目的:（1）通過體外抗細粒棘球絳蟲原頭蚴篩選,推測可用于抗包蟲病篩選的靶點。（2）體外篩選得到的藥物,進行動物實驗找到一個或幾個對感染E.g小鼠有療效的藥物。（3）體外篩選結(jié)合動物體內(nèi)藥效實驗,建立可行的抗包蟲病篩選平臺。方法:（1）378種激酶抑制劑終濃度為5 μM殺傷細粒棘球絳蟲原頭蚴,亞甲基藍染色后篩選原頭蚴死亡率達到95%藥物。其次將藥物濃度降低到1μM,亞甲基藍染色后統(tǒng)計原頭蚴死亡率,選擇原頭蚴死亡率較高的藥物。最后通過系列濃度殺傷原頭蚴實驗,分析藥物殺傷原頭蚴的半數(shù)致死濃度（LC50）,選擇體外殺傷細粒棘球絳蟲原頭蚴最佳的藥物。（2）建立BABL/c小鼠繼發(fā)感染細粒棘球蚴模型,剖解感染6個月小鼠,選擇直徑范圍在5～10 mm包囊,進行藥物體外殺傷包囊實驗。（3）選擇體外殺傷原頭蚴及包囊最佳的藥物,通過灌胃給藥方式評價感染細粒棘球小鼠體內(nèi)藥效實驗,觀察小鼠血常規(guī)、肝臟腎臟功能及電解質(zhì)指標變化,臟器稱重分析臟器變化,病理檢查分析小鼠肝臟、腎臟及脾臟結(jié)構(gòu)變化,評價藥物安全性指標。評價包囊濕重、包囊死亡率及包囊透射電鏡分析超微結(jié)構(gòu)變化,評價藥物藥效指標。結(jié)果:本研究所選用的小分子激... 

【文章來源】：新疆醫(yī)科大學新疆維吾爾自治區(qū)

【文章頁數(shù)】：91 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

圖１－２藥物作用原頭蚴形態(tài)變化??

吸盤、頂突等結(jié)構(gòu)慢慢退化，鈣顆粒逐漸減少。原頭蚴培養(yǎng)２個月后發(fā)??育成囊，囊呈圓形或者橢圓形，頭節(jié)不可逆內(nèi)陷，頭部吸盤等結(jié)構(gòu)完全退化，囊外??發(fā)育出一層透明膠質(zhì)狀外囊壁，見圖１－４。??＃｜：?：??ｄＡｖ、：?Ｂ??ｉＡ?Ｕｅｌ?‘?ｆ?Ｂ?－Ｉ??圖１－４體外培養(yǎng)微囊的形態(tài)??Ｆｉｇ．１－４?Ｍｏｒｐｈｏｌｏｇｙ?ｏｆＥ．?ｇｒａｎｕｌｏｓｕｓ?ｃｙｓｔｓ?ｃｕｌｔｕｒｅｄ?ｉｎ?ｖｉｔｒｏ?ｆｏｒ?２?ｍｏｎｔｈｓ??注：Ａ培養(yǎng)１５天微囊；Ｂ培養(yǎng)２個月微囊??Ｎｏｔｅ：?Ｃｙｓｔｓ?ｃｕｌｔｕｒｅｄ?ｆｏｒ?１５?ｄａｙｓ；Ｂ?Ｃｙｓｔｓ?ｃｕｌｔｕｒｅｄ?ｆｏｒ?２?ｍｏｎｔｈｓ??將發(fā)育出角質(zhì)層囊壁的囊注射到小鼠體內(nèi)，感染ＢＡＬＢ／ｃ小鼠。解剖感染３個??月小鼠，發(fā)現(xiàn)小鼠體內(nèi)包囊多聚集于腹部脂肪，還有少許包囊鑲嵌于小鼠肝臟（圖１－５，??Ｂ），經(jīng)統(tǒng)計發(fā)現(xiàn)９０％以上小鼠肝臟附近均發(fā)現(xiàn)包囊，說明包囊具有肝臟傾向性。感??染６個月后，小鼠腹部明顯隆起，打開腹腔發(fā)現(xiàn)包囊多為游離單個包囊（圖１－５，?Ｂ）。??＇￡?：?％１：??系：暴??圖１－５小鼠細粒棘球蝴模型的觀察??Ｆｉｇ．１－５?Ｍｏｒｐｈｏｌｏｇｙ?ｏｆ?Ｅ．ｇｒａｎｕｌｏｓｕｓ?ｃｙｓｔｓ?ｉｎ?ｍｏｕｓｅ?ｍｏｄｅｌ??注：Ａ感染細粒棘球蚴３個月小鼠；Ｂ感染細粒棘球蚴６個月小鼠??Ｎｏｔｅ：?Ｅ．ｇｒａｎｕｌｏｓｕｓ?ｃｙｓｔｓ?ｉｎ?ａ?ｍｏｕｓｅ?ｆｏｒ?３?ｍｏｎｔｈｓ?（ａ）?ａｎｄ?ｆｏｒ?６?ｍｏｎｔｈｓ（Ｂ）．??取感染３個月和６個月小鼠的血清

吸盤、頂突等結(jié)構(gòu)慢慢退化，鈣顆粒逐漸減少。原頭蚴培養(yǎng)２個月后發(fā)??育成囊，囊呈圓形或者橢圓形，頭節(jié)不可逆內(nèi)陷，頭部吸盤等結(jié)構(gòu)完全退化，囊外??發(fā)育出一層透明膠質(zhì)狀外囊壁，見圖１－４。??＃｜：?：??ｄＡｖ、：?Ｂ??ｉＡ?Ｕｅｌ?‘?ｆ?Ｂ?－Ｉ??圖１－４體外培養(yǎng)微囊的形態(tài)??Ｆｉｇ．１－４?Ｍｏｒｐｈｏｌｏｇｙ?ｏｆＥ．?ｇｒａｎｕｌｏｓｕｓ?ｃｙｓｔｓ?ｃｕｌｔｕｒｅｄ?ｉｎ?ｖｉｔｒｏ?ｆｏｒ?２?ｍｏｎｔｈｓ??注：Ａ培養(yǎng)１５天微囊；Ｂ培養(yǎng)２個月微囊??Ｎｏｔｅ：?Ｃｙｓｔｓ?ｃｕｌｔｕｒｅｄ?ｆｏｒ?１５?ｄａｙｓ；Ｂ?Ｃｙｓｔｓ?ｃｕｌｔｕｒｅｄ?ｆｏｒ?２?ｍｏｎｔｈｓ??將發(fā)育出角質(zhì)層囊壁的囊注射到小鼠體內(nèi)，感染ＢＡＬＢ／ｃ小鼠。解剖感染３個??月小鼠，發(fā)現(xiàn)小鼠體內(nèi)包囊多聚集于腹部脂肪，還有少許包囊鑲嵌于小鼠肝臟（圖１－５，??Ｂ），經(jīng)統(tǒng)計發(fā)現(xiàn)９０％以上小鼠肝臟附近均發(fā)現(xiàn)包囊，說明包囊具有肝臟傾向性。感??染６個月后，小鼠腹部明顯隆起，打開腹腔發(fā)現(xiàn)包囊多為游離單個包囊（圖１－５，?Ｂ）。??＇￡?：?％１：??系：暴??圖１－５小鼠細粒棘球蝴模型的觀察??Ｆｉｇ．１－５?Ｍｏｒｐｈｏｌｏｇｙ?ｏｆ?Ｅ．ｇｒａｎｕｌｏｓｕｓ?ｃｙｓｔｓ?ｉｎ?ｍｏｕｓｅ?ｍｏｄｅｌ??注：Ａ感染細粒棘球蚴３個月小鼠；Ｂ感染細粒棘球蚴６個月小鼠??Ｎｏｔｅ：?Ｅ．ｇｒａｎｕｌｏｓｕｓ?ｃｙｓｔｓ?ｉｎ?ａ?ｍｏｕｓｅ?ｆｏｒ?３?ｍｏｎｔｈｓ?（ａ）?ａｎｄ?ｆｏｒ?６?ｍｏｎｔｈｓ（Ｂ）．??取感染３個月和６個月小鼠的血清

【參考文獻】：
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本文編號：2899322