發(fā)布時間：2020-12-23 16:57

　　骨關(guān)節(jié)炎（osteoarthritis,OA）是一種常見的退行性骨關(guān)節(jié)病變,主要累及負重大關(guān)節(jié),病程緩慢,病人活動受限甚至喪失生活自理能力。目前普遍認為OA是由機械和生物因素共同作用下,軟骨基質(zhì)、軟骨細胞和軟骨下骨的合成與降解發(fā)生失衡而形成的,涉及關(guān)節(jié)力學(xué)、細胞因子、氧化應(yīng)激和遺傳因素等方面。大量研究表明,氧化應(yīng)激通過參與胞內(nèi)信號傳導(dǎo)、軟骨細胞衰老和凋亡、胞外基質(zhì)的合成和降解以及滑膜炎癥等過程,對OA病情的發(fā)展起到非常重要的作用。因此,提高機體的抗氧化能力被認為是治療OA的可行方案。超氧化物歧化酶（superoxide dismutase,SOD）是機體抗氧化酶系統(tǒng)的重要組成之一,能快速、高效地清除活性氧自由基（reactive oxygen species,ROS）,使其成為治療ROS相關(guān)疾病的潛在酶類藥物。本課題組前期針對SOD存在的缺點,采用季銨化殼聚糖（6-0-2’-hydroxylpropyl trimethyl ammonium chloride chitosan,O-HTCC）成功地實現(xiàn)了對SOD的結(jié)構(gòu)修飾,得到酶活保留率高、半衰期延長、入胞能力佳的結(jié)合物O-HTCC-S... 

【文章來源】：山東大學(xué)山東省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：93 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
中文摘要
Abstract
符號說明
第一章 前言
    1. 骨關(guān)節(jié)炎概述
    2. 氧化應(yīng)激與骨關(guān)節(jié)炎
        2.1 氧化應(yīng)激
        2.2 骨關(guān)節(jié)炎的氧化應(yīng)激機制
    3. 骨關(guān)節(jié)炎的治療
        3.1 骨關(guān)節(jié)炎的臨床治療
        3.2 骨關(guān)節(jié)炎的抗氧化治療
    4. 骨關(guān)節(jié)炎動物模型
    5. 本課題研究的目的和意義
        5.1 前期研究基礎(chǔ)
        5.2 本課題擬解決的問題
第二章 O-HTCC-SOD的制備和表征
    1. 實驗材料
        1.1 儀器
        1.2 試劑
        1.3 溶液
    2. 實驗方法
        2.1 O-HTCC的合成
        2.2 O-HTCC的表征
        2.3 O-HTCC-SOD的制備和分離純化
        2.4 O-HTCC-SOD的表征
    3. 實驗結(jié)果與分析
        3.1 O-HTCC的結(jié)構(gòu)表征
        3.2 O-HTCC-SOD的分離純化
        3.3 O-HTCC-SOD的表征分析
    4. 討論
        4.1 殼聚糖用作蛋白質(zhì)藥物修飾劑
        4.2 殼聚糖修飾蛋白類藥物的方法
        4.3 殼聚糖修飾蛋白類藥物的研究進展
    5. 本章小結(jié)
第三章 O-HTCC-SOD對軟骨細胞損傷的保護作用
    1. 實驗材料
        1.1 儀器
        1.2 實驗試劑
        1.3 實驗動物
        1.4 溶液
    2. 實驗方法
        2.1 大鼠軟骨細胞的分離、培養(yǎng)與鑒定
        2.2 O-HTCC-SOD的軟骨細胞毒實驗
        2.3 O-HTCC-SOD與MIA共同孵育對軟骨細胞增殖的影響
        2.4 O-HTCC-SOD與MIA依次孵育對軟骨細胞增殖的影響
        2.5 O-HTCC-SOD對MIA誘導(dǎo)的軟骨細胞胞內(nèi)ROS水平的影響
        2.6 數(shù)據(jù)處理
    3. 實驗結(jié)果與分析
        3.1 大鼠軟骨細胞的形態(tài)與鑒定
        3.2 O-HTCC-SOD對軟骨細胞的毒性
        3.3 O-HTCC-SOD與MIA共同孵育對軟骨細胞增殖的影響
        3.4 O-HTCC-SOD與MIA依次孵育對軟骨細胞增殖的影響
        3.5 O-HTCC-SOD對軟骨細胞胞內(nèi)ROS水平的影響
    4. 討論
    5. 本章小結(jié)
第四章 關(guān)節(jié)腔注射O-HTCC-SOD大鼠體內(nèi)藥動學(xué)初步研究
    1. 實驗材料
        1.1 儀器
        1.2 試劑與耗材
        1.3 動物
        1.4 溶液
    2. 實驗方法
        2.1 動物給藥和分組方案
        2.2 關(guān)節(jié)滑液樣品采集
        2.3 大鼠關(guān)節(jié)滑液中藥物濃度檢測
        2.4 數(shù)據(jù)處理
    3. 實驗結(jié)果與分析
        3.1 關(guān)節(jié)腔單次注射給藥后關(guān)節(jié)腔內(nèi)SOD酶活殘留量測定
        3.2 SOD和O-HTCC-SOD的關(guān)節(jié)腔消除動力學(xué)
    4. 討論
    5. 本章小結(jié)
第五章 O-HTCC-SOD對大鼠骨關(guān)節(jié)炎的治療作用
    1. 實驗材料
        1.1 儀器
        1.2 試劑與耗材
        1.3 溶液
        1.4 實驗動物
    2. 實驗方法
        2.1 大鼠膝骨關(guān)節(jié)炎模型的制備、分組及給藥方法
        2.2 大鼠膝骨關(guān)節(jié)炎模型的觀察指標與評分方法
        2.3 大鼠膝骨關(guān)節(jié)炎痛感評價
        2.4 生化指標檢測
        2.5 數(shù)據(jù)分析
    3. 實驗結(jié)果
        3.1 大鼠OA模型的建立
        3.2 大鼠膝關(guān)節(jié)的大體及組織學(xué)評價
        3.3 O-HTCC-SOD對MIA誘導(dǎo)大鼠膝關(guān)節(jié)痛感的緩解作用
        3.4 大鼠外周血清中IL-1β、IL-6和TNF-α的含量
        3.5 大鼠膝關(guān)節(jié)滑膜組織勻漿中MDA和GSH的含量
    4. 討論
    5. 本章小結(jié)
第六章 總結(jié)與展望
    1. 總結(jié)
    2. 展望
參考文獻
致謝
攻讀碩士學(xué)位期間學(xué)術(shù)成果
學(xué)位論文評閱及答辯情況表


【參考文獻】：
期刊論文
[1]骨關(guān)節(jié)炎動物模型的研究進展[J]. 盧向陽,唐芳,馬武開,姚血明,陳琳英,周靜.  風濕病與關(guān)節(jié)炎. 2017(02)
[2]中國40歲以上人群原發(fā)性骨關(guān)節(jié)炎患病狀況調(diào)查[J]. 薛慶云,王坤正,裴福興,朱漢民,金大地,陶天遵,李恩,李寧華,張耀南,王曉濱,紀泉.  中華骨科雜志. 2015 (12)
[3]6-O-季銨化殼聚糖修飾超氧化物歧化酶的制備及性質(zhì)研究[J]. 許玲華,宋春霞,王鳳山,劉純慧.  中國藥學(xué)雜志. 2015(10)
[4]不同濃度木瓜蛋白酶建立兔膝骨關(guān)節(jié)炎模型的比較研究[J]. 韓冠英,凌沛學(xué),王鳳山,王桂蘭,邵華榮.  中國骨傷. 2012(05)
[5]骨關(guān)節(jié)炎診斷及治療指南[J].   中華風濕病學(xué)雜志. 2010 (06)
[6]關(guān)節(jié)腔內(nèi)注射不同蛋白酶建立兔膝骨關(guān)節(jié)炎模型的對比研究[J]. 鄧宇,伍筱梅,任醫(yī)民,錢元新,吳玉新,楊通.  中華關(guān)節(jié)外科雜志(電子版). 2009(03)
[7]殼聚糖關(guān)節(jié)腔注射對膝骨性關(guān)節(jié)炎關(guān)節(jié)功能的影響對比研究[J]. 康小平,葉永杰.  創(chuàng)傷外科雜志. 2006(05)

博士論文
[1]低分子量硫酸軟骨素的制備、抗補體活性構(gòu)效關(guān)系及治療骨性關(guān)節(jié)炎的實驗研究[D]. 李連.山東大學(xué) 2016
[2]關(guān)節(jié)腔注射黃原膠動物體內(nèi)藥代動力學(xué)研究[D]. 邵華榮.山東大學(xué) 2015
[3]黃原膠注射液的研制及其對實驗性骨關(guān)節(jié)炎療效和作用機制的研究[D]. 韓冠英.山東大學(xué) 2012
[4]羧甲基殼聚糖對大鼠骨關(guān)節(jié)炎軟骨細胞NF-κB信號通路的影響[D]. 丁萬軍.武漢大學(xué) 2011

碩士論文
[1]日柏醇抗骨性關(guān)節(jié)炎的作用及其機制的研究[D]. 李金.浙江大學(xué) 2015



本文編號：2934035