化合物
            2.病毒株、雞胚
            3.實(shí)驗(yàn)試劑
            4.實(shí)驗(yàn)儀器
        (二)實(shí)驗(yàn)方法
            1.白及菲類化合物在雞胚尿囊腔中抗流感病毒藥效測定
            2.白及菲類化合物在細(xì)胞模型中抗流感病毒藥效測定
    二、實(shí)驗(yàn)結(jié)果
        (一)白及菲類化合物在雞胚尿囊腔中抗流感病毒藥效測定結(jié)果
        (二)白及菲類化合物在細(xì)胞模型中抗流感病毒藥效研究結(jié)果
    三、分析與討論
    四、小結(jié)
第三部分 抗流感病毒機(jī)理研究
    一、材料與方法
        (一)實(shí)驗(yàn)材料
            1.實(shí)驗(yàn)藥品
            2.流感病毒株與實(shí)驗(yàn)細(xì)胞
            3.實(shí)驗(yàn)試劑
            4.引物序列
        (二)實(shí)驗(yàn)方法
            1.抗流感病毒吸附研究
            2.抗流感病毒復(fù)制的研究
            3.抗流感病毒釋放的研究
            4.對宿主細(xì)胞基因表達(dá)影響研究
            5.對細(xì)胞因子的影響研究
    二、實(shí)驗(yàn)結(jié)果
        (一)抗流感病毒吸附研究結(jié)果
        (二)抗流感病毒復(fù)制的研究結(jié)果
        (三)抗流感病毒釋放的研究結(jié)果
        (四)對宿主細(xì)胞基因表達(dá)研究結(jié)果
        (五)對細(xì)胞因子影響結(jié)果
    三、分析與討論
    四、小結(jié)
全文總結(jié)
參考文獻(xiàn)
文獻(xiàn)綜述
    參考文獻(xiàn)
致謝



本文編號：3169322