抗西尼羅病毒抗體類藥物的體外篩選
發(fā)布時(shí)間:2021-04-23 23:09
目的利用建立的西尼羅假病毒報(bào)告系統(tǒng),體外篩選獲得抗西尼羅病毒抗體。方法首先,利用酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)(ELISA)檢測(cè)由噬菌體展示技術(shù)篩選獲得的13株抗西尼羅病毒候選抗體與靶蛋白-西尼羅病毒E蛋白結(jié)構(gòu)域Ⅲ(DⅢ)的結(jié)合;其次,將收集的含有西尼羅假病毒的細(xì)胞培養(yǎng)上清稀釋102倍,分別與相應(yīng)濃度的候選抗體室溫孵育1 h后,將假病毒上清+抗體混合液感染BHK21或者K562細(xì)胞,48 h后,裂解細(xì)胞測(cè)熒光素酶活性(RLU)。結(jié)果 13株候選抗體均能識(shí)別并結(jié)合西尼羅病毒E蛋白DⅢ;其中2株抗體(抗體5和7)具有較好的中和活性,低濃度下(5 mg/L)即能有效阻斷病毒入侵靶細(xì)胞;而2株抗體(抗體3和8)具有抗體增強(qiáng)效應(yīng)(ADE),表現(xiàn)為靶細(xì)胞病毒感染增強(qiáng)。結(jié)論利用建立的西尼羅假病毒報(bào)告系統(tǒng),體外篩選獲得2株具有中和活性的抗西尼羅病毒抗體。
【文章來(lái)源】:國(guó)際藥學(xué)研究雜志. 2020,47(07)北大核心
【文章頁(yè)數(shù)】:5 頁(yè)
【文章目錄】:
1 材料與方法
1.1 材料與試劑
1.2 酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)(ELISA)檢測(cè)候選抗體與靶抗原WNV DⅢ的結(jié)合力
1.3 流式細(xì)胞儀檢測(cè)CD32(FcγRⅡ)表達(dá)
1.4 抗體中和實(shí)驗(yàn)檢測(cè)熒光素酶活性
1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析
2 結(jié)果
2.1 候選抗體與靶抗原WNV DⅢ的結(jié)合力
2.2 基于BHK21細(xì)胞的抗體中和實(shí)驗(yàn)
2.3 基于K562細(xì)胞的抗體中和實(shí)驗(yàn)
3 討論
本文編號(hào):3156219
【文章來(lái)源】:國(guó)際藥學(xué)研究雜志. 2020,47(07)北大核心
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1 材料與方法
1.1 材料與試劑
1.2 酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)(ELISA)檢測(cè)候選抗體與靶抗原WNV DⅢ的結(jié)合力
1.3 流式細(xì)胞儀檢測(cè)CD32(FcγRⅡ)表達(dá)
1.4 抗體中和實(shí)驗(yàn)檢測(cè)熒光素酶活性
1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析
2 結(jié)果
2.1 候選抗體與靶抗原WNV DⅢ的結(jié)合力
2.2 基于BHK21細(xì)胞的抗體中和實(shí)驗(yàn)
2.3 基于K562細(xì)胞的抗體中和實(shí)驗(yàn)
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