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異煙肼對(duì)大鼠細(xì)胞因子和巨噬細(xì)胞功能的影響

發(fā)布時(shí)間:2020-02-07 20:17
【摘要】:目的:研究異煙肼對(duì)大鼠外周血細(xì)胞因子(IL-6、IL-12、IFN-γ)和巨噬細(xì)胞功能的影響,并對(duì)其可能的影響機(jī)制進(jìn)行探討。方法:1.清潔級(jí)SD大鼠60只,雄性,2月齡(體重:150±30g),隨機(jī)分為3組,分別為喂藥1月組、喂藥3月組、喂藥3月后停藥1月組,每組各20只,以上3組各組再隨機(jī)等分為實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組,每組各10只。2.上述SD大鼠于相同標(biāo)準(zhǔn)條件下飼養(yǎng),實(shí)驗(yàn)組用異煙肼灌胃,對(duì)照組用生理鹽水灌胃。3.酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA法)檢測大鼠外周血細(xì)胞因子IL-6、IL-12、IFN-γ的含量,瓊脂平板法檢測大鼠外周血溶菌酶的含量,硝酸鉛法(Comori法)檢測大鼠腹腔液巨噬細(xì)胞內(nèi)酸性磷酸酶的活性。4.IL-6、IL-12、IFN-γ和溶菌酶相同時(shí)間點(diǎn)實(shí)驗(yàn)組與對(duì)照組兩組間比較采用兩獨(dú)立樣本t檢驗(yàn),,方差不齊者,采用t始煅,不同时紲Z愣哉兆樽檳諶楸冉喜捎胵檢驗(yàn),結(jié)果用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(ˉx±s)表示,P0.05有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。酸性磷酸酶相同時(shí)間點(diǎn)實(shí)驗(yàn)組與對(duì)照組兩組間比較采用秩和檢驗(yàn),不同時(shí)間點(diǎn)對(duì)照組組內(nèi)三組比較采用Kruskal-Wallis H檢驗(yàn),若有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,可進(jìn)一步用Nemenyi檢驗(yàn)作兩兩比較,結(jié)果用平均秩次表示,P0.05有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。結(jié)果:1.相同時(shí)間點(diǎn)實(shí)驗(yàn)組與對(duì)照組IL-12、IFN-γ和溶菌酶含量進(jìn)行比較,差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。2.喂藥1月組實(shí)驗(yàn)組與對(duì)照組酸性磷酸酶進(jìn)行比較,實(shí)驗(yàn)組高于對(duì)照組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05),余差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。3.不同時(shí)間點(diǎn)對(duì)照組組內(nèi)IL-12和溶菌酶比較,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05);不同時(shí)間點(diǎn)對(duì)照組組內(nèi)IFN-γ和酸性磷酸酶比較,差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。4.本實(shí)驗(yàn)未檢測出IL-6,可能由于該實(shí)驗(yàn)大鼠體內(nèi)IL-6含量低于該ELISA試劑盒檢測下限。結(jié)論:1.隨著大鼠月齡增加,大鼠血清IL-12含量和溶菌酶含量降低。2.異煙肼可能增加大鼠血清IL-12含量,停藥后可恢復(fù);異煙肼對(duì)大鼠血清IFN-γ和血清溶菌酶含量無明顯影響;異煙肼能短暫增強(qiáng)大鼠腹腔液巨噬細(xì)胞內(nèi)酸性磷酸酶活性,但長期作用不明顯。3.異煙肼對(duì)免疫功能影響相對(duì)較小,未發(fā)現(xiàn)免疫抑制作用。
【圖文】:

實(shí)驗(yàn)大鼠,異煙肼,灌胃


以上 3 組各組再隨機(jī)等分為實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組,每組各 10 只。大鼠尾部編號(hào)。驗(yàn)動(dòng)物的飼養(yǎng)方法:有大鼠在標(biāo)準(zhǔn)環(huán)境(陰暗、安靜環(huán)境,溫度 23℃±3℃,相對(duì)10%)下適應(yīng)性喂養(yǎng)一周。驗(yàn)組:每次灌胃前稱重大鼠,并記錄。將異煙肼片研磨成粉末理鹽水配制成異煙肼藥液,大鼠灌胃異煙肼藥液劑量為成人使物劑量的 6 倍(120mg/kg),配制成 12mg/ml 的異煙肼藥液。異煙肼藥液按每 100g 大鼠體重灌胃 1ml,隔日一次灌胃。照組:用 0.9%生理鹽水按每 100g 大鼠體重灌胃 1ml,隔日一次條件同實(shí)驗(yàn)組。(見圖 1)

大鼠,劍突,血液,碘酒


使大鼠頭部與軀干部處于一條直線,充分暴露大鼠軀干部。實(shí)驗(yàn)動(dòng)物采血方法:將大鼠劍突周圍用碘酒及酒精消毒后,操作者右手持 5ml 注射貼劍突下方與胸壁成 30°角,微向左位于心臟方向進(jìn)針 2.5~針邊緩慢回抽,當(dāng)阻力消失、回血量多時(shí)即為心臟血。采集 3m后拔出針頭,將采集到的血液靜置于促凝管中,以左手拇指按部位約 1min。將促凝管中的血液以 3000r/min 離心 20min,分細(xì)胞,并將血清分裝于無菌 EP 管中,置于-80℃超低溫冰箱中(見圖 2)
【學(xué)位授予單位】:瀘州醫(yī)學(xué)院
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2014
【分類號(hào)】:R965

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