發(fā)布時(shí)間：2017-04-16 03:25

  本文關(guān)鍵詞：胍丁胺-I1咪唑啉受體系統(tǒng)對(duì)阿片成癮的調(diào)節(jié)作用，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：阿片成癮,俗稱“吸毒”。不僅嚴(yán)重?fù)p害成癮者健康,而且引發(fā)一系列重大的社會(huì)、經(jīng)濟(jì)和公共衛(wèi)生問題,嚴(yán)重阻礙社會(huì)的進(jìn)步與發(fā)展,已成為世界性公害。因此,深入研究阿片成癮神經(jīng)生物學(xué)機(jī)制,尋找理想的防復(fù)吸靶標(biāo),研發(fā)自身不成癮且具有防復(fù)吸作用的新藥具有重大生物學(xué)意義。課題組前期經(jīng)過系統(tǒng)的研究發(fā)現(xiàn),胍丁胺本身不成癮,能預(yù)防和治療阿片軀體和精神依賴、緩解稽延癥狀、防復(fù)吸。在細(xì)胞水平和整體水平提示胍丁胺可能是通過激活I(lǐng)1咪唑啉受體(I1 imidazoline receptor,I1R)發(fā)揮上述抗阿片成癮的作用,因此胍丁胺-I1R可能構(gòu)成了一個(gè)新的阿片功能調(diào)節(jié)系統(tǒng),為阿片成癮的治療提供了可能的新靶點(diǎn)和新機(jī)制。然而,胍丁胺本身并不是I1R的高特異性激動(dòng)劑,同時(shí)還能與??-腎上腺素受體(?2-adrenergic receptor,?2-AR)結(jié)合,且對(duì)NMDA受體、電壓門控鈣通道具有阻斷作用,抑制一氧化氮合酶(nitric oxide synthase,NOS)活性,并且以上五個(gè)作用靶點(diǎn)均與阿片成癮有密切關(guān)系。因此I1R在阿片成癮中的作用尚不能完全確定。所以,本課題組構(gòu)建了IRAS(imidazoline receptor antisera selected protein)基因敲除小鼠,經(jīng)證實(shí)I1R候選蛋白IRAS具有天然I1R生物學(xué)特征,為研究I1R調(diào)節(jié)阿片成癮的作用機(jī)制提供了良好的實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ秃凸ぞ�。本課題旨在采用IRAS(I1R)基因敲除小鼠系統(tǒng)研究I1R在阿片成癮中的調(diào)節(jié)作用以及胍丁胺在小鼠中的抗阿片成癮作用。本文的主要發(fā)現(xiàn)如下:(一)I1R在阿片精神依賴過程中的作用。(1)自身給藥模型是動(dòng)物操作性條件反射模型,最大程度地模擬了人類從用藥到成癮的主觀能動(dòng)性,反映了成癮的形成、維持、戒斷及復(fù)吸的動(dòng)態(tài)過程,成為最具有測試效度的模型,為研究成癮的機(jī)制提供了重要的實(shí)驗(yàn)手段。有利于動(dòng)態(tài)的分析I1R在阿片成癮發(fā)生、發(fā)展過程中的作用。在固定比率1(fixed ratio 1,FR1)訓(xùn)練程序下,在單劑量海洛因(0.025 mg/kg/次注射,i.v.)誘導(dǎo)的小鼠自身給藥實(shí)驗(yàn)中發(fā)現(xiàn),I1R敲除小鼠自身用藥行為顯著高于野生型小鼠。在海洛因誘導(dǎo)自身給藥的量效曲線研究中,I1R敲除小鼠的海洛因量效曲線較野生型小鼠向上移動(dòng),提示I1R敲除后對(duì)海洛因的藥物效應(yīng)的反應(yīng)性是增強(qiáng)的(敏感性增加)。從上述海洛因量效曲線中可以觀察到,I1R敲除小鼠自身用藥行為(有效鼻觸次數(shù))和藥物攝入量顯著高于野生型小鼠。以上實(shí)驗(yàn)結(jié)果證明I1R敲除能顯著上調(diào)海洛因的正性強(qiáng)化作用。首次發(fā)現(xiàn)I1R對(duì)海洛因成癮可能具有負(fù)性調(diào)節(jié)作用。(2)在基礎(chǔ)行為觀察實(shí)驗(yàn)中I1R敲除后不影響小鼠的自發(fā)活動(dòng);單次急性給予嗎啡(5、10 mg/kg,s.c.)后,I1R敲除小鼠運(yùn)動(dòng)距離低于野生型;在嗎啡(5、10 mg/kg,s.c.)誘導(dǎo)的行為敏化實(shí)驗(yàn)中,野生型小鼠可以顯著形成10mg/kg嗎啡誘導(dǎo)的行為敏化行為,而敲除型小鼠不能。這與海洛因誘發(fā)自身給藥實(shí)驗(yàn)結(jié)果并不一致,具體原因有待進(jìn)一步研究。綜上結(jié)果表明,海洛因誘導(dǎo)小鼠自身給藥模型中I1R敲除后增強(qiáng)了阿片成癮的敏感性,這與前期胍丁胺激活I(lǐng)1R后具有抗阿片成癮作用的結(jié)果相一致。(二)在獲得I1R完全敲除模式動(dòng)物后,為了提高實(shí)驗(yàn)結(jié)果的特異性,減少系統(tǒng)外因素對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果的影響,我們又構(gòu)建了神經(jīng)元特異性I1R敲除小鼠模式動(dòng)物。對(duì)首批獲得的神經(jīng)元特異性敲除小鼠我們首先進(jìn)行了基礎(chǔ)生理及與精神行為學(xué)相關(guān)的測試。(1)在蔗糖誘導(dǎo)自然獎(jiǎng)賞實(shí)驗(yàn)中,敲除小鼠與野生型小鼠對(duì)5%蔗糖誘導(dǎo)的自身用藥行為無顯著性差異,提示干擾神經(jīng)元表達(dá)的I1R不影響自然獎(jiǎng)賞行為。(2)在基礎(chǔ)痛閾的測定模型中,熱板實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,I1R神經(jīng)元特異性敲除小鼠的基礎(chǔ)痛閾減弱,提示神經(jīng)元中I1R可能參與疼痛的調(diào)節(jié)。而該發(fā)現(xiàn)與前期研究中胍丁胺激活I(lǐng)1R發(fā)揮弱的鎮(zhèn)痛作用的結(jié)果相一致。(3)在阿片類物質(zhì)嗎啡誘導(dǎo)的高活動(dòng)性實(shí)驗(yàn)中,單次給予嗎啡(4、8、16mg/kg,s.c.),均能顯著增高野生型和I1R神經(jīng)元特異性敲除小鼠的活動(dòng)度,且兩者無顯著性差異。以上結(jié)果提示,I1R神經(jīng)元特異性敲除不影響生理性自然獎(jiǎng)賞效應(yīng),同時(shí)神經(jīng)元的I1R可能對(duì)疼痛的形成有一定的抑制作用,而胍丁胺激活I(lǐng)1R發(fā)揮弱的鎮(zhèn)痛作用,增強(qiáng)嗎啡鎮(zhèn)痛從而降低嗎啡軀體依賴的形成,所以神經(jīng)元的I1R也可能參與阿片類物質(zhì)成癮的調(diào)節(jié)。而神經(jīng)元特異性敲除后對(duì)于中高劑量嗎啡的反應(yīng)性無顯著性變化。(三)基于本研究的I1R敲除動(dòng)物為小鼠,而前期研究中胍丁胺具有抗阿片精神依賴的作用均是在大鼠上獲得的,因此我們預(yù)先采用與敲除動(dòng)物遺傳背景相近的C57BL/6J小鼠進(jìn)行研究,觀察胍丁胺對(duì)嗎啡誘導(dǎo)的行為敏化所致的精神依賴的藥理學(xué)作用。(1)胍丁胺(1-80 mg/kg,s.c.)不影響小鼠自發(fā)活動(dòng)和急性嗎啡(10 mg/kg,s.c.)誘導(dǎo)的小鼠高活動(dòng)性;對(duì)嗎啡誘導(dǎo)行為敏化有減弱的趨勢,并無顯著性差異。(2)胍丁胺具有多個(gè)作用靶點(diǎn),如I1R、?2-AR、NMDA受體等。其中對(duì)?2-AR的親和力僅次于I1R,另有研究表明I1R和?2-AR存在功能上的交互作用。因此我們聯(lián)合給予?2-AR選擇性拮抗劑育亨賓觀察胍丁胺對(duì)阿片成癮的調(diào)節(jié)作用。實(shí)驗(yàn)結(jié)果如下:育亨賓(2 mg/kg,i.p.)單獨(dú)給藥不影響實(shí)驗(yàn)動(dòng)物自發(fā)活動(dòng)和急性嗎啡致高活動(dòng)性。當(dāng)育亨賓(2 mg/kg,i.p.)與胍丁胺(80 mg/kg,s.c.)共同給藥時(shí)顯著降低小鼠急性嗎啡致高活動(dòng)性和行為敏化的形成。提示育亨賓阻斷?2-AR的同時(shí)胍丁胺激活I(lǐng)1R具有拮抗嗎啡正性強(qiáng)化作用及精神依賴的作用。以上結(jié)果提示,胍丁胺在小鼠的阿片精神依賴模型中具有一定的抗阿片成癮效應(yīng),但不完全與大鼠的結(jié)果(胍丁胺抑制嗎啡誘發(fā)大鼠行為敏化的形成)相一致,并且其是否通過I1R發(fā)揮作用,需在敲除小鼠中進(jìn)行深入研究。綜上所述,本研究發(fā)現(xiàn)特異性敲除I1R增強(qiáng)了阿片成癮的敏感性,與胍丁胺激活I(lǐng)1R抗成癮的作用相呼應(yīng);而神經(jīng)元特異性敲除小鼠不影響自然獎(jiǎng)賞效應(yīng),其基礎(chǔ)痛閾減弱與胍丁胺激活I(lǐng)1R發(fā)揮弱的鎮(zhèn)痛效應(yīng)相一致;并且胍丁胺聯(lián)合育亨賓用藥在野生型小鼠中具有一定的抗阿片成癮的作用。提示胍丁胺-I1咪唑啉受體可能構(gòu)成了一個(gè)新的阿片功能調(diào)節(jié)系統(tǒng),成為理想的抗阿片成癮的藥物靶標(biāo)。
【關(guān)鍵詞】：I1咪唑啉受體敲除 胍丁胺 阿片成癮 嗎啡 海洛因
【學(xué)位授予單位】：中國人民解放軍軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號(hào)】：R965
【目錄】：

• 縮略詞表5-6
• 摘要6-9
• Abstract9-12
• 前言12-15
• 第一章 I1咪唑啉受體敲除對(duì)阿片精神依賴的調(diào)節(jié)作用15-23
• 1 研究背景15
• 2 材料與方法15-17
• 2.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物15
• 2.2 實(shí)驗(yàn)藥品15
• 2.3 實(shí)驗(yàn)設(shè)備15-16
• 2.4 實(shí)驗(yàn)方法16-17
• 2.5 統(tǒng)計(jì)分析17
• 3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果17-21
• 3.1 I1 咪唑啉受體敲除對(duì)海洛因自身給藥行為和量效曲線的影響17-19
• 3.2 I1 咪唑啉受體敲除對(duì)小鼠基礎(chǔ)活動(dòng)性和急性嗎啡處理致高活動(dòng)性 的影響19-20
• 3.3 I1 咪唑啉受體敲除對(duì)嗎啡行為敏化的影響20-21
• 4 小結(jié)21
• 5 討論21-23
• 第二章 神經(jīng)元特異性I1 咪唑啉受體敲除后對(duì)成癮相關(guān)行為學(xué)的研究23-29
• 1 研究背景23
• 2 材料與方法23-24
• 2.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物23
• 2.2 實(shí)驗(yàn)藥品23
• 2.3 實(shí)驗(yàn)設(shè)備23
• 2.4 實(shí)驗(yàn)方法23-24
• 2.5 統(tǒng)計(jì)分析24
• 3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果24-27
• 3.1 神經(jīng)元特異性I1 咪唑啉受體敲除對(duì)蔗糖自身攝取行為的影響24-25
• 3.2 神經(jīng)元特異性I1 咪唑啉受體敲除對(duì)小鼠基礎(chǔ)痛閾的影響25-26
• 3.3 神經(jīng)元特異性I1 咪唑啉受體敲除對(duì)急性嗎啡致小鼠高活動(dòng)性的影響26-27
• 4 小結(jié)27
• 5 討論27-29
• 第三章 胍丁胺對(duì)小鼠阿片精神依賴的影響29-38
• 1 研究背景29
• 2 材料與方法29-31
• 2.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物29
• 2.2 實(shí)驗(yàn)藥品29
• 2.3 實(shí)驗(yàn)設(shè)備29
• 2.4 實(shí)驗(yàn)方法29-31
• 2.5 統(tǒng)計(jì)分析31
• 3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果31-35
• 3.1 單獨(dú)給予胍丁胺或育亨賓以及二者聯(lián)合用藥對(duì)小鼠活動(dòng)性的影響31-32
• 3.2 單獨(dú)給予胍丁胺或育亨賓以及二者聯(lián)合用藥對(duì)急性嗎啡致小鼠高活動(dòng)性的影響32-33
• 3.3 胍丁胺單獨(dú)給藥或聯(lián)合育亨賓給藥對(duì)嗎啡誘導(dǎo)小鼠行為敏化的影響33-35
• 4 小結(jié)35
• 5 討論35-38
• 第四章 總結(jié)38-39
• 參考文獻(xiàn)39-43
• 綜述43-57
• 參考文獻(xiàn)53-57
• 發(fā)表文章57-70
• 個(gè)人簡歷70-71
• 致謝71

【參考文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前4條

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3 李錦,李昕,裴鋼,秦伯益;胍丁胺抗大鼠身體依賴作用與阿片受體的關(guān)系[J];中國藥物依賴性雜志;1999年03期

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  本文關(guān)鍵詞：胍丁胺-I1咪唑啉受體系統(tǒng)對(duì)阿片成癮的調(diào)節(jié)作用，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

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本文編號(hào)：309918