目的探索紫草素對低氧-復(fù)氧（H/R）損害的H9c2心肌細胞的保護作用。方法將心肌細胞系H9c2分為對照組、H/R組、紫草素（0. 1、1和10μmol/L）干預(yù)組,每組3個平行孔; MTT法檢測紫草素對H9c2細胞毒性;流式細胞計量術(shù)檢測細胞凋亡和周期; DCFH-DA檢測細胞活性氧水平;生化檢測細胞中MDA、8-OHdG和GSH含量;qPCR檢測細胞γ-GCS、HO-1和NQO1 mRNA表達; Western blot檢測細胞中Bax、Bcl-2、caspase-3、cleaved caspase-3、Keap1和Nrf2蛋白表達;免疫熒光檢測細胞Nrf2蛋白進核情況。結(jié)果紫草素呈濃度-時間依賴性抑制H9c2細胞增殖（P<0. 05）; H/R誘導(dǎo)H9c2細胞凋亡、細胞周期阻滯及促進Bax及cleaved caspase-3蛋白表達,抑制Bcl-2蛋白表達（P<0. 05）,紫草素呈濃度依賴性抑制細胞凋亡、解除細胞周期阻滯及cleaved caspase-3和Bax蛋白表達,增加Bcl-2蛋白表達;紫草素可降低H/R所致活性氧水平、MDA及8-OHdG升高,增高H/R所... 

【文章來源】：基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)與臨床. 2020,40(03)

【文章頁數(shù)】：8 頁

【文章目錄】：
1 材料與方法
    1.1 材料
        1.1.1 細胞與藥物:
        1.1.2 材料:
    1.2 方法
        1.2.1 細胞的分組及處理:
        1.2.2 MTT法檢測細胞增殖:
        1.2.3 流式細胞計量術(shù)檢測細胞凋亡和周期:
        1.2.4 2',7'-二氯熒光黃雙乙酸鹽（2',7'-dichlo-rofluorescin diacetate,DCFH-DA）檢測細胞中活性氧水平:
        1.2.5 Western blot檢測細胞中Bax、Bcl-2、Keap1和Nrf2蛋白表達:
        1.2.6硫代巴比妥酸（thiobarbituric acid,TBA）法、ELISA和微量酶標(biāo)法分別檢測細胞中MDA、8-OHd G、GSH含量:
        1.2.7 qPCR檢測細胞中γ-谷氨酰半胱氨酸合成酶（humanγ-glutamyl systeine synthetase，γ-GCS）、HO-1和醌氧化還原酶1[NAD（P）H dehydrogenase1,NQO1]mRNA表達:
        1.2.8 免疫熒光檢測紫細胞中Nrf2進核:
    1.3 統(tǒng)計學(xué)分析
2 結(jié)果
    2.1 紫草素對H9c2細胞增殖的影響
    2.2 紫草素對H/R損傷的H9c2細胞凋亡周期的影響
    2.3 紫草素對H/R損傷的H9c2細胞中活性氧水平的影響
    2.4 紫草素對H/R損傷的H9c2細胞中Bax、Bcl-2、caspase-3和cleaved caspase-3蛋白含量的影響
    2.5 紫草素對H/R損傷的H9c2細胞中MDA、8-OHdG和GSH含量的影響
    2.6 紫草素對H/R損傷的H9c2細胞中γ-GCS、HO-1和NQO1 mRNA表達影響
    2.7 紫草素對H/R損傷的H9c2細胞中Keap1和Nrf2蛋白含量的影響
    2.8 紫草素對H/R損傷的H9c2細胞中Nrf2蛋白進核的影響
3 討論


【參考文獻】：
期刊論文
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本文編號：3018054