小分子抗菌肽參與宿主內(nèi)在免疫系統(tǒng)的構(gòu)成,有獨(dú)特的作用機(jī)制,難以誘導(dǎo)藥物耐藥性產(chǎn)生,受到了越來(lái)越多的關(guān)注。但是天然抗菌肽存在酶解穩(wěn)定性差、生物利用度低、有一定細(xì)胞毒性等缺陷,限制了抗菌肽的發(fā)展應(yīng)用。本研究的第一部分工作是采用非天然D型氨基酸（D-Leu,D-Lys,D-Arg）對(duì)天然抗菌肽Anoplin的親水面和疏水面分別進(jìn)行進(jìn)行氨基酸替換結(jié)構(gòu)改造,共得到10條含部分D型氨基酸替換的Anoplin類(lèi)似物。通過(guò)系列結(jié)構(gòu)改造和構(gòu)效關(guān)系研究探討Anoplin最敏感的酶切位點(diǎn)。本構(gòu)效研究結(jié)果顯示,在不同部位進(jìn)行D型氨基酸替換會(huì)對(duì)其抗菌活性、穩(wěn)定性和二級(jí)結(jié)構(gòu)產(chǎn)生不同影響。其中疏水面替換類(lèi)似物Anoplin-D9,10和Anoplin-D9,10,3保留了抗菌活性,并且在對(duì)抗大腸桿菌（ATCC 25922）時(shí)Anoplin-D9,10,3的抗菌活性相比母肽Anoplin提高了1倍;但其余D型替換類(lèi)似物抗菌活性喪失。通過(guò)對(duì)所有D型氨基酸類(lèi)似物進(jìn)行穩(wěn)定性考察結(jié)果顯示,相比于母肽Anoplin,疏水面替換類(lèi)似物Anoplin-D9,10,3耐受糜蛋白酶降解的能力提高10倍,耐受胰蛋白酶降解的能力改善不明顯... 

【文章來(lái)源】：蘭州大學(xué)甘肅省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁(yè)數(shù)】：125 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：博士

【文章目錄】：
中文摘要
Abstract
第一章 綜述
    1.1 抗菌肽的背景介紹
        1.1.1 抗菌肽的概念及類(lèi)別
        1.1.2 抗菌肽的構(gòu)象
        1.1.3 抗菌肽的作用機(jī)制
        1.1.4 抗菌肽的發(fā)展前景與實(shí)際問(wèn)題
    1.2 影響抗菌肽生物活性的相關(guān)參數(shù)
        1.2.1 電荷數(shù)
        1.2.2 螺旋度
        1.2.3 疏水性
    1.3 提高抗菌肽穩(wěn)定性的改造方法
    1.4 天然抗菌肽Anoplin的研究背景
    1.5 “點(diǎn)擊化學(xué)”反應(yīng)在肽類(lèi)藥物結(jié)構(gòu)改造中的應(yīng)用
    1.6 中藥單體熊果酸的背景介紹
第二章 新型Anoplin的D型氨基酸結(jié)構(gòu)改造類(lèi)似物的設(shè)計(jì)、合成與活性研究
    2.1 設(shè)計(jì)思路
    2.2 實(shí)驗(yàn)材料與方法
        2.2.1 實(shí)驗(yàn)用品
        2.2.2 溶劑預(yù)處理
        2.2.3 新型Anoplin的D型氨基酸替換類(lèi)似物的合成
        2.2.4 細(xì)菌菌株
        2.2.5 體外抗菌活性的考察
        2.2.6 酶解穩(wěn)定性考察
        2.2.7 RP-HPLC降解率-時(shí)間分析
        2.2.8 安全性評(píng)價(jià)
        2.2.9 二級(jí)結(jié)構(gòu)的考察
        2.2.10 數(shù)據(jù)處理
    2.3 結(jié)果
        2.3.1 新型Anoplin的D型氨基酸替換類(lèi)似物的合成
        2.3.2 抗菌活性評(píng)價(jià)
        2.3.3 酶解穩(wěn)定性考察
        2.3.4 RP-HPLC降解率-時(shí)間分析結(jié)果
        2.3.5 安全性評(píng)估
        2.3.6 二級(jí)結(jié)構(gòu)考察
    2.4 討論
第三章 新型Anoplin含D型氨基酸的二聚體類(lèi)似物的設(shè)計(jì)、合成及相關(guān)研究
    3.1 設(shè)計(jì)思路
    3.2 實(shí)驗(yàn)材料與方法
        3.2.1 試劑藥品與實(shí)驗(yàn)儀器
2N₃）">        3.2.2 自制疊氮試劑（Tf₂N₃）
        3.2.3 同源二聚體類(lèi)似物J-AA-（D4,7）2的合成方法
        3.2.4 含D型氨基酸的同源二聚體類(lèi)似物J-AA-（D5,7）2的合成方法
        3.2.5 含D型氨基酸的雜聚化二聚體類(lèi)似物J-AA-（D4,7+D5,7）的合成方法
        3.2.6 含D型氨基酸的雜聚化二聚體類(lèi)似物J-AA-（D9,10,3+D5,7）的合成方法
        3.2.7 細(xì)菌菌株與實(shí)驗(yàn)動(dòng)物
        3.2.8 最低抑菌濃度（MIC）和最低殺菌濃度（MBC）的測(cè)定
        3.2.9 殺菌動(dòng)力學(xué)試驗(yàn)
        3.2.10 徑向擴(kuò)散試驗(yàn)
        3.2.11 聯(lián)合用藥效果的評(píng)價(jià)
        3.2.12 聯(lián)合用藥殺菌動(dòng)力學(xué)
        3.2.13 抑制生物膜形成率
        3.2.14 穩(wěn)定性考察
        3.2.15 RP-HPLC降解率-時(shí)間分析
        3.2.16 溶血活性
        3.2.17 細(xì)胞Mtt試驗(yàn)
        3.2.18 體內(nèi)有效性考察
        3.2.19 作用機(jī)制的考察
        3.2.20 二級(jí)結(jié)構(gòu)的考察
        3.2.21 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析
    3.3 結(jié)果
        3.3.1 新型Anoplin含D型氨基酸的二聚體類(lèi)似物的合成
        3.3.2 最低抑菌濃度（MIC）和最低殺菌濃度（MBC）的測(cè)定結(jié)果
        3.3.3 抗菌肽二聚體類(lèi)似物的殺菌動(dòng)力學(xué)
        3.3.4 徑向擴(kuò)散
        3.3.5 聯(lián)合用藥抗菌活性
        3.3.6 聯(lián)合用藥動(dòng)力學(xué)
        3.3.7 抑制生物膜
        3.3.8 穩(wěn)定性考察
        3.3.9 RP-HPLC降解率-時(shí)間分析曲線
        3.3.10 溶血作用
        3.3.11 細(xì)胞Mtt試驗(yàn)
        3.3.12 抗菌肽對(duì)小鼠急性大腸桿菌腹膜炎模型的治療
        3.3.13 聯(lián)合用藥對(duì)小鼠急性腹膜炎模型的治療
        3.3.14 抗菌肽對(duì)環(huán)磷酰胺預(yù)處理小鼠預(yù)防保護(hù)性作用評(píng)估
        3.3.15 抗菌肽二聚體類(lèi)似物對(duì)細(xì)菌外膜、內(nèi)膜的破壞性作用
        3.3.16 掃描電鏡
        3.3.17 PI攝取
        3.3.18 PI流式結(jié)果
        3.3.19 活性氧的檢測(cè)
        3.3.20 抗菌肽二聚體類(lèi)似物的二級(jí)結(jié)構(gòu)
    3.4 討論
第四章 中藥單體熊果酸聯(lián)合抗菌肽二聚體類(lèi)似物聯(lián)合抗菌作用及機(jī)制探討
    4.1 實(shí)驗(yàn)材料
    4.2 實(shí)驗(yàn)方法
        4.2.1 熊果酸抗菌作用的評(píng)估
        4.2.2 熊果酸抗菌機(jī)制的研究方法
        4.2.3 熊果酸聯(lián)合抗菌肽J-AA-（D9,10,3+D5,7）的抗菌作用考察
        4.2.4 聯(lián)合用藥動(dòng)力學(xué)考察
        4.2.5 熊果酸聯(lián)合抗菌肽J-AA-（D9,10,3+D5,7）抑制生物膜形成能力的評(píng)估
        4.2.6 聯(lián)合用藥組PI流式的定量分析方法
        4.2.7 數(shù)據(jù)處理
    4.3 結(jié)果
        4.3.1 熊果酸的抗菌活性
        4.3.2 中藥單體熊果酸的抗菌機(jī)制
        4.3.3 中藥單體熊果酸聯(lián)合抗菌肽J-AA-（D9,10,3+D5,7）的抗菌作用
        4.3.4 聯(lián)合用藥的殺菌動(dòng)力學(xué)試驗(yàn)
        4.3.5 聯(lián)合用藥的PI流式
        4.3.6 聯(lián)合用藥共同抑制金黃色葡萄球菌生物膜的形成
    4.4 討論
論文研究總結(jié)
參考文獻(xiàn)
縮略詞中英文對(duì)照表
在學(xué)期間研究成果
致謝
附錄



本文編號(hào)：2994768