目的1.使用非線性混合效應模型(nonlinear mixed effect model,NONMEM)軟件,建立MET在國人經皮冠狀動脈介入(Percutaneous coronary intervention,PCI)術后冠心病患者群體藥代動力學(population pharmacokinetics,PPK)模型,為美托洛爾(metoprolol,MET)個體化治療提供參考。2.探討CYP2D6*10基因變異對MET藥代動力學參數的影響。方法1.應用基因芯片法檢測CYP2D6*1/*10基因分型。2.應用液相色譜-串聯質譜(Liquid chromatography-tandem mass spectrometry/mass spectrometer,LC-MS/MS)法測定MET血漿濃度。3.采用一房室模型,應用NONMEM軟件建立MET PPK模型,定量考察43例患者性別、年齡、肝腎功能、CYP2D6基因變異、合并用藥、合并疾病等協變量對MET藥代動力學參數的影響。4.作圖評價模型擬合優(yōu)度,采用非參數自舉法考察MET PPK模型穩(wěn)定性和內部有效性,同時通過正態(tài)化預測分布誤差(Normalization prediction distribution error,NPDE)考察MET藥動學模型預測能力及是否可產生模擬數據。結果1.43例PCI術后冠心病患者CYP2D6基因型及等位基因分布頻率:CYP2D6*1/*1型18.61%(8例),CYP2D6*1/*10型51.16%(22例),CYP2D6*10/*10型30.23%(13例);*1 44.19%,*10 55.81%�；蛐头植碱l率符合Hardy-Weinberg平衡定律。2.LC-MS/MS法測定MET血漿濃度標準曲線回歸方程為Y=7.98*10~3*X+230(n=8,r=1.0000),線性范圍0.5-100ng.mL~(-1),檢測限為0.33 ng.mL~(-1)(S/N≥10)。提取回收率97.6-103.5%,日內精密度、日間精密度均小于5%,基質效應1.05-1.18。3.基于43例PCI術后冠心病患者92個血藥濃度點、CYP2D6基因型、合并用藥、合并疾病等相關資料建立MET的PPK最終模型為:CL/F(Lgh~(-1))=θ_(CL)*ICYP*e~ηV/F(L)=θ_V最終模型表明,僅有CYP2D6基因變異對MET清除率有影響,表現為CYP2D6*10的變異可降低MET清除率,CYP2D6*1/*10基因型患者MET清除率較CYP2D6*1/*1基因型患者下降36.6%,CYP2D6*10/*10基因型患者MET清除率較CYP2D6*1/*1基因型患者下降70.7%,呈現基因劑量效應。沒有發(fā)現對MET表觀分布容積有影響的協變量。4.最終模型的散點圖擬合度優(yōu)于最簡模型;非參數自舉法內部驗證穩(wěn)定性高達99.2%,相關偏差絕對值均小于10%,提示模型具有較好的穩(wěn)定性和內部有效性;NPDE方差齊性服從正態(tài)分布,提示模型具有良好的預測能力且可以產生模擬數據。結論1.本研究采用LC-MS/MS法檢測MET血漿濃度敏感性高、選擇性高、準確性好,為臨床MET濃度測定及藥代動力學研究提供可靠方法。2.CYP2D6*10基因變異是MET清除率重要影響因素,本研究建立的MET的PPK模型穩(wěn)定、可靠,可為MET個體化給藥提供參考。
【學位單位】：福建醫(yī)科大學
【學位級別】：碩士
【學位年份】：2018
【中圖分類】：R969.1
【部分圖文】：

圖 1 CYP2D6 的基因芯片法檢測結果圖共納入 CYP2D6*1/*1 基因型患者 8 例（18.61%），CYP2D6*1/*10 基因型 22例（51.16%），CYP2D6*10/*10 基因型 13 例（30.23%），*1 等位基因頻率為44.19%，*10 等位基因頻率 55.81%，詳見表 3。遺傳分析結果如表 4 所示，進行卡方檢驗后 P＞0.05，符合 Hard-Weinberg 平衡，提示入選患者來自較大的且處于隨機婚配的群體，具有群體代表性。表 3 CYP2D6 基因型分布基因型頻率(n，%) 等位基因頻率(%)CYP2D6 *1*1 *1*10 *10*10 *1 *10例數 8（18.61） 22（51.16） 13（30.23） 44.19 55.81注：*1 等位基因頻率=(CYP2D6*1*1×2+CYP2D6*1*10)/43×2*10 等位基因頻率=(CYP2D6*10*10×2+CYP2D6*1*10)/43×2

MET質譜圖AMET一級質譜圖BMET二級質譜圖

圖 3 MET LC-MS/MS 測定的色譜質譜圖A 標準品（酒石酸 MET） B 琥珀酸 MET 緩釋片 C 空白血漿D 空白血漿+標準樣品（0.05ng/mL）E 空白血漿+標準樣品（100ng/mL）F 患者血漿2.2.2 MET 標準曲線和檢出限本法測得 MET 血藥濃度標準曲線如圖 4 所示，得到回歸方程為：Y=7.98*103*X+230 (r=1.00，n=8)，其中線性范圍 0.50-100ng/mL，信噪比（S/N）≥10，當 S/N=10 時，求得 MET 的檢出限為 0.33 ng/mL。
【參考文獻】

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1 沈衛(wèi)峰;張奇;張瑞巖;;2015年急性ST段抬高型心肌梗死診斷和治療指南解析[J];國際心血管病雜志;2015年04期

2 溫志國;安亮;林鳳;王全哲;;CYP2D6基因多態(tài)性的臨床應用概況[J];分子診斷與治療雜志;2013年05期

3 張弨;趙榮生;翟所迪;單愛蓮;;群體藥代動力學概述[J];中國臨床藥理學雜志;2013年08期

4 李新剛;趙志剛;;群體藥代動力學研究進展[J];中國臨床藥理學雜志;2013年01期

5 李芹;王睿;郭雅;裴斐;;中國人群CYP2D6基因多態(tài)性對美托洛爾藥代動力學的影響[J];中國臨床藥理學與治療學;2008年07期

6 柯元南;陳紀林;;不穩(wěn)定性心絞痛和非ST段抬高心肌梗死診斷與治療指南[J];中華心血管病雜志;2007年04期

7 張弨,翟所迪;非線性混合效應模型法在群體藥代動力學和群體藥效學中的研究進展[J];國外醫(yī)學(藥學分冊);2004年04期

8 紀玲,潘世秀,吳健民,Jacqueline Marti-Jaun,Martin Hersberger;中國大陸人群CYP2D6基因多態(tài)性的檢測(英文)[J];Chinese Medical Journal;2002年12期

本文編號：2858744