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微小RNA-218對大鼠膝骨關節(jié)炎細胞的增殖與凋亡調控作用機制研究

發(fā)布時間:2021-04-05 12:56
  目的研究微小RNA-218(miR-218)通過調控Wnt/β-連環(huán)蛋白(β-catenin)信號通路對大鼠膝骨關節(jié)炎(KOA)細胞增殖與凋亡的影響。方法按照體重將SD大鼠隨機分為4組:空白對照組、模型組、第1轉染組和第2轉染組,每組15只。模型組、第1轉染組和第2轉染組大鼠通過向雙側膝關節(jié)腔內注射碘乙酸進行KOA造模。成功造模1周后,空白對照組與模型組大鼠注射等量0.9%NaCl,第1轉染組大鼠注射慢病毒滅活miR-218質粒3μL(滴度5.0×1012 copies·mL-1);第2轉染組大鼠注射慢病毒滅活miR-218質粒3μL(滴度5.0×1012 copies·mL-1)+Wnt/β-catenin信號通路激動劑SKL2001(40μmol·L-1)。用逆轉錄-PCR法檢測軟骨組織miR-218基因的表達(OD比值×100),CCK-8檢測細胞增殖水平,AnnexinV-FITC/PI染色分析細胞凋亡狀態(tài),蛋白質印跡法檢測細胞中Bcl-2基因相關X蛋白(Bax)、B細... 

【文章來源】:中國臨床藥理學雜志. 2020,36(22)北大核心CSCD

【文章頁數(shù)】:5 頁

【文章目錄】:
材料與方法
    1 材料
    2 實驗方法
        2.1 KOA大鼠模型建立
        2.2 分組、藥物干預與取材
        2.3 以RT-PCR法檢測大鼠軟骨組織miR-218基因表達[5]
        2.4 以CCK-8試劑盒檢測大鼠軟骨細胞增殖[6]
        2.5 以Annexin V-FITC/PI試劑盒檢測大鼠軟骨細胞凋亡
        2.6 以蛋白質印跡法檢測大鼠軟骨組織Bcl-2、Bax、β-catenin和Wnt蛋白的表達[8]
    3 統(tǒng)計學處理
結 果
    1 各組大鼠軟骨組織miR-218基因表達比較
    2 各組大鼠軟骨細胞增殖水平比較
    3 各組大鼠軟骨細胞凋亡率比較
    4 各組大鼠軟骨組織Bcl-2、Bax、β-catenin和Wnt蛋白表達比較
討 論



本文編號:3119674

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