【摘要】：白蛋白納米粒（BSA-NPs）是以白蛋白為基質，采用多種方法制備得到的納米級微粒。由于白蛋白納米粒給藥系統(tǒng)具有良好的靶向性、緩控釋效果以及生物相容性好等優(yōu)點，因此在藥物傳遞系統(tǒng)中占據著重要的地位。溫度敏感型原位凝膠在室溫下為液體制劑，能對外界環(huán)境溫度的變化產生響應，進而表現出由溶液相向凝膠相的相轉變。本實驗將原位凝膠給藥系統(tǒng)與白蛋白納米粒給藥系統(tǒng)相結合，使制劑在眼部給藥后發(fā)生膠凝、黏度增大，延長了載藥白蛋白納米粒在眼部的滯留時間，能更好的提高藥物在眼部的吸收和生物利用度。 本課題的內容主要分為兩部分，制備和研究了載有不同藥物的白蛋白納米粒原位凝膠給藥系統(tǒng)，并對兩者的性質進行初步考察。 第一部分小檗堿白蛋白納米粒原位凝膠給藥系統(tǒng)的制備和性質研究 本實驗采用泊洛沙姆407（F127）和泊洛沙姆188（F68）為溫敏凝膠基質，以凝膠的膠凝溫度為考察指標對處方進行優(yōu)化，得到優(yōu)化后的凝膠基質處方為26%（w/w） F127和4%（w/w）F68，該優(yōu)化處方在30.9℃以下時為流動性較好的液體，經人工模擬淚液（STF）按比例稀釋后在34.2℃以上會發(fā)生相轉變形成黏度較大的凝膠。以牛血清白蛋白（BSA）為納米粒基質，0.25%戊二醛為交聯劑，采用去溶劑化法制備了小檗堿白蛋白納米粒（Ber-BSA-NPs），然后以冷溶法制備了小檗堿白蛋白納米粒原位凝膠（Ber-BSA-NPs-Gel）。制得的凝膠在STF稀釋前膠凝溫度為（30.4±0.1）℃，STF稀釋后膠凝溫度為（34.4±0.1）℃。用NDJ-1型黏度計測定凝膠的黏度，分別測得到在室溫下STF稀釋前的凝膠黏度為（0.2630±0.0283）Pa·s，STF稀釋后的凝膠黏度為（0.2432±0.0215）Pa·s；加熱在34.5℃以上后，STF稀釋前的凝膠黏度為（0.5100±0.0184）Pa·s，STF稀釋后的凝膠黏度為（0.4900±0.0215）Pa·s。以小檗堿原位凝膠（Ber-Gel）和小檗堿溶液（Ber-Sol）為參比，采用透析袋擴散法考察了Ber-BSA-NPs-Gel的體外釋藥行為。實驗結果表明Ber-BSA-NPs-Gel具有較好的緩釋作用，制備得到的眼用溫敏凝膠符合眼部應用要求，具有良好的應用前景。 第二部分姜黃素白蛋白納米粒原位凝膠給藥系統(tǒng)的制備和性質研究 本實驗制備和評價了載有姜黃素白蛋白納米粒的溫敏原位凝膠（Cur-BSA-NPs-Gel）給藥系統(tǒng)。采用去溶劑法制備姜黃素白蛋白納米粒（Cur-BSA-NPs），以F127和F68為凝膠基質，冷溶法制備Cur-BSA-NPs-Gel。采用星點設計-效應面法考察F127和F68濃度對凝膠膠凝溫度的影響，并以膠凝溫度為指標，優(yōu)化凝膠基質處方。優(yōu)化后的凝膠處方為26%（w/w）F127和4%(w/w) F68，該處方在30.7℃以下為自由流動的液體制劑，用STF按比例稀釋后，在34.4℃以上會轉變成半固態(tài)的凝膠。用NDJ-1型黏度計分別測定了用STF稀釋前以及稀釋后的凝膠黏度。分別采用透析袋擴散法和無膜溶蝕法考察凝膠的體外釋放行為和溶蝕行為。考察結果表明Cur-BSA-NPs-Gel有很好的緩釋效果，并且在凝膠中加入白蛋白納米粒并不影響凝膠的結構。制劑的體內評價試驗采用的試驗動物為新西蘭大白兔。眼部刺激性評價采用Draize試驗，試驗結果表明Cur-BSA-NPs-Gel對眼部無刺激，Cur-BSA-NPs-Gel作為眼部給藥系統(tǒng)安全無毒。制劑體內生物利用度通過眼部給藥測定房水中藥物濃度來評價，該試驗以姜黃素混懸液（Cur-Sus）為參比。試驗結果表明Cur-BSA-NPs-Gel能夠顯著提高姜黃素在房水中的濃度，進而提高藥物的生物利用度。因此本制劑作為眼部給藥系統(tǒng)用于DR的治療具有較好的臨床應用前景。
【學位授予單位】：重慶醫(yī)科大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2014
【分類號】：R943
【圖文】：

(A) (B)(C) (D)圖2-1 不同濃度F127(X1)和F68（X2）對膠凝溫度影響的反應面曲線圖和等高線圖。Fig. 2-1 Response surface plot and contour map showing concentration effect of Pluronic F127(X1) and Pluronic F68 (X2) on sol-gel transition temperature.3. 討論在本部分內容中姜黃素白蛋白納米粒的制備中，BSA 的溶劑采用的是超純水，這與第一部分小檗堿白蛋白納米粒是制備中采用 pH 9 的 Na2CO3-NaHCO3緩沖液不同，這是由于姜黃素穩(wěn)定性較差，在堿性條件下即發(fā)生電子云偏離的共軛效應，顏色變紅，因此在制備 Cur-BSA-NPs 時不能選用堿性的溶劑。在本實驗中采用了星點設計-效應面法進行溫敏凝膠的處方的篩選，該法與第一部分中的處方篩選方法相比，更具邏輯性，考察因素水平更全面。并且經過軟件處理后，得到的反應面曲線圖和等高線圖能更清晰地展示?

圖 2-2 姜黃素在 50%乙醇中的標準曲線Fig. 2-2 Standard curve of Cur in 50% ethanolur-BSA-NPs 包封率的測定游離 Cur 藥物的測定制得的 Cur-BSA-NPs 混懸液用蒸餾水定容至 10mL，精密移取 2 mL0min（12000r·min-1），取上清液 0.5 mL，用 50%乙醇定容至 5 mL，長處測定其吸光度值，計算制劑中游離 Cur 藥物的量。ur-BSA-NPs 中 Cur 總量的測定密量取 200μL Cur-BSA-NPs 混懸液，加入 0.125%胰蛋白酶 200μL，0min，然后用 50%乙醇定容至 5 mL，最大吸收波長處測定其吸光度中 Cur 總量。據公式：包封率=（制劑中藥物總量－游離藥物的量）÷制劑中藥物

重慶醫(yī)科大學碩士研究生學位論文將制得的 Cur-BSA-NPs 混懸液稀釋一定倍數后，用 Zetasizer Nano 納米粒度儀測定混懸液中納米粒的粒徑，測得 Cur-BSA-NPs 混懸液中納米粒的平均粒徑為221.2nm。其粒徑分布如圖 2-3。將得到的 Cur-BSA-NPs 混懸液滴加到一 200 目的銅網上，用濾紙吸去多余液體，放置風干兩小時后，于 Hitachi-7500 透射電鏡觀察其外觀形態(tài)�？梢娙鐖D 2-4 所示，Cur-BSA-NPs 為分布較均勻的外觀圓整的球形顆粒。2.3 Cur-BSA-NPs 粒徑和形態(tài)考察

【參考文獻】

相關期刊論文 前1條

1 冼遠芳;李微;郝游游;楊國清;高喜安;;芐達賴氨酸眼用溫敏凝膠的制備[J];華西藥學雜志;2011年03期

本文編號：2746762