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普樂安片DNA條形碼分子鑒定研究

發(fā)布時間:2021-01-23 03:20
  建立基于DNA條形碼技術的普樂安片處方成分鑒定方法。共收集8個廠家的16份普樂安片樣品,分別采用植物和動物基因組DNA提取試劑盒提取樣品DNA,所獲DNA的ITS2序列擴增成功率均為100%,細胞色素C氧化酶亞基I (COI)序列擴增成功率分別為43.75%和56.25%。對于ITS2序列, 12份樣品可獲得高質量測序峰圖,鑒定結果為油菜Brassica campestris, 4份樣品存在較嚴重套峰,經(jīng)克隆測序鑒定為油菜和黑芥B. nigra。對于COI序列通用引物獲得的9份PCR產(chǎn)物,其中2份樣品可直接進行PCR產(chǎn)物測序,鑒定結果為蚜蟲類, 7份樣品經(jīng)克隆測序獲得82條序列,其中5份樣品可檢測到意大利蜜蜂Apis mellifera, 7份樣品均可檢測到病原菌或病蟲害。為解決COI通用引物因外源污染導致的蜜蜂源檢測失敗問題,新設計2對蜜蜂屬Apis的COI引物,擴增效率均為43.75%,7份PCR產(chǎn)物直接測序的鑒定結果均為意大利蜜蜂A. mellifera。9份未檢測到蜜蜂源的普樂安片來自同一廠家生產(chǎn)的3個不同批次,且每個批次含3份樣品,推測原料花粉非蜜蜂采集所得。本研究基于ITS... 

【文章來源】:藥學學報. 2020,55(06)北大核心

【文章頁數(shù)】:7 頁

【文章目錄】:
材料與方法
結果
    1 普樂安片DNA提取、PCR擴增成功率與測序結果
    2 普樂安片植物源成分的基原物種鑒定
    3 基于COI序列通用引物的普樂安片蜜蜂源成分鑒定
    4 基于COI序列的蜂屬特異性引物對普樂安片中蜜蜂源成分鑒定
討論


【參考文獻】:
期刊論文
[1]基于DNA metabarcoding技術的如意金黃散處方成分鑒定研究[J]. 石林春,劉金欣,魏妙潔,謝麗芳,宋經(jīng)元.  中國科學:生命科學. 2018(04)
[2]基于DNA條形碼技術的知母種子基原鑒定[J]. 石林春,金鉞,趙春穎,王秋玲,謝利德,劉金欣.  中國實驗方劑學雜志. 2018(12)
[3]基于ITS2序列的中藥材蒼術種苗DNA條形碼鑒定[J]. 劉金欣,李耿,陳彩霞,魏妙潔,王燕,趙春穎,石林春.  中國實驗方劑學雜志. 2018(02)
[4]市售動物藥材僵蠶的DNA條形碼鑒定研究[J]. 賈靜,石林春,姚輝,宋經(jīng)元,陳士林.  藥學學報. 2016(11)
[5]普樂安片HPLC指紋圖譜研究[J]. 程巧鴛,張文婷,陳碧蓮,鄭成,鄭瑜倩.  中成藥. 2016(01)
[6]市售鹿茸粉藥材的DNA條形碼鑒定[J]. 賈靜,石林春,徐志超,辛天怡,宋經(jīng)元,陳士林.  藥學學報. 2015(10)
[7]應用ITS2條形碼鑒定中藥材合歡皮、合歡花及其混偽品[J]. 趙莎,龐曉慧,宋經(jīng)元,陳士林.  中國中藥雜志. 2014(12)
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[9]羌活藥材ITS/ITS2條形碼鑒定及其穩(wěn)定性與準確性研究[J]. 辛天怡,姚輝,羅焜,向麗,馬曉沖,韓建萍,林余霖,宋經(jīng)元,陳士林.  藥學學報. 2012(08)
[10]油菜花粉研究進展[J]. 馮慧,焦士蓉,唐遠謀,唐鵬程,劉佳.  食品工業(yè). 2011(09)



本文編號:2994447

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