發(fā)布時間：2020-12-27 10:17

　　目的:探討microRNA-34a（miR-34a）在褐藻膠寡糖（AOS）延緩D-半乳糖（D-gal）誘導(dǎo)的心肌細胞衰老中的作用及其可能的分子機制。方法:實驗分六組:對照（Control）組、模型（D-gal）組、D-半乳糖+褐藻膠寡糖（D-gal+AOS）組、褐藻膠寡糖（AOS）組、D-半乳糖+褐藻膠寡糖+microRNA-34a mimic（D-gal+AOS+mi R-34a mimic）組、D-半乳糖+褐藻膠寡糖+microRNA-Negative Control（D-gal+AOS+miR-NC）組。D-gal+AOS+miR-34a mimic和D-gal+AOS+miR-NC組分別用Lipofectamine^TMM 3000轉(zhuǎn)染mi R-34a mimic（50nM）和miR-NC（50nM）,4-6h后換液。D-gal、D-gal+AOS、D-gal+AOS+miR-34a mimic和D-gal+AOS+miR-NC組細胞用D-gal（200m M）干預(yù)48h誘導(dǎo)心肌細胞衰老模型。48h后D-gal+AOS、AOS、D-gal+AOS+miR-3... 

【文章來源】：青島大學(xué)山東省

【文章頁數(shù)】：50 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

各組細胞中miR-34a的表達結(jié)果

結(jié)果17圖3（A）JC-1染色的心肌細胞線粒體膜電位變化，×200倍鏡。（B）Image-ProPlus軟件計算線粒體膜電位的定量數(shù)據(jù)。**p<0.01與Control組比較；##p<0.01與D-gal組比較；※※p<0.01與D-gal+AOS+miR-NC組比較。4Westernblot檢測心肌細胞中相關(guān)蛋白的表達4.1心肌細胞中衰老相關(guān)蛋白p16、p21和p53的表達本實驗應(yīng)用Westernblot方法檢測各組心肌細胞中衰老相關(guān)蛋白p16、p21和p53的表達情況。如圖4所示，與Control組相比，D-gal誘導(dǎo)衰老后，心肌細胞衰老相關(guān)蛋白p16、p21和p53的表達增加，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（p<0.01）。與D-gal組比較，D-gal+AOS組心肌細胞衰老相關(guān)蛋白p16、p21和p53的表達減少，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（p<0.01）。與D-gal+AOS+miR-NC組比較，D-gal+AOS+miR-34amimic組心肌細胞衰老相關(guān)蛋白p16、p21和p53的表達增加，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（p<0.01）。B

青島大學(xué)碩士學(xué)位論文184.2心肌細胞中SIRT1和PGC1α蛋白的表達本實驗應(yīng)用Westernblot方法檢測各組心肌細胞中SIRT1和PGC1α蛋白的表達情況。如圖5所示，與Control組相比，D-gal誘導(dǎo)衰老后心肌細胞中SIRT1和PGC1α蛋白的表達減少，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（p<0.01）。與D-gal組比較，D-gal+AOS組SIRT1和PGC1α蛋白的表達增加，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（p<0.01）。與D-gal+AOS+miR-NC組比較，D-gal+AOS+miR-34amimic組心肌細胞中SIRT1和PGC1α蛋白的表達減少，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（p<0.05）。圖4各組細胞中p16、p21和p53蛋白的表達。A：Westernblot檢測p16、p21和p53蛋白表達；B：各組細胞中p16、p21和p53蛋白的相對表達量。**p<0.01與Control組比較；##p<0.01與D-gal組比較；※※p<0.01與D-gal+AOS+miR-NC組比較。


本文編號：2941570