【摘要】:前列腺癌是指發(fā)生在前列腺上皮的惡性腫瘤,是男性中的第二大癌癥,并且是全世界男性癌癥死亡的主要原因之一。黑色素瘤是一種源自黑色素細(xì)胞,并且是皮膚癌中最?lèi)盒缘哪[瘤,易發(fā)生遠(yuǎn)端轉(zhuǎn)移。目前,臨床上最有效的治療手段主要仍為手術(shù)治療、放療和化療等,化療是目前治療癌癥最有效的手段之一,但其治療效果不容樂(lè)觀(guān),主要原因是化療藥物多為廣譜性,具有靶向性差,毒副作用大,體內(nèi)循環(huán)時(shí)間短等缺點(diǎn),進(jìn)而使其臨床應(yīng)用受到了限制。實(shí)驗(yàn)?zāi)康?根據(jù)Sigma受體在前列腺癌和黑色素瘤細(xì)胞表面高表達(dá),并能夠與其特異性配體茴香酰胺(AA)相結(jié)合的特性,通過(guò)對(duì)能夠發(fā)生靜電相互作用進(jìn)而裝載化療藥物的長(zhǎng)循環(huán)靶向金納米遞送系統(tǒng)制備方法的探索與優(yōu)化,制備出一種能夠裝載表阿霉素的長(zhǎng)循環(huán)靶向納米制劑,建立相應(yīng)化療藥物的含量檢測(cè)方法,并對(duì)最終劑型進(jìn)行表征,以及體外抗腫瘤作用的相關(guān)研究。實(shí)驗(yàn)方法:(1)建立表阿霉素的含量檢測(cè)方法,使用紫外分光光度法或高效液相色譜法檢測(cè)金納米制劑中表阿霉素的含量,包括標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)的繪制。(2)對(duì)裝載表阿霉素的金納米制劑的制備方法進(jìn)行了探索和優(yōu)化,包括不同的藥質(zhì)比,孵育時(shí)間和孵育溫度等,并最終根據(jù)其表征及穩(wěn)定性等確定最佳的制備方法和條件,得到成熟的劑型。(3)對(duì)兩種裝載表阿霉素的金納米制劑Au NP-PEG5000.EPI和Au NP-PEG5000-AA.EPI進(jìn)行制備和表征,包括粒徑大小、PDI及Zeta電位,采用離心的方法檢測(cè)表阿霉素的包封率,并對(duì)其在4℃0.01 M PBS(制劑制備環(huán)境)和37℃含50%FBS的生理鹽水(模擬人生理環(huán)境)中的穩(wěn)定性進(jìn)行考察;考察裝載表阿霉素的金納米制劑在37℃條件下p H敏感的體外藥物釋放情況。(4)考察金納米制劑的體外抗腫瘤作用,應(yīng)用MTT的方法,考察靶向與非靶向金納米制劑及其對(duì)照組對(duì)前列腺癌細(xì)胞PC-3和黑色素瘤細(xì)胞B16的細(xì)胞毒性作用;應(yīng)用熒光顯微鏡考察靶向與非靶向金納米顆粒在PC-3和B16細(xì)胞中的細(xì)胞攝取情況;采用流式細(xì)胞術(shù)研究靶向與非靶向金納米制劑對(duì)PC-3和B16細(xì)胞的誘導(dǎo)凋亡情況,并采用Western Blot對(duì)相關(guān)凋亡調(diào)控因子Caspase 3,Bcl-2以及Bax的表達(dá)情況進(jìn)行考察,確定相關(guān)凋亡機(jī)制;應(yīng)用共聚焦顯微鏡考察靶向與非靶向金納米制劑在PC-3和B16細(xì)胞中的內(nèi)體逃逸情況。實(shí)驗(yàn)結(jié)果:(1)繪制了表阿霉素含量標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn),在測(cè)定濃度范圍內(nèi)線(xiàn)性關(guān)系良好。(2)通過(guò)對(duì)金納米制劑制備方法的探索和優(yōu)化,確定最終藥質(zhì)比EPI:Au NPs(w:w)=1:5,孵育溫度為45℃,孵育時(shí)間為12 h,此時(shí)EPI包封率最高,可達(dá)到80%左右。(3)對(duì)靶向與非靶向金納米制劑進(jìn)行表征,粒徑大小均在130-160nm之間,PDI在0.22左右,分布均勻,由于表阿霉素帶正電,故裝載表阿霉素后,其Zeta電位也發(fā)生了相應(yīng)變化,并測(cè)得對(duì)表阿霉素的包封率可達(dá)到80%左右,且在4℃0.01 M PBS和37℃含50%FBS的生理鹽水中穩(wěn)定性良好;體外釋放結(jié)果顯示,金納米制劑具有p H敏感的藥物釋放行為,對(duì)表阿霉素的緩釋作用顯著,且在p H 5.5(模擬腫瘤細(xì)胞內(nèi)體環(huán)境p H)條件下釋放率更高。(4)MTT結(jié)果顯示,靶向的金納米制劑對(duì)PC-3和B16細(xì)胞均表現(xiàn)出顯著的殺傷作用;熒光顯微鏡下可以觀(guān)察到,靶向的金納米制劑在PC-3和B16細(xì)胞中均有更高的攝取;流式結(jié)果顯示,靶向的金納米制劑能夠在PC-3和B16細(xì)胞中更顯著地誘導(dǎo)其凋亡,并且相關(guān)凋亡調(diào)控因子Caspase 3各組間表達(dá)量無(wú)顯著性差異,而針對(duì)Cleaved caspase 3和促凋亡因子Bax,靶向金納米制劑組均觀(guān)察到更高的表達(dá),且對(duì)于抑制凋亡因子Bcl-2,觀(guān)察到靶向金納米組表達(dá)最低;共聚焦顯微鏡的結(jié)果可以看出,靶向金納米制劑組有更多的表阿霉素從細(xì)胞內(nèi)體中逃出,避免其在內(nèi)體的酸性環(huán)境中質(zhì)子化后被隔離,使藥物能夠最大限度的發(fā)揮作用。本課題制備了一種能夠有效裝載表阿霉素的長(zhǎng)循環(huán)金納米靶向遞送系統(tǒng),能夠大大降低表阿霉素對(duì)機(jī)體其他正常組織和器官的毒副作用。靶向作用能使得藥物在腫瘤區(qū)域富集,提高藥物對(duì)腫瘤的殺傷作用。因此,本研究也為靶向遞送表阿霉素的臨床應(yīng)用提供了有力的實(shí)踐依據(jù)。
【圖文】:
前列腺癌是指發(fā)生在前列腺上皮的惡性腫瘤,是男性中的第二大癌癥,并且是全世界男性癌癥死亡的主要原因之一。黑色素瘤是一種源自黑色素細(xì)胞,并且是皮膚癌中最?lèi)盒缘哪[瘤,易發(fā)生遠(yuǎn)端轉(zhuǎn)移。目前,臨床上最有效的治療手段主要仍為手術(shù)治療、放療和化療等,化療是目前治療癌癥最有效的手段之一,但其治療效果不容樂(lè)觀(guān),主要原因是化療藥物多為廣譜性,具有靶向性差,毒副作用大,體內(nèi)循環(huán)時(shí)間短等缺點(diǎn),進(jìn)而使其臨床應(yīng)用受到了限制。實(shí)驗(yàn)?zāi)康模焊鶕?jù) Sigma 受體在前列腺癌和黑色素瘤細(xì)胞表面高表達(dá),并能夠與其特異性配體茴香酰胺(AA)相結(jié)合的特性,通過(guò)對(duì)能夠發(fā)生靜電相互作用進(jìn)而裝載化療藥物的長(zhǎng)循環(huán)靶向金納米遞送系統(tǒng)制備方法的探索與優(yōu)化,制備出一種能夠裝載表阿霉素的長(zhǎng)循環(huán)靶向納米制劑,建立相應(yīng)化療藥物的含量檢測(cè)方法,并對(duì)最終劑型進(jìn)行表征,以及體外抗腫瘤作用的相關(guān)研究。

開(kāi)了臨床的應(yīng)用前景,也提高了患者的生存質(zhì)量概述EPI)又稱(chēng)表柔比星,是阿霉素(DOX)的同分抗腫瘤化療藥,對(duì)細(xì)胞周期有非特異性,對(duì)多種有蒽環(huán),屬蒽環(huán)類(lèi)藥物,因此,其臨床應(yīng)用往往。EPI 的作用機(jī)制為可直接作用于腫瘤細(xì)胞的 D,干擾細(xì)胞的轉(zhuǎn)錄過(guò)程,進(jìn)而影響 mRNA 的生。此外,EPI 對(duì)拓樸異構(gòu)酶Ⅱ也有抑制作用,與效,且對(duì)心臟的毒性相對(duì)較小。盡管近年來(lái)以 E于晚期癌癥治療,然而,,EPI 的非靶向性仍會(huì)引存質(zhì)量下降,很多患者常常因?yàn)闊o(wú)法耐受而被迫
【學(xué)位授予單位】:吉林大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2019
【分類(lèi)號(hào)】:R943;R96
【相似文獻(xiàn)】
相關(guān)期刊論文 前10條
1 劉源;周建平;王偉;;聚乙二醇修飾靶向納米制劑的研究進(jìn)展[J];中國(guó)藥科大學(xué)學(xué)報(bào);2017年03期
2 張棟;潘小磊;王尚;關(guān)吉斌;孫進(jìn);;RP-HPLC法測(cè)定他克莫司聚酸酐納米制劑中他克莫司的含量[J];中國(guó)藥劑學(xué)雜志(網(wǎng)絡(luò)版);2014年01期
3 王署娟;劉強(qiáng);宋海星;榮湘民;彭建偉;王小娟;張振華;陳利軍;;納米制劑對(duì)小白菜生長(zhǎng)及氮肥利用率的影響[J];中國(guó)農(nóng)學(xué)通報(bào);2011年13期
4 許幼發(fā);程丹;傅志勤;陳建明;;多西他賽納米制劑的研究進(jìn)展[J];藥學(xué)服務(wù)與研究;2018年02期
5 朱冰;盛丹丹;李善心;張黎;;鹽霉素納米制劑的研究進(jìn)展[J];藥學(xué)實(shí)踐雜志;2016年06期
6 崔兵兵;程麗芳;閆雪生;;聚合物載體在納米制劑中的應(yīng)用[J];中國(guó)實(shí)驗(yàn)方劑學(xué)雜志;2014年08期
7 張艷艷;付旭東;趙繼敏;張曉艷;趙明耀;張振中;;紫杉醇納米制劑在小鼠體內(nèi)的藥代動(dòng)力學(xué)研究[J];中國(guó)現(xiàn)代醫(yī)學(xué)雜志;2013年31期
8 陳美婉;陳銳娥;李穎博;譚雯;王一濤;;冬凌草甲素納米制劑的研究和應(yīng)用[J];中國(guó)實(shí)驗(yàn)方劑學(xué)雜志;2011年16期
9 唐宜軒;李
本文編號(hào):2662545
本文鏈接:http://www.sikaile.net/yixuelunwen/yiyaoxuelunwen/2662545.html