染色體區(qū)域穩(wěn)定蛋白1（CRM1）也稱為核輸出蛋白1（XPO1）,是治療人類腫瘤的一個有前途的靶點。CRM1在胃癌、卵巢癌、胰腺癌、骨肉瘤、膠質母細胞瘤和宮頸癌等腫瘤組織中表達過高,且與預后不良有關。目前,尚不清楚CRM1是否參與了人胃癌的病理生理過程,以及靶向抑制CRM1是否能成為治療胃癌的新型治療方式。近年來,許多研究表明CRM1抑制劑都具有α,β-不飽和δ-內酯環(huán),包括Leptomycin B、Ratjadone等化合物。在本課題中,我們探討了M-5對胃癌細胞的抗腫瘤作用以及其可能的機制。主要結果如下:1.用MTT法檢測M-5對兩種胃癌細胞（MGC803和HGC27）和胃正常上皮細胞（GES1）的抗增殖活性。我們發(fā)現(xiàn)M-5以濃度依賴的方式抑制兩種胃癌細胞（MGC803和HGC27）的增殖,但對胃正常上皮細胞（GES1）基本上無細胞毒性。2.為了證實線粒體在M-5誘導細胞凋亡中所發(fā)揮的作用,使用JC-1檢測線粒體膜電位。結果表明,M-5使MGC803和HGC27細胞中的線粒體膜電位下降。蛋白質免疫印跡法分析表明,在胃癌細胞中加入M-5,會引起B(yǎng)ax水平升高,同時Bcl-2和Bcl-x... 

【文章來源】：鄭州大學河南省 211工程院校

【文章頁數(shù)】：70 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

CRM1轉運貨物蛋白的核輸出示意圖

化合物 d（M-5）通過以下幾個步驟合成[94-97]：物 a 的合成：我們將 2-異丙基-5-甲基苯酚加入到含有 NaOH 的水 10 min，然后將形成鈉鹽的體系緩慢加入到含有環(huán)氧氯丙烷的圓加入相轉移催化劑四丁基溴化銨（TBAB），在室溫下攪拌 12 h，C 檢測，反應結束后，反應產(chǎn)物通過乙酸乙酯萃取，得到的萃取液濃中間體 a�；衔� b 的合成[98]：將中間體 a 加入到含四氫呋喃的圓加入 CuI 催化劑，在惰性氣體保護下加入乙烯氯化鎂，在-10℃-0攪拌 2 h，TLC 檢測，反應完畢，將體系加入到含飽和氯化銨的錐0 min，硅藻土過濾，乙酸乙酯萃取，濃縮，柱層析得到中間體 b。成：將中間體 b 加入到含無水二氯甲烷的圓底燒瓶中，然后加入三酸鎂，最后緩慢加入丙烯酰氯，30 min 滴加完畢，攪拌 2 h，TLC 檢萃取，濃縮，柱層析，得到中間體 c�；衔� d 的合成[99-101]：將 Gru入到 50 mL 的兩口瓶中，再加入無水二氯甲烷，惰性氣體保護，含中間體 c 的二氯甲烷溶液，50℃-60℃條件，回流 6 h，TLC 檢測干法裝柱，得到目標化合 d。

圖 1M-5 的化學結構示意圖細胞（MGC803 與 HGC27）癌細胞（MGC803 與 HGC27)以采用 MTT 法。M-5 按照 5 個濃度803、HGC27 和 GES1 細胞 24 h 得出，M-5 對兩種胃癌細胞都有GC803 細胞對 M-5 更為敏感。M活率降低 54.10%，HGC27 細胞.29%。但是，GES1 細胞在 10 μ%。

【參考文獻】：
期刊論文
[1]Expression of CRM1 and CDK5 shows high prognostic accuracy for gastric cancer[J]. Yu-Qin Sun,Jian-Wei Xie,Hong-Teng Xie,Peng-Chen Chen,Xiu-Li Zhang,Chao-Hui Zheng,Ping Li,Jia-Bin Wang,Jian-Xian Lin,Long-Long Cao,Chang-Ming Huang,Yao Lin.  World Journal of Gastroenterology. 2017(11)

碩士論文
[1]LMB促進TFEB入核的分子機制研究[D]. 陳太琪.華東師范大學 2014
[2]ACA對CRM1依賴的出核運輸抑制作用的初步研究[D]. 卓心明.廈門大學 2007



本文編號：2981638