目的將膜活性肽Marmelittin與泛素蛋白Ub融合表達(dá)并測定其抗腫瘤活性。方法構(gòu)建pCold-TF-Ub-Marmelittin質(zhì)粒并轉(zhuǎn)化到BL21（DE3）菌中進(jìn)行誘導(dǎo)表達(dá)。篩選Marmelittin肽的最佳表達(dá)條件后并對Marmelittin肽進(jìn)行純化。圓二色光譜測定Marmelittin肽的二級結(jié)構(gòu), CCK-8實(shí)驗(yàn)和流式細(xì)胞術(shù)分析Marmelittin肽抗腫瘤活性及機(jī)制。結(jié)果 Marmelittin肽在表達(dá)菌為1.20 mmol·L^-1異丙基硫代-β-D-半乳糖苷（IPTG）誘導(dǎo)培養(yǎng)10 h時(shí)表達(dá)量最高。圓二色光譜測定Marmelittin肽為α-螺旋結(jié)構(gòu)。CCK-8實(shí)驗(yàn)測定Marmelittin肽對宮頸癌細(xì)胞株HeLa半數(shù)抑制濃度(IC₅₀)為（46.61±1.25）μg·mL^-1。流式細(xì)胞術(shù)檢測表明Marmelittin肽通過誘導(dǎo)凋亡方式殺傷Hela細(xì)胞。結(jié)論用泛素蛋白Ub為促溶標(biāo)簽成功表達(dá)了Marmelittin肽并測定了其抗腫瘤活性,為后續(xù)抗腫瘤機(jī)制及應(yīng)用研究提供了一定的基礎(chǔ)。 

【文章來源】：中國臨床藥理學(xué)雜志. 2020年22期 北大核心

【文章頁數(shù)】：4 頁

【部分圖文】：

pCold-TF-Ub-Marmelittin質(zhì)粒PCR鑒定結(jié)果

SDS-PAGE分析Marmelittin肽表達(dá)

對照組和用藥組(25,50,100 μg·mL-1)凋亡率分別為3.32%,24.78%,40.16%和89.81%。與對照組相比,各組均對HeLa細(xì)胞產(chǎn)生明顯誘導(dǎo)凋亡作用,見圖3。討 論

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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本文編號：2938879