背景:糖尿病性骨質(zhì)疏松癥（Diabetic osteoporosis,DOP）是由糖尿病并發(fā)骨質(zhì)疏松導致的骨量減少,是糖尿病累及骨骼出現(xiàn)的嚴重并發(fā)癥,該病嚴重影響著糖尿病患者的生存質(zhì)量,二者之間的關系目前尚不明晰,如何能夠有效地控制及治療DOP已成為眾多醫(yī)務工作者和科研人員探討的焦點及研究的課題。二甲雙胍（Metformin,MF）是治療2型糖尿病患者的一線用藥,其在腫瘤、抗衰老、甲狀腺疾病、骨質(zhì)疏松癥等領域的研究應用越來越受到重視。絕經(jīng)期婦女雌激素缺乏會導致絕經(jīng)后骨質(zhì)疏松癥,雌激素通過抑制破骨細胞的分化、成熟,促進成骨細胞的增殖、分化,從而對骨形成發(fā)揮保護作用。近年來研究發(fā)現(xiàn)MF除了發(fā)揮降糖作用以外,還表現(xiàn)出明顯的成骨作用,MF的成骨作用涉及到多種細胞分子機制。一方面骨形態(tài)發(fā)生蛋白-2（Bone morphogenetic protein,BMP-2）和骨橋蛋白（Osteopontin,OPN）是成骨細胞分化、成熟的重要的因子,MF可通過激活磷酸腺苷酸活化蛋白激酶（Adenosine monophosphate-activated protein kinase,AMPK）代謝途徑,增... 

【文章來源】：蘭州大學甘肅省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：52 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

各組大鼠BMD以及骨礦含量（x±s）

二甲雙胍對去卵巢大鼠骨質(zhì)疏松癥和骨髓間充質(zhì)干細胞蘭州大學碩士學位論文骨向分化的影響及機制研究18傳代的大鼠BMSCs加入誘導的培養(yǎng)基，經(jīng)差速貼壁后呈小圓球形懸浮在培養(yǎng)液內(nèi)在2-3h內(nèi)開始貼壁(圖2A)，接種3天后細胞呈梭形、紡錘型、多邊形、三角形，并向外伸展出生長突，6-8天長滿單層，部分細胞借突起相互連接，高密度區(qū)細胞逐步向成骨細胞形態(tài)轉化(圖2B)；生長突相互連接融合成片(圖2C)，成骨細胞可呈多層重疊生長，并呈現(xiàn)鈣化趨勢，細胞基質(zhì)分泌增多并包裹細胞，10-12天后出現(xiàn)較多的散在的致密的團塊，并且逐漸增大，團塊周邊區(qū)域細胞密度程度高，而且細胞輪廓模糊，團塊中心區(qū)逐漸變暗，透光性差，形成明顯的結節(jié)(圖2D)。圖2傳代培養(yǎng)的大鼠BMSCs誘導分化為成骨細胞的形態(tài)（×100）A：細胞培養(yǎng)后1天的大鼠BMSCs；B：細胞接種后3天；C：細胞接種后5天；D：加入礦化誘導液后12天3.2.2大鼠BMSCs在誘導培養(yǎng)基中的生長曲線傳代大鼠BMSCs接種后1-3天內(nèi)細胞增殖緩慢，此后細胞的增殖活性隨著培養(yǎng)時間的增加而增加，第6天達到高峰，以后增長速度逐漸減慢，細胞數(shù)量開始下降(圖3)。ABCD

二甲雙胍對去卵巢大鼠骨質(zhì)疏松癥和骨髓間充質(zhì)干細胞蘭州大學碩士學位論文骨向分化的影響及機制研究19圖3大鼠BMSCs分化為成骨細胞的生長曲線（MTT法）3.2.3大鼠BMSCs誘導分化為成骨細胞后礦化結節(jié)的形成在礦化誘導液的培養(yǎng)下，大鼠BMSCs分化為成骨細胞，多層重疊生長逐漸形成大小不一的結節(jié)，隨著膠原沉積和基質(zhì)礦化，最后形成密度不均勻不透光的礦化結節(jié)（圖4A，B）。圖4大鼠BMSCs分化為成骨細胞的鑒定A：骨細胞鈣化中（誘導后14天）；B：骨細胞鈣化形成（誘導后28天）3.2.4各組大鼠BMSCs分化為成骨細胞后細胞增殖、ALP活性與鈣沉積量的變化為研究MF以及雌二醇是否會對去卵巢大鼠的BMSCs的細胞活性、ALP活性以及鈣化能力產(chǎn)生影響，培養(yǎng)各組大鼠的BMSCs并誘導其向成骨細胞分化(圖5)。與SHAM組比較，OVX組成骨細胞的增殖能力、ALP活性明顯被抑制,鈣沉積量明顯減少（P<0.05）；與OVX組比較，在給予MF和雌二醇干預后顯著增強了去卵巢大鼠成骨細胞的增殖能力以及ALP活性，鈣沉積量顯著增加(均AB


本文編號：3140796