【摘要】：帕金森病(PD)大鼠腦微透析液中左旋多巴(L-DOPA)和多巴胺(DA)的高靈敏檢測技術(shù),是PD相關(guān)的臨床醫(yī)學(xué)及L-DOPA減毒增效協(xié)同藥物篩選必不可少的手段。采用d0/d3-10-甲基-吖啶酮-2-磺酰氯(d0/d3-MASC)作為穩(wěn)定同位素編碼衍生試劑,聯(lián)合超聲波輔助-分散液液微萃取(UA-DLLME)技術(shù),建立并驗證了超高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜(UHPLC-MS/MS)快速檢測L-DOPA和DA的分析方法。分別使用d0-MASC和d3-MASC衍生微透析液樣品和混合對照品,將衍生溶液混合后采用UA-DLLME技術(shù)富集凈化,繼而進行UHPLC-MS/MS檢測(多反應(yīng)監(jiān)測模式),以d3-MASC衍生物作為d0-MASC衍生物的內(nèi)標(biāo)物進行定量。實驗表明,在乙腈/水(pH 10.8碳酸鈉-碳酸氫鈉緩沖液)溶液中37℃下反應(yīng)3.0 min后衍生化反應(yīng)完成,梯度洗脫條件下2.0 min可完成分離檢測,線性范圍為0.20~1 500.0 nmol/L,相關(guān)系數(shù)大于0.994,L-DOPA和DA的檢出限(S/N=3)分別為0.005和0.009nmol/L。分析方法評價結(jié)果良好,與已報道方法相比在靈敏度、分析速度和抗基質(zhì)干擾等方面具有優(yōu)勢,本方法已成功應(yīng)用于測定中藥方劑首烏方對PD大鼠腦微透析液中L-DOPA和DA濃度波動的影響。

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本文編號：2570274