背景和目的惡性腫瘤是目前嚴重威脅人類健康的重大疾病之一,盡管傳統(tǒng)的手術(shù),放、化療等治療手段在臨床中廣泛應(yīng)用,但仍然預(yù)后較差。免疫治療作為抗腫瘤治療領(lǐng)域的重大突破從而備受關(guān)注。其中嵌合抗原受體T細胞（Chimeric antigen receptors T cell,CAR-T）在體內(nèi)展現(xiàn)出強大的抗腫瘤作用,已被FDA批準用于急性淋巴細胞白血病的治療。然而由于腫瘤微環(huán)境的存在,使T細胞的功能受到抑制。其中一個主要因素是,腫瘤細胞表面程序性死亡蛋白配體-1（programmed death ligand 1,PD-L1）表達水平升高,與T細胞表面抑制型分子程序性死亡蛋白-1（programmed death-1,PD-1）相結(jié)合發(fā)揮免疫抑制功能,使T細胞處于耗竭狀態(tài)。其重要機制是在T細胞發(fā)揮抗腫瘤作用的過程中,可分泌大量的干擾素-γ（Interferon-γ,IFN-γ）,IFN-γ在殺傷腫瘤的同時還可作為上游細胞因子誘導(dǎo)腫瘤細胞表面PD-L1分子的表達水平升高,與T細胞表面PD-1結(jié)合后抑制T細胞的功能從而發(fā)生免疫逃逸。因此,阻斷PD-1/PD-L1通路,或抑制其表達成為恢復(fù)T細胞功能的... 

【文章來源】：鄭州大學(xué)河南省 211工程院校

【文章頁數(shù)】：68 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

不同濃度蘿卜硫素對CD8+T細胞增殖活性的影響

1.2 MSLN-CAR 載體的構(gòu)建和 MSLN-CAR T 細胞的制備將識別 MSLN 抗原的 MSLN-scFv 識別區(qū)連接至 CD28 和 CD3 的信號區(qū)（圖2A），將其亞克隆入慢病毒載體中，測序驗證 MSLN CAR 載體構(gòu)建成功后，通過 293T 系統(tǒng)包裝病毒及 T 細胞感染獲得 MSLN-CAR T 細胞，采用流式細胞術(shù)檢測效率（圖 2B）。

72h后采用流式細胞術(shù)及免疫印跡檢測PD-1表達（圖3）。結(jié)果顯示，與對照組相比，蘿卜硫素處理后的 MSLN-CAR T 細胞表面 PD-1表達水平明顯下調(diào)。說明蘿卜硫素可顯著降低 MSLN-CAR T 細胞表面 PD-1 的表達水平。圖 3 蘿卜硫素抑制 MLSN-CAR T 細胞表面 PD-1 表達A： 流式細胞術(shù)檢測蘿卜硫素處理后 MSLN-CAR T 細胞表面 PD-1 表達；B：免疫印跡檢測蘿卜硫素處理后 MSLN-CAR T 細胞表面 PD-1 表達。（**P＜ 0.01）


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